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凋膜止崩液對(duì)人離體子宮內(nèi)膜增生癥腺細(xì)胞中PTEN和Rb2/p130表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-01-25 15:05
  功能失調(diào)性子宮出血(dysfunctional uterine bleeding,DUB)是由下丘腦-垂體-卵巢軸功能失調(diào)引起的不正常子宮出血癥,其中85%為無排卵型功血,其主要病理形態(tài)為子宮內(nèi)膜增生,子宮內(nèi)膜增生癥(endometrial hyperplasia,EH)在分子水平上的發(fā)病機(jī)理目前尚不完全清楚,多種致病因素在不同階段作用于不同基因,導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)及表達(dá)水平的改變,從而造成子宮內(nèi)膜增生癥,其中,PTEN、Rb2/p130基因突變失活,致PTEN、Rb2/p130蛋白表達(dá)降低或不表達(dá)是重要因素之一。目的:通過凋膜止崩液對(duì)人離體子宮內(nèi)膜增生癥(EH)腺上皮細(xì)胞PTEN、Rb2/p130基因表達(dá)影響,探討其對(duì)EH的治療機(jī)理。方法:分離、培養(yǎng)30例原代人子宮內(nèi)膜增生癥(EH)腺上皮細(xì)胞并采用CK-19鑒定,將純化后的腺上皮細(xì)胞隨機(jī)分為四組:空白對(duì)照組、凋膜止崩液大劑量組(50μg/ml)、凋膜止崩液中劑量組(25μg/ml)、凋膜止崩液小劑量組(12.5μg/ml),分別于用藥24h、48h、72h觀察下列指標(biāo)的變化:四甲基偶氮噻唑蘭(MTT)法檢測(cè)3個(gè)時(shí)間點(diǎn)各組細(xì)胞的增殖率、實(shí)時(shí)... 

【文章來源】:陜西中醫(yī)藥大學(xué)陜西省

【文章頁數(shù)】:36 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本選取
    1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及實(shí)驗(yàn)藥品
    1.3 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備
    1.4 凋膜止崩液組成
2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)方法
    2.2 細(xì)胞鑒定方法
    2.3 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增值率
    2.4 RT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞PTEN、Rb2/p130mRNA表達(dá)
        2.4.1 注意事項(xiàng)
        2.4.2 總RNA提取步驟
        2.4.3 單鏈cDNA的合成
        2.4.4 PCR反應(yīng)
        2.4.5 結(jié)果分析
    2.5 免疫印跡法檢測(cè)各組細(xì)胞PTEN、Rb2/p130蛋白表達(dá)
        2.5.1 細(xì)胞蛋白樣品制備
        2.5.2 BCA蛋白質(zhì)定量
        2.5.3 SDS-PAGE電泳
3 統(tǒng)計(jì)
4 結(jié)果
    4.1 細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果
    4.2 細(xì)胞鑒定結(jié)果
    4.3 凋膜止崩液對(duì)腺上皮細(xì)胞增殖率的影響
    4.4 RT-PCR檢測(cè)結(jié)果
    4.5 Western blot檢測(cè)結(jié)果
5 討論
    5.1 關(guān)于實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的選擇
    5.2 凋膜止崩液治療子宮內(nèi)膜增生癥的分子學(xué)機(jī)制
    5.3 凋膜止崩液治療子宮內(nèi)膜增生癥的創(chuàng)新與優(yōu)勢(shì)
綜述
    1 祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)子宮內(nèi)膜增生癥(EH)的認(rèn)識(shí)
    2 中醫(yī)藥對(duì)子宮內(nèi)膜增生癥(EH)的辨證論治
    3 子宮內(nèi)膜增生癥(EH)分子機(jī)制研究進(jìn)展
    4 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)子宮內(nèi)膜增生癥(EH)的治療進(jìn)展
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]凋膜止崩方對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜增生癥子宮內(nèi)膜組織中MMP-1及TIMP-1 mRNA表達(dá)的影響[J]. 賀豐杰,李小寧,樊麗萍.  吉林中醫(yī)藥. 2012(02)
[2]子宮內(nèi)膜癌中p-AKT與PTEN、P53、HER-2表達(dá)的相關(guān)性及意義[J]. 張曉明,梁英,董穎,張瑩,王穎,孟佚婷,李挺.  北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(01)
[3]活血化瘀法靶向干預(yù)大鼠子宮內(nèi)膜增生癥的超微結(jié)構(gòu)研究[J]. 賀豐杰,朱虹麗,李小寧.  江蘇中醫(yī)藥. 2011(05)
[4]子宮內(nèi)膜癌組織中包含WW域的氧化還原酶和脆性組氨酸三聯(lián)體蛋白的表達(dá)[J]. 王學(xué)博,喬玉環(huán),郭瑞霞,張志萍,馮秀麗.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2010(01)
[5]子宮內(nèi)膜癌中pRb2/p130的表達(dá)及意義[J]. 支霜,傅芬.  江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2009(06)
[6]子宮內(nèi)膜增生及子宮內(nèi)膜腺癌中PTEN、P16蛋白的表達(dá)及臨床意義[J]. 薛玲玲,何濤,米建強(qiáng),李會(huì)平.  河南醫(yī)學(xué)研究. 2009(01)
[7]祛膜止崩軟膏宮腔靶向用藥治療無排卵性功血36例[J]. 賀豐杰.  陜西中醫(yī). 2009(03)
[8]抑癌基因PTEN在子宮內(nèi)膜癌中的研究進(jìn)展[J]. 楊雪,韓素萍.  腫瘤學(xué)雜志. 2009(02)
[9]子宮內(nèi)膜癌中Rb2/P130、PTEN及Ki-67的表達(dá)及意義[J]. 陳柯,陳晶晶,王曉秋,胡聞.  臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志. 2008(04)
[10]鴉膽子油乳對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥大鼠VEGF的影響[J]. 孫忻,韓玉芬,侯麗輝,吳效科,楊新鳴.  科技導(dǎo)報(bào). 2008(14)



本文編號(hào):2999436

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