本文關(guān)鍵詞：XAV939對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的生長抑制及順鉑增敏作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景與目的卵巢癌,以卵巢上皮性癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)為主,是女性婦科腫瘤相關(guān)死亡的主要原因,也是婦科最致命的惡性腫瘤。據(jù)統(tǒng)計(jì),1999-2010年間我國卵巢癌的總體粗死亡率為7.91/10萬,年齡校正總死亡率為5.35/10萬[1]。由于缺乏用于早期診斷的特異性指標(biāo)及該病發(fā)病的隱匿性,大部分卵巢上皮性癌患者因癥狀出現(xiàn)而就診時(shí)已處于臨床晚期,而傳統(tǒng)的化療方案則因癌細(xì)胞化療藥物抗性的產(chǎn)生難以達(dá)到治療效果,使得該病的治療遇到了前所未有的挑戰(zhàn)[2]。因此,更好地研究與卵巢癌發(fā)生發(fā)展及耐藥性獲得相關(guān)的分子機(jī)制,從而找到早期診斷靈敏度高的特異性指標(biāo)和針對性強(qiáng)且副作用小的分子靶向治療藥物已迫在眉睫。最近一些國內(nèi)外學(xué)者均發(fā)現(xiàn),目前在腫瘤治療方面研究相當(dāng)火熱的Wnt/β-catenin通路的活化可能參與了卵巢癌的發(fā)生發(fā)展及其化療藥物的耐受[3;4]。研究證明在卵巢上皮性癌中存在一些表達(dá)上調(diào)的Wnt/β-catenin通路成員蛋白,例如細(xì)胞外信號蛋白Wnt-1、通路核心蛋白β-catenin及下游靶基因轉(zhuǎn)錄蛋白c-myc、cyclinD1,其中β-catenin參與了卵巢癌細(xì)胞的異常增殖和轉(zhuǎn)移。因此,如果找到可以抑制該通路中任意環(huán)節(jié)的靶向性藥物,我們便有望解決化療藥物毒副作用大和腫瘤耐藥這兩大世界性難題,為每一位腫瘤患者帶來希望。端粒酶作為端粒長度的“守衛(wèi)員”,早在上世紀(jì)末就被證明在許多惡性腫瘤中表達(dá)上調(diào),其中也包括婦科死亡率最高的卵巢癌,murakami等[5]通過對卵巢良性、交界性及惡性腫瘤組織的分析發(fā)現(xiàn),92%的組織中端粒酶呈現(xiàn)高表達(dá),且腫瘤分化程度與酶的活性呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。目前,有不少學(xué)者正在嘗試將端粒酶的特異性抑制劑應(yīng)用于腫瘤的治療中,主要集中于肝癌、鼻咽癌、胃癌及卵巢癌等方面,也取得了一定的成效,但并沒有為腫瘤的獲得性藥物耐受問題帶來幫助。端錨聚合酶(tankyrase)是一種多功能蛋白酶,其一方面利用糖基化功能抑制tankyrase1/2的活性,為端粒酶提供作用位點(diǎn)并維持染色體末端穩(wěn)定性;另一方面則可增加錨蛋白的穩(wěn)定性,進(jìn)而加速β-catenin降解,介導(dǎo)wnt/β-catenin通路的正向運(yùn)行。xav939是huang,s.m等[6]學(xué)者于2009年基于抑制β-catenin轉(zhuǎn)錄而篩選出的wnt/β-catenin通路特異性小分子抑制劑,他們利用定量化學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)方法發(fā)現(xiàn),其發(fā)揮作用主要依賴于介導(dǎo)錨蛋白穩(wěn)定性的增加,促進(jìn)該通路的“開關(guān)蛋白”β-catenin的降解,進(jìn)而對腫瘤達(dá)到治療效果。本次研究將端錨聚合酶抑制劑xav939作用于人卵巢腺癌順鉑原發(fā)耐藥細(xì)胞株(skov3細(xì)胞株),并檢測細(xì)胞用藥后的增殖、凋亡情況及細(xì)胞核質(zhì)內(nèi)tankyrase、cyclind1和β-catenin的表達(dá)情況,以期為卵巢癌小分子靶向治療藥物的研發(fā)和耐藥的逆轉(zhuǎn)提供新的方向。材料與方法人卵巢癌skov3細(xì)胞體外復(fù)蘇并培養(yǎng)至對數(shù)期,將這些細(xì)胞分為端錨聚合酶抑制劑(xav939)組、順鉑組、兩者聯(lián)合組及對照組,以mtt法分別檢測不同藥物濃度作用下各組細(xì)胞的增殖及抑制情況;再以流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同濃度的xav939對skov3細(xì)胞的凋亡及細(xì)胞周期的影響;然后以westernblot法檢測skov3細(xì)胞中tankyrase、cyclind1及β-catenin的表達(dá)情況,并以不同濃度的xav939作用于skov3細(xì)胞48小時(shí)后再次檢測三種蛋白表達(dá)量的變化。實(shí)驗(yàn)所得計(jì)量數(shù)據(jù)以spss20.0軟件進(jìn)行分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)定為α=0.05。結(jié)果1、XAV939及DDP對SKOV3細(xì)胞的生長抑制作用:XAV939與DDP在體外對卵巢癌SKOV3細(xì)胞均有一定的抑制作用,且抑制作用的強(qiáng)弱與藥物作用濃度及作用時(shí)間呈現(xiàn)正相關(guān),即存在濃度和時(shí)間的依賴現(xiàn)象(P0.05)。2、XAV939對SKOV3細(xì)胞的順鉑增敏作用:以0.8μM的XAV939分別聯(lián)合DDP各濃度作用于SKOV3細(xì)胞48小時(shí)后,小濃度時(shí)細(xì)胞抑制率高于DDP單藥組,SKOV3細(xì)胞對順鉑的敏感性增加(IC50(DDP)=69.059μg/ml IC50(XAV939+DDP)=52.254μg/ml)。3、XAV939對SKOV3細(xì)胞細(xì)胞周期及凋亡的影響:細(xì)胞周期及凋亡檢測顯示,與對照組相比XAV939作用后細(xì)胞的凋亡率隨著藥物濃度的增加呈增高趨勢,差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著(F=512.78,P0.05)。增加XA939作用濃度后,細(xì)胞呈現(xiàn)G0/G1期阻滯(P0.05),S期細(xì)胞所占百分比下降,且呈現(xiàn)明顯的濃度依賴(P0.05)。4、XAV939對SKOV3細(xì)胞中Tankyrase、CyclinD1、β-catenin蛋白表達(dá)量的影響:蛋白免疫印跡結(jié)果顯示,Tankyrase、cyclinD1、β-catenin在卵巢癌SKOV3細(xì)胞中均呈現(xiàn)高表達(dá);當(dāng)XAV939作用后三者的表達(dá)量均明顯下降。結(jié)論1.XAV939及DDP單藥于體外對人卵巢癌SKOV3細(xì)胞株具有一定細(xì)胞毒作用,且具有時(shí)間及劑量依賴的特點(diǎn)。2.XAV939與DDP合用時(shí)可增加SKOV3細(xì)胞對DDP的敏感性,加速細(xì)胞的凋亡。3.XAV939可能通過降低Tankyrase和β-catenin蛋白的表達(dá),從而抑制卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖。
【關(guān)鍵詞】：卵巢上皮性癌 Tankyrase 化療耐藥 XAV939
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 中英縮略詞對照表12-14
• 前言14-17
• 1 材料與方法17-24
• 2 結(jié)果24-29
• 3 討論29-34
• 4 結(jié)論34-35
• 5 附圖35-36
• 6 參考文獻(xiàn)36-39
• 綜述 端錨聚合酶及Wnt/β-catenin通路與卵巢上皮性癌發(fā)生及化療耐藥的關(guān)系39-60
• 參考文獻(xiàn)54-60
• 個(gè)人簡歷60-61
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文61-62
• 致謝62

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1 金曉琴;形態(tài)罕見的卵巢腫瘤1例[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2000年07期

2 覃英姿;卵巢腫瘤并發(fā)闌尾炎1例報(bào)告[J];中國校醫(yī);2000年02期

3 韓衛(wèi)紅,李青,李霞;經(jīng)陰道超聲在卵巢腫瘤診斷中的應(yīng)用[J];青島醫(yī)藥衛(wèi)生;2000年03期

4 ;卵巢腫瘤[J];國外科技資料目錄.醫(yī)藥衛(wèi)生;2000年10期

5 秦平,陳焰;二維超聲及彩色多普勒聯(lián)合應(yīng)用對卵巢腫瘤的診斷[J];中國超聲醫(yī)學(xué)雜志;2001年07期

6 王月香;超聲多普勒技術(shù)在卵巢腫瘤診斷上的新進(jìn)展[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年06期

7 崔淑莉,徐愛哲,趙世強(qiáng);經(jīng)陰式彩色多普勒對卵巢腫瘤性質(zhì)判定的臨床意義[J];哈爾濱醫(yī)藥;2001年01期

8 史海英,姜?jiǎng)俳?卵巢腫瘤誤診13例分析[J];腫瘤防治雜志;2001年03期

9 趙信喜;微波快速石蠟切片診斷卵巢腫瘤206例分析[J];中國誤診學(xué)雜志;2001年05期

10 ;卵巢腫瘤[J];國外科技資料目錄.醫(yī)藥衛(wèi)生;2001年03期

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1 李利;王超英;林忠乙;;老年卵巢腫瘤82例分析[A];中國抗癌協(xié)會婦科腫瘤專業(yè)委員會第六次全國學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

2 楊幼易;;老年婦女卵巢腫瘤手術(shù)治療140例臨床分析[A];中國抗癌協(xié)會婦科腫瘤專業(yè)委員會第六次全國學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

3 楊帆;楊太珠;羅紅;朱琦;郭文琪;田雨;陳嬌;;生育前期女性卵巢腫瘤39例超聲診斷[A];2005年全國醫(yī)學(xué)影像技術(shù)學(xué)術(shù)會議西部論壇論文匯編[C];2005年

4 張海;李光展;吳瑛;盧俊;王慧芳;鄧偉蓮;;經(jīng)陰道彩色多普勒血流圖檢測卵巢腫瘤血管的臨床價(jià)值[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2001年

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7 劉力;李冰琳;張啟培;;836例卵巢腫瘤臨床病理分析[A];第八次全國婦產(chǎn)科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

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9 許幼峰;郭e，

本文編號：292360