目的探討癌/睪丸抗原TSP50在宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)展過(guò)程中可能介導(dǎo)的作用,為完善其病理機(jī)制提供數(shù)據(jù)支撐。方法體外培養(yǎng)End1/E6E7細(xì)胞,設(shè)立對(duì)照組（不接受刺激的End/E6E7）、空質(zhì)粒組（轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒）、TSP50shRNA干擾組（轉(zhuǎn)染包涵TSP50的慢病毒）。脂多糖（LPS）干預(yù)8 h后,使用免疫蛋白印記（WB）實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TSP50的表達(dá)情況以及由其引起的變相關(guān)蛋白IKB-α、TLR4、P65、MMP-2的表達(dá)水平;免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)增殖相關(guān)標(biāo)記物Ki67及上皮細(xì)胞間質(zhì)化標(biāo)記物N-cadherin的變化;使用real-time PCR檢測(cè)雌激素代謝相關(guān)酶COMT、CYP17的表達(dá)變化。連續(xù)培養(yǎng)14 d,采用克隆集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性的變化。結(jié)果 LPS干預(yù)8 h后,相比于對(duì)照組,TSP50shRNA干擾組TSP50、TLR4、P65、MMP-2蛋白表達(dá)降低,IKB-α蛋白表達(dá)升高; COMT、CYP17A的m RNA表達(dá)升高; Ki67表達(dá)降低,N-cadherine表達(dá)升高;各指標(biāo)組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P <0.05）。連續(xù)培養(yǎng)14 d后,TSP50shRNA干擾組集落克... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2020,30(17)

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【部分圖文】：

WB實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證TSP50敲除效果

與對(duì)照組比較，TSP50sh RNA干擾組P65、NF-k B、TLR4、MMP-2蛋白表達(dá)降低，Ik B-α蛋白表達(dá)升高(P<0.05)(圖2)。2.3 各組之間雌激素代謝相關(guān)酶COMT和CYP17A m RNA表達(dá)比較

TSP50敲除對(duì)COMT和CYP17a mR NA水平的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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