目的:通過體外細(xì)胞實驗,研究不同濃度的雙硫侖（Disulfiram,DSF）及雙硫侖聯(lián)合銅離子（DSF/Cu）對人宮頸癌Hela細(xì)胞增殖的影響,并探討其與NF-κB及PI3K/Akt/mTOR蛋白通路的關(guān)系。方法:1、以人宮頸癌Hela細(xì)胞株為研究對象,將Cu（1μmol/L）、不同濃度的DSF（0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L）以及DSF/Cu（濃度為0.1μmol/L、0.2μmol/L、0.4μmol/L、0.8μmol/L、1.6μmol/L、3.2μmol/L、6.4μmol/L的DSF聯(lián)合1μmol/L的Cu）分別作用于人宮頸癌Hela細(xì)胞24h,每個濃度梯度均設(shè)5個復(fù)孔,通過噻唑藍(lán)比色法（MTT法）檢測各組對Hela細(xì)胞的增殖抑制作用,并用graph prims5軟件計算相應(yīng)的IC₅₀值;2、蛋白質(zhì)印跡法（Western blot,WB）檢測Cu、DSF、DSF/Cu分別處理細(xì)胞后各組細(xì)胞內(nèi)p65、PI3K、Akt、p-Akt及mTOR蛋白表達(dá)的... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

DSF單藥和DSF/Cu作用24h對體外培養(yǎng)的Hela增殖抑制率的影響

圖 4.1 DSF 單藥和 DSF / Cu 作用 24 h 對體外培養(yǎng)的 Hela 增殖抑4.2 DSF/Cu 對 Hela 細(xì)胞核中 p65 蛋白的影利用 western blot 檢測 p65 蛋白表達(dá)的變化：將空白對2.64μmol/L (24hIC50濃度) DSF、0.053μmol/L(24hIC50頸癌 Hela 細(xì)胞，24 h 后提取核蛋白，利用蛋白質(zhì)印跡法內(nèi) p65 蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果顯示，Cu 單藥對各蛋白的表P＞0.05)。藥物處理組 DSF 單藥可明顯下調(diào) p65 蛋白表達(dá)DSF/Cu 對 p65 蛋白表達(dá)的下調(diào)比單獨 DS 下調(diào)更明顯(P＜4.2、圖 4.3。

表 4.2 不同處理組對 Hela 細(xì)胞中 p65 蛋白的注：****：與陰性對照組比較 P＜0.0001；#：與 DSF 組比較 P=0.0038,P＜0.0組別 β-actin P65/β-actin對照組 18240±44.92 0.087±0.005Cu 18264±33.02 0.789±0.005DSF 18265±13.62 0.608±0.017*DSF/Cu 18235±47.89 0.496±0.023*


本文編號：2936749