RUNX1基因敲除對(duì)卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響
發(fā)布時(shí)間:2020-12-26 00:40
背景卵巢惡性腫瘤死亡率居?jì)D科惡性腫瘤首位,卵巢上皮癌患者5年生存率始終低于30%的一個(gè)重要原因是化療耐藥的產(chǎn)生,即初始有效的化療藥物在復(fù)發(fā)時(shí)所誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡被抑制。RUNX1(Runt-related transcription factor 1),也叫AML1(acute myeloid leukemia 1 protein),是造血功能的主調(diào)控基因,它不僅是控制造血干細(xì)胞產(chǎn)生的基本轉(zhuǎn)錄因子,而且是調(diào)控造血干細(xì)胞分化產(chǎn)生骨髓細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子,RUNX1屬于RUNX轉(zhuǎn)錄調(diào)控家族,該家族包括RUNX1、RUNX2和RUNX3三個(gè)成員,小鼠基因敲除結(jié)果說明,RUNX1與造血功能和神經(jīng)發(fā)育、RUNX2與骨骼形成、RUNX3與腸道上皮細(xì)胞增殖相關(guān)。近年來發(fā)現(xiàn),RUNX1在肺癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸癌等多種實(shí)體瘤中表達(dá)失調(diào),其所起作用隨不同腫瘤而變化。在食道癌、乳腺癌、結(jié)腸癌和小腸癌等腫瘤中,RUNX1低表達(dá),具有抑癌作用;而在多種上皮性腫瘤包括皮膚癌和頭頸部鱗癌中,RUNX1常常高表達(dá),是癌癥起始所必須的,起癌基因作用。在上皮性卵巢癌中,最近報(bào)道RUNX1高表達(dá),并且與卵巢癌細(xì)胞的...
【文章來源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
質(zhì)粒測序圖
29圖 2 細(xì)胞圖,B 是 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系Figure 2 Cell graphe OVCAR3 parental cell line,B represents the OVCAR-R line驗(yàn)證 RUNX1 基因是否敲除成功個(gè)單克隆細(xì)胞的部分做 PCR 測序鑒定(圖 2.1),比與 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 細(xì) 胞 系 的 測 序 峰X1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系中 RUNX1 基因同一位置分失,從而導(dǎo)致 RUNX1 編碼讀框改變,說明該基因已經(jīng) 基因的單克隆細(xì)胞系 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 建立
圖 2.1 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系的 PCR 測序峰圖卵巢癌細(xì)胞 OVCAR3 親本細(xì)胞系,sg2-2 代表 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)序峰圖表示 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系的基因編輯情況。igure 2.1 PCR Sequencing Plot of OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 Monoclonal Cell Linepresents the parental ovarian cancer cell line OVCAR3, sg2-2 represents -RUNX1 KO-sg2-2 monoclonal cell line, and the sequencing peak map representsiting of the OVCAR-RUNX1 KO-sg2-2 monoclonal cell line.T-PCR 驗(yàn)證 RUNX1 基因 mRNA 的表達(dá)水平得 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系后,繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng),取部分的細(xì)胞用 Trizol 法提取細(xì)胞總 RNA,取 1ul RNA 溶液進(jìn)行 1.0%瓊脂糖泳 檢 測 RNA 完 整 性 ( 圖 2.2.1) , OVACAR 親 本 細(xì) 胞 系R-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系的 RNA 瓊脂糖凝膠電泳圖像均見完整個(gè)條帶,表示 RNA 提取完整。接著,我們應(yīng)用 qRT-PCR 方法檢測 RUN mRNA 表達(dá)水平(圖 2.2.2)。結(jié)果顯示,OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 細(xì)胞
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]MDR1基因在卵巢癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 林小萍,王立梅,王慶生. 實(shí)用癌癥雜志. 2001(01)
[2]耐藥相關(guān)基因在卵巢癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 程國鈞,祝華,孫麗亞,李亞里,李春海,楊秀玉. 中華婦產(chǎn)科雜志. 2000(02)
本文編號(hào):2938693
【文章來源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
質(zhì)粒測序圖
29圖 2 細(xì)胞圖,B 是 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系Figure 2 Cell graphe OVCAR3 parental cell line,B represents the OVCAR-R line驗(yàn)證 RUNX1 基因是否敲除成功個(gè)單克隆細(xì)胞的部分做 PCR 測序鑒定(圖 2.1),比與 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 細(xì) 胞 系 的 測 序 峰X1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系中 RUNX1 基因同一位置分失,從而導(dǎo)致 RUNX1 編碼讀框改變,說明該基因已經(jīng) 基因的單克隆細(xì)胞系 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 建立
圖 2.1 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系的 PCR 測序峰圖卵巢癌細(xì)胞 OVCAR3 親本細(xì)胞系,sg2-2 代表 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)序峰圖表示 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系的基因編輯情況。igure 2.1 PCR Sequencing Plot of OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 Monoclonal Cell Linepresents the parental ovarian cancer cell line OVCAR3, sg2-2 represents -RUNX1 KO-sg2-2 monoclonal cell line, and the sequencing peak map representsiting of the OVCAR-RUNX1 KO-sg2-2 monoclonal cell line.T-PCR 驗(yàn)證 RUNX1 基因 mRNA 的表達(dá)水平得 OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系后,繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng),取部分的細(xì)胞用 Trizol 法提取細(xì)胞總 RNA,取 1ul RNA 溶液進(jìn)行 1.0%瓊脂糖泳 檢 測 RNA 完 整 性 ( 圖 2.2.1) , OVACAR 親 本 細(xì) 胞 系R-RUNX1KO-sg2-2 單克隆細(xì)胞系的 RNA 瓊脂糖凝膠電泳圖像均見完整個(gè)條帶,表示 RNA 提取完整。接著,我們應(yīng)用 qRT-PCR 方法檢測 RUN mRNA 表達(dá)水平(圖 2.2.2)。結(jié)果顯示,OVCAR-RUNX1KO-sg2-2 細(xì)胞
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]MDR1基因在卵巢癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 林小萍,王立梅,王慶生. 實(shí)用癌癥雜志. 2001(01)
[2]耐藥相關(guān)基因在卵巢癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 程國鈞,祝華,孫麗亞,李亞里,李春海,楊秀玉. 中華婦產(chǎn)科雜志. 2000(02)
本文編號(hào):2938693
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