目的：檢測正常足月妊娠及子癇前期孕婦胎盤組織C/EBPβ和P-catenin蛋白的定位及表達；采用缺氧/復氧模型體外模擬胎盤氧化應激損傷,研究C/EBPβ和β-catenin在調控人滋養(yǎng)細胞遷移和侵襲中的作用；探討C/EBPβ是否介導β-catenin信號分子在子癇前期氧化應激發(fā)病機制中的作用,為后者的早期診斷和治療提供借鑒。方法：（1）選擇2013年3月至2014年3月在我校附一院產(chǎn)科住院分娩的22例子癇前期孕婦為研究對象,另以20例正常足月妊娠孕婦設對照組,收集兩組孕婦胎盤組織。免疫組化SP法定位各組胎盤組織中C/EBPβ和β-catenin蛋白,蛋白印跡法（Western Blotting, WB）檢測各組胎盤組織中C/EBPp和β-catenin蛋白的表達水平。（2）通過shRNA慢病毒轉染質粒干擾早孕期絨毛外植體和HTR8/SVneo細胞株的C/EBPβ基因表達,通過氯化鋰激活β-catenin信號分子；同時,對早孕期絨毛組織和HTR8/SVneo細胞株進行缺氧/復氧培養(yǎng)。Transwell侵襲實驗檢測阻斷C/EBPβ和激活β-catenin對HTR8/SVneo細胞侵襲能力... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?Ｃ／ＥＢＰｐ的結拘示患困??

化０２）、（０．５５?±?０．０７）。子擱前期中Ｃ化ＢＰｐ蛋白表達水平升高，ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ蛋白則??降低。兩者的表達水平，均分別與各自對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意文（八：〇．〇１）。??見圖１．３。??Ａ?Ｂ?〇＇７?．?ＱＮｏｒｍａｌ??０．６?Ｔ?■巧??１?，?一一??Ｎｏｒｍａｌ?ＰＥ?Ｓ?〇＇５?■??Ｃ做巧禱篇?Ｉ?０．４??Ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ?一?｜?〇，３?Ｔ??Ｐ－ａｃｔｉｎ?？ｉ＿?０．２?ｍ??Ｓ。：；圓圓??Ｃ／Ｅ?目?Ｐｐ?（３－ｃａｔｅｎｉｎ??圖１．３胎盤組巧中Ｃ７ＥＢＰ０、０－ｃａ化ｎｉｎ蛋白的表達水平??Ａ：蛋白印化法Ｂ；蛋白表達灰度值困??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｃ／ＥＢＰ?０?ａｎｄ?目－ｃａ化ｎｉｎ?ｐｒｏ化ｉｎｓ?ｏｂｔａｉｎｅｄ?ｆｒｏｍ?ｐｌａｃｅｎｔａ．??Ａ．Ｗｅｓ化ｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ．?Ｂ．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｐｒｏ化ｉｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ｉｎ?ｐｌａｎｃｅｎｔａｌ?ｔｉｓｓｕｅｓ．??尸＊?＜０．０１?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｎｏｒｍａｌ?化ｒｍ?ｐｒｅｇｎａｎｃｙ．?（ｎ＝３?ｉｎ?ｔｒｉｐｌｉｃａ化）??４討論??ＣＣＡＡＴ／增強結合蛋白?ｐ?（ＣＣＡＡＴＶＥｎｈａｎｃｅｒ?Ｂｉｎｄｌｉｎｇ?Ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｂｅｔｅ，ＣＶＥＢＰＰ）??作為核轉錄因子，在多種細胞中能調節(jié)細胞代謝、周期調控和增殖分化等重要生??命活動。曾有研究指出口?１

ＨＴＲ８／ＳＶｎｅｏ細胞穩(wěn)轉ＣＶＥＢＰｐ?ｓｈＲＮＡ，流式細胞儀檢測轉染效率為９２．４５％。??Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?檢測結果顯示：ｓｈ－ａＥＢＰｐ?組（０．２１＋０．０３）較?ｓｈ－ＮＣ?組（０．５７?＋??０．０１）降低５０％。兩組進行比較，差異顯著，具有統(tǒng)計學意義（尸＜０．０５）。見圖２．３。??Ａ?Ｂ?０７??些０后?３－???＿?＾??＿５?０．Ｓ??ｓｈ－ＮＣ?ｃＥＢｐｐ?§?０，４??Ｇ匯ＢＰ口?？立０?３??ｐ－ａｃｔｉｎ?一—?１０，??０??ｓｈ－ＮＣ?ｓｈ－Ｃ／ＥＢＰｐ??圖２．３?ＨＴＲ８／ＳＶｎｅｏ細胞ＣＹＥＢＰｐ干擾效率的鑒定??Ａ：蛋白印跡法Ｂ：蛋白表達灰度值圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?Ｉｎ化ｒｆｅｒｅｎｃｅ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｉｎ?ＨＴＲ８／ＳＶｎｅｏ?ｃｅ化．??Ａ．Ｗｅｓ化ｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ．?Ｂ．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｐｒｏ化ｉｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ｍ?ＨＴＲ８／ＳＶｎｅｏ?ｃｅｌｌｓ．??戶＜０．０１．?（ｎ＝


本文編號：2963588