發(fā)布時(shí)間：2020-12-25 02:09

　　目的:通過(guò)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn),研究不同濃度的雙硫侖（Disulfiram,DSF）及雙硫侖聯(lián)合銅離子（DSF/Cu）對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞增殖的影響,并探討其與NF-κB及PI3K/Akt/mTOR蛋白通路的關(guān)系。方法:1、以人宮頸癌Hela細(xì)胞株為研究對(duì)象,將Cu（1μmol/L）、不同濃度的DSF（0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L）以及DSF/Cu（濃度為0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L的DSF聯(lián)合1μmol/L的Cu）分別作用于人宮頸癌Hela細(xì)胞24h,每個(gè)濃度梯度均設(shè)5個(gè)復(fù)孔,通過(guò)噻唑藍(lán)比色法（MTT法）檢測(cè)各組對(duì)Hela細(xì)胞的增殖抑制作用,并用graph prims5軟件計(jì)算相應(yīng)的IC₅₀值;2、蛋白質(zhì)印跡法（Western blot,WB）檢測(cè)Cu、DSF、DSF/Cu分別處理細(xì)胞后各組細(xì)胞內(nèi)p65、PI3K、Akt、p-Akt及mTOR蛋白表達(dá)的... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

DSF單藥和DSF/Cu作用24h對(duì)體外培養(yǎng)的Hela增殖抑制率的影響

圖 4.1 DSF 單藥和 DSF / Cu 作用 24 h 對(duì)體外培養(yǎng)的 Hela 增殖抑4.2 DSF/Cu 對(duì) Hela 細(xì)胞核中 p65 蛋白的影利用 western blot 檢測(cè) p65 蛋白表達(dá)的變化：將空白對(duì)2.64μmol/L (24hIC50濃度) DSF、0.053μmol/L(24hIC50頸癌 Hela 細(xì)胞，24 h 后提取核蛋白，利用蛋白質(zhì)印跡法內(nèi) p65 蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果顯示，Cu 單藥對(duì)各蛋白的表P＞0.05)。藥物處理組 DSF 單藥可明顯下調(diào) p65 蛋白表達(dá)DSF/Cu 對(duì) p65 蛋白表達(dá)的下調(diào)比單獨(dú) DS 下調(diào)更明顯(P＜4.2、圖 4.3。

表 4.2 不同處理組對(duì) Hela 細(xì)胞中 p65 蛋白的注：****：與陰性對(duì)照組比較 P＜0.0001；#：與 DSF 組比較 P=0.0038,P＜0.0組別 β-actin P65/β-actin對(duì)照組 18240±44.92 0.087±0.005Cu 18264±33.02 0.789±0.005DSF 18265±13.62 0.608±0.017*DSF/Cu 18235±47.89 0.496±0.023*


本文編號(hào)：2936749