為研究亞納秒脈沖聯(lián)合溫度對人宮頸癌（He La）細(xì)胞的殺傷效應(yīng),將脈沖電場參數(shù)組合（電場強(qiáng)度25、50、100 k V/cm,半峰值脈寬1 ns,脈沖個數(shù)分別為4 000、1 000、250,頻率5 Hz）,作用于處于不同溫度（25℃、43℃、48℃）的He La細(xì)胞,利用MTT檢測亞納秒脈沖對細(xì)胞的生長抑制情況,通過AO/EB染色和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,采用免疫細(xì)胞化學(xué)S-P法檢測caspase-3蛋白表達(dá)活性。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):當(dāng)細(xì)胞懸液溫度到達(dá)48℃后,隨著時間推移細(xì)胞死亡率不斷增加;采用亞納秒脈沖電場（電場強(qiáng)度50 k V/cm,半峰值脈寬1 ns,脈沖個數(shù)1 000,頻率5 Hz）處理不同溫度下He La細(xì)胞,細(xì)胞懸液溫度達(dá)到43℃后,細(xì)胞死亡率達(dá)到18. 07%±1. 98%,細(xì)胞懸液溫度達(dá)到48℃,細(xì)胞死亡率增至25. 11%±6. 05%;采用相同能量脈沖電場處理處于相同溫度（48℃）的細(xì)胞懸液時,細(xì)胞死亡率與脈沖場強(qiáng)正相關(guān),100 k V/cm電場作用下得到最高細(xì)胞死亡率為31. 09%±5. 03%,進(jìn)一步的分子生物學(xué)檢測結(jié)果顯示He La細(xì)胞發(fā)生凋亡效應(yīng)。適當(dāng)場強(qiáng)的... 

【文章來源】：中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào). 2020年03期 北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)裝置。(a)實(shí)驗(yàn)場景;(b)電極腔室;(c)電極腔室結(jié)構(gòu)

圖2為不同溫度下細(xì)胞存活率的變化。在43℃溫度下，細(xì)胞存活率沒有隨時間的推移而下降，即在該溫度下細(xì)胞不會發(fā)生死亡;當(dāng)溫度上升為48℃，細(xì)胞存活率在20 min時明顯下降，隨著溫度作用時間的增加，細(xì)胞存活率也呈現(xiàn)下降趨勢，在100 min時細(xì)胞存活率降為30%左右;進(jìn)一步升溫至53℃，細(xì)胞存活率在10 min時開始明顯下降，隨著時間的推移，其下降趨勢更加明顯，100 min時細(xì)胞幾乎全部死亡。2.2 脈沖電場聯(lián)合溫度處理后細(xì)胞死亡率變化

圖4反映了相同能量脈沖電場下細(xì)胞死亡率隨電場的變化。細(xì)胞懸液固定在48℃時，細(xì)胞死亡率與脈沖場強(qiáng)正相關(guān)。25、50、100 k V/cm時的細(xì)胞死亡率，分別是3.02%±1.01%、25.08%±5.99%、31.09%±5.03%，在50和100 k V/cm時均顯著高于對照組。說明脈沖電場并不是和溫度疊加然后以熱效應(yīng)的方式殺死細(xì)胞，而電場本身也起到關(guān)鍵作用。圖4 相同能量脈沖電場下細(xì)胞死亡率隨電場的變化(*代表P<0.05，**代表P<0.01)


本文編號：2945291