發(fā)布時(shí)間：2021-01-10 10:26

　　研究背景Wnt信號(hào)通路持續(xù)激活參與了腫瘤干細(xì)胞特性的維持,是卵巢上皮癌復(fù)發(fā)及化療耐藥的關(guān)鍵機(jī)制之一。LGR6是富含亮氨酸的G蛋白偶聯(lián)受體,被認(rèn)為參與了經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的激活;但在卵巢上皮癌中,LGR6的臨床意義、生物學(xué)功能以及其對(duì)Wnt信號(hào)通路的調(diào)控尚未闡明。研究目的探討LGR6在卵巢上皮癌組織中表達(dá)的臨床意義;LGR6在卵巢上皮癌細(xì)胞中對(duì)腫瘤干細(xì)胞樣特性維持、對(duì)化療藥物敏感性的影響,以及在此過(guò)程中LGR6對(duì)Wnt經(jīng)典信號(hào)通路的影響。研究方法1.用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、免疫蛋白印跡、免疫組織化學(xué)等方法檢測(cè)LGR6在卵巢上皮癌組織中的表達(dá),分析294例卵巢上皮癌臨床樣品中LGR6的表達(dá)與化療療效、生存預(yù)后的關(guān)系。2.通過(guò)siRNA建立穩(wěn)定的LGR6低表達(dá)卵巢上皮癌細(xì)胞株,構(gòu)建卵巢癌細(xì)胞模型,用無(wú)血清懸球培養(yǎng)法、流式細(xì)胞術(shù)分析側(cè)群細(xì)胞比例、熒光定量PCR檢測(cè)干細(xì)胞分子標(biāo)記等方法,驗(yàn)證LGR6在誘導(dǎo)和維持腫瘤干細(xì)胞特性中的作用。3.在卵巢上皮癌細(xì)胞模型中用CCK-8法、AnnexinV-FITC/PI雙染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡、JC-1法測(cè)定線(xiàn)粒體膜電位、Caspase-9/-3底物活性測(cè)定法和免... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：116 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２－３?ＬＧＲ６在正常卵巢上皮細(xì)胞株及８?jìng)�(gè)卵巢癌細(xì)胞株中蛋白的表達(dá)??－

ＨＯＳＥｐｉＣ?ａｎｄ?８?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??以上結(jié)果提示，高水平的ＬＧＲ６表達(dá)有可能與卵巢上皮癌的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。??２．３?ＬＧＲ６與卵巢上皮癌不良預(yù)后的關(guān)系??２．３．１?ＬＧＲ６的表達(dá)與卵巢上皮癌的組織學(xué)類(lèi)型相關(guān)??為了進(jìn)一步了解ＬＧＲ６在卵巢上皮癌不同組織學(xué)類(lèi)型中的表達(dá)情況，本研??究擴(kuò)大樣本量，選用２９４例卵巢上皮癌和４０例正常卵巢組織的石蠟包埋切片進(jìn)??行ＬＧＲ６免疫組化檢測(cè)。以上病人的組織標(biāo)本都是在醫(yī)院手術(shù)切除的過(guò)程中獲??得，均經(jīng)病理證實(shí)，且所有患者在手術(shù)前均沒(méi)有接受任何治療。??不同組織學(xué)類(lèi)型的卵巢上皮癌組織免疫組化染色的結(jié)果見(jiàn)圖２－５，?ＬＧＲ６蛋??白表達(dá)的部位被染成棕色。如圖所示，正常卵巢組織的上皮和間質(zhì)無(wú)染色，ＬＧＲ６??在卵巢上皮癌組織中有不同程度的表達(dá)。在卵巢上皮癌組織中可以觀(guān)察到，卵??巢癌細(xì)胞染色陽(yáng)性，間質(zhì)沒(méi)有染色，免疫組化染色的定位在細(xì)胞漿、細(xì)胞核和??細(xì)胞膜。??Ｈｉｇｈ?ｇｒａｄｅ?ｓｅｒｏｕｓ?Ｌｏｗ?ｇｒａｄｅ?ｓｅｒｏｕｓ?Ｍｕｃｉｎｏｕｓ?Ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｉｄ?Ｃｌｅａｒ?ｃｅｌｌ??ｎａｎｒｎｍｎｒ

Ｆｉｇ．?２－６?Ｔｈｅ?ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｓｔｒａｔｉｆｉｅｄ?ｂｙ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｉｎｄｅｘ?ｏｆ??ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ａｎａｌｙｓｉｓ??對(duì)各種病理組織類(lèi)型癌組織的評(píng)分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果見(jiàn)圖２－７，可明確??卵巢漿液性腺癌與卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌中ＬＧＲ６表達(dá)最高，兩者之間無(wú)顯著性??差異。卵巢低級(jí)別漿液性腺癌、粘液腺癌和透明細(xì)胞癌表達(dá)量低于高級(jí)別漿液??腺癌，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。??１５－｜?Ｐ＜〇．〇〇１?Ｐ＜〇．〇Ｓ?Ｐ＜０?００１?ｎ．ｓ．?Ｐ＜０．０１??＾?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??０????＿１??〇?１０－??ｘ?－ｒ￣?？??１?白一?？？工＾??＂〇－Ｌ＝Ｐ￣ｉ——ｉ——ｉ——，——??Ｎｏｒ．?ＨＧＳＡ?ＬＧＳＡ?ＭＡ?ＥＡ?ＣＣＡ??（ｎ＝４０）?（ｎ＝１６２）?（ｎ＝２７）?（ｎ＝４２）?（ｎ＝２９）?（ｎ＝１６）??圖２－７不同組織學(xué)類(lèi)型卵巢癌組織的免疫組織化學(xué)評(píng)分情況??Ｆｉｇ．?２－７?Ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｉｎｄｅｘ?ｏｆ?ＬＧＲ６?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?ｏｖａｒｉａｎ?ｃａｎｃｅｒ??以上結(jié)果表明，ＬＧＲ６在卵巢上皮癌中高表達(dá)，ＬＧＲ６的表達(dá)與卵巢上皮癌??的組織類(lèi)型有關(guān)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]卵巢惡性腫瘤的診治進(jìn)展和爭(zhēng)議問(wèn)題[J]. 汪希鵬.  實(shí)用腫瘤雜志. 2016(06)
[2]近十年中國(guó)婦產(chǎn)科病理學(xué)的回顧與進(jìn)展[J]. 沈丹華.  中華病理學(xué)雜志. 2015 (12)
[3]2011年中國(guó)惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬(wàn)青,鄭榮壽,曾紅梅,鄒小農(nóng),張思維,赫捷.  中國(guó)腫瘤. 2015(01)
[4]中國(guó)2010年惡性腫瘤發(fā)病與死亡[J]. 陳萬(wàn)青,張思維,曾紅梅,鄭榮壽,鄒小農(nóng),趙平,吳良有,李光琳,赫捷.  中國(guó)腫瘤. 2014(01)
[5]卵巢癌干細(xì)胞及卵巢癌治療[J]. 于風(fēng)勝,李藝,崔恒.  中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志. 2014(01)
[6]對(duì)卵巢上皮性癌的定義、亞型與病理診斷的新認(rèn)識(shí)[J]. 郭東輝,鄭文新.  中華病理學(xué)雜志. 2013 (09)
[7]化療后殘存乳腺癌組織中乳腺癌耐藥蛋白、P-糖蛋白的表達(dá)及其與癌干細(xì)胞的相關(guān)性[J]. 屈洪波,范原銘,韓明利,羅浩軍,謝佳,劉紅,劉毫,吳誠(chéng)義,湯為學(xué).  中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(02)
[8]卵巢癌初始治療現(xiàn)狀與挑戰(zhàn)[J]. 豐有吉.  中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志. 2012(03)
[9]卵巢漿液性癌的組織學(xué)分級(jí)與發(fā)病機(jī)制研究新進(jìn)展[J]. 申彥,楊帆,劉勁松.  中華病理學(xué)雜志. 2011 (08)
[10]糖蛋白激素LGR6的結(jié)構(gòu)分析及其表達(dá)細(xì)胞株的建立[J]. 徐立,Axel Methner,Rainer Reinscheid.  南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2000(01)



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