卵巢癌發(fā)病率在婦科惡性腫瘤中居第三位。由于2/3的卵巢癌患者在中晚期才被確診,故近年來死亡率持續(xù)升高。目前卵巢癌主要的臨床治療手段為手術配合化療,主要化療方案為鉑類加紫杉醇類聯(lián)合用藥。然而,經(jīng)過治療后的卵巢癌患者2年內(nèi)復發(fā)比例約占75%,5年生存率在30%左右。因此,針對卵巢癌更有效的治療方法急需被找到。腫瘤的復發(fā)是涉及一系列基因調(diào)控的多步驟的復雜過程,包括細胞的再增殖、黏附、基質(zhì)降解、細胞遷移以及腫瘤血管生成等多個環(huán)節(jié),但經(jīng)治療后殘存的或者瀕臨死亡的腫瘤細胞再次獲得增殖的能力,我們把腫瘤細胞這種由死而生的現(xiàn)象稱為“鳳凰涅槃”現(xiàn)象,但“鳳凰涅槃”現(xiàn)象的機制并不清楚。近年來許多研究表明腫瘤細胞的再增殖與其所處微環(huán)境密切相關。腫瘤微環(huán)境包括癌細胞和各種炎癥因子和介質(zhì)。有研究指出腫瘤化療后,會使這些瀕死的腫瘤細胞釋放大量產(chǎn)生的炎癥介質(zhì),作為凋亡執(zhí)行蛋白Caspase-3,其激活可活化鈣非依賴性磷脂酶A2（calcium-independent phospholipaseA2,iPLA2）,進而刺激花生四烯酸（arachidonic acid,AA）生成,啟動AA代謝途徑,合成前列腺素E2（p... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

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VP-16處理24h及撤藥后細胞活性變化

第3 篇 實驗研究 第1 章 化療藥物激活卵巢癌細胞SKOV-3“鳳凰涅槃”信號通路促進卵巢癌復發(fā)機制研究在此基礎上，于 6 孔板給予 5μM VP-16 處理 24h，并且觀察 VP-16 處理后 10天內(nèi) SKOV-3 細胞生長情況（圖 3.2）。光鏡下觀察結果顯示，與藥物未處理組（“Control”組，簡寫為“con”組）相比，VP-16 處理后 1 天后（day1），細胞增殖速度減緩，但無明顯死亡現(xiàn)象。VP-16 處理后第二天到第四天（day2-day4）貼壁細胞持續(xù)大量死亡，VP-16處理后第五天到第十天（day5-day10）貼壁細胞仍有部分死亡，但板底始終殘存部分細胞，細胞形態(tài)明顯改變。光鏡下的結果驗證 5μM VP-16 處理后 10 天內(nèi)的細胞凋亡程度符合建立細胞凋亡模型的給藥濃度。

吉林大學博士學位論文過 VP-16 處理的 SKOV-3 細胞與上層（receptor）小室內(nèi) SKOV-3 細胞共同培養(yǎng) 10天，觀察上層（receptor）小室內(nèi) SKOV-3 細胞增殖情況。具體實驗分組如實驗方法 2.3 所述：Control 組 (receptor 細胞+未經(jīng) VP-16 處理 feeder 細胞共培養(yǎng)組)，Model（VP-16）組 (receptor 細胞+經(jīng) VP-16 處理 feeder 細胞共培養(yǎng)組)。結晶紫染色結果如圖 3.3A 所示，經(jīng)過細胞固定染色后，Model（VP-16）組 receptor層細胞密度明顯高于 Control 組。通過 33%HAc 定量顯示（圖 3.3B），Model 組吸光度顯著高于 Control 組，約為 Control 組的 1.68 倍（p<0.05）。此實驗結果表明下層化療藥物 VP-16 處理后的 SKOV-3 凋亡細胞能夠引起共培養(yǎng)的上層未處理卵巢癌 SKOV-3 細胞增殖。


本文編號：3008381