本文關(guān)鍵詞：Nanog介導(dǎo)FSH誘導(dǎo)卵巢癌的轉(zhuǎn)移和侵襲，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討Nanog在卵巢癌組織中的表達,以及FSH誘導(dǎo)的卵巢癌轉(zhuǎn)移和侵襲中的作用。方法:使用western blot檢測永生化卵巢上皮細胞Moody,良性卵巢腫瘤細胞Mcv152和卵巢癌細胞Hey,Ho8910,SKOV3中Nanog的表達。使用FSH以濃度梯度和時間梯度的方式處理SKOV3細胞,western blot檢測Nanog蛋白表達。使用FSH處理si-Con或si-Nanog轉(zhuǎn)染卵巢癌SKOV3細胞,實驗設(shè)4組:對照組(Con+si-Con,Con+si-Nanog),實驗組(FSH+si-Con,FSH+si-Nanog)。使用劃痕實驗和Transwell侵襲實驗檢測四組細胞轉(zhuǎn)移和侵襲的能力,western blot分析四組細胞中Nanog的蛋白表達。應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測Nanog在卵巢癌組織中的蛋白表達情況。結(jié)果:卵巢癌細胞系Hey,Ho8910,SKOV3中Nanog的表達明顯高于永生化和良性卵巢上皮細胞系(P0.05)。FSH上調(diào)Nanog的表達以濃度和時間依賴的方式。對于遷移和侵襲能力,對照組(Con+si-Con,Con+si-Nanog)明顯低于實驗組(FSH+si-Con,FSH+si-Nanog)(P0.05)。卵巢癌組織中的Nanog表達水平明顯高于正常卵巢組織(P0.05),Nanog蛋白表達與卵巢癌轉(zhuǎn)移相關(guān)。結(jié)論:Nanog是FSH重要的下游靶基因,介導(dǎo)FSH誘導(dǎo)的卵巢癌轉(zhuǎn)移作用。第一部分Nanog在不同類型卵巢細胞株中的表達及調(diào)控目的:選取合適的卵巢癌細胞株作為實驗細胞株,檢測Nanog在不同類型卵巢癌細胞中的表達情況;研究卵泡刺激素(FSH)對Nanog表達的調(diào)控作用。方法:(1)通過Western blotting技術(shù)檢測永生化上皮性卵巢細胞株Moody,良性卵巢腫瘤細胞株Mcv-152及上皮性卵巢癌細胞株Hey、Ho8910和SKOV3中Nanog的蛋白表達的情況。(2)使用不同濃度(Con,5m IU/ml,25m IU/ml,50m IU/ml,100m IU/ml)的卵泡刺激素(FSH)刺激上皮性卵巢癌細胞株SKOV3,使用Western blotting檢測Nanog蛋白的表達情況;使用50m IU/ml的FSH于不同時間(Con,3h,6h,12h,24h)刺激卵巢癌細胞株SKOV3,Western blotting檢測Nanog的蛋白的表達情況。結(jié)果:(1)Nanog在上皮性卵巢癌細胞株Hey(1.659±0.09),Ho8910(1.659±0.075)和SKOV3(2.130±0.129)中的表達明顯高于永生化的正常卵巢上皮細胞株Moody(0.678±0.06)和良性卵巢腫瘤細胞株Mcv-152(1.371±0.073)。Hey、Ho8910和SKOV3細胞株的Nanog表達相對于Moody的Nanog表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.006,P=0.004,P=0.004)。SKOV3的Nanog表達相對于Mcv-152的Nanog表達差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。(2)在一定濃度范圍內(nèi),FSH能顯著上調(diào)上皮性卵巢癌細胞SKOV3中Nanog的蛋白表達,而且以劑量依賴的方式,在FSH濃度為50m IU/ml上調(diào)作用最明顯。(3)在一定時間范圍內(nèi)(24h),FSH能顯著上調(diào)上皮性卵巢癌細胞SKOV3中Nanog的蛋白表達,作用方式呈時間依賴的方式。結(jié)論:(1)相對正常卵巢或者卵巢良性腫瘤細胞,Nanog在卵巢癌細胞中表達明顯上調(diào)。(2)在一定濃度和時間范圍內(nèi),FSH能夠顯著上調(diào)卵巢癌細胞SKOV3中Nanog的蛋白表達水平。第二部分Nanog介導(dǎo)FSH誘導(dǎo)卵巢癌細胞的遷移和侵襲目的:探索Nanog在FSH誘導(dǎo)的卵巢癌細胞遷移和侵襲中的作用。方法:以上皮性卵巢癌細胞SKOV3為研究對象,用RNA干擾技術(shù)敲除Nanog在SKOV3細胞中的表達,處理分為四組:Con+si-Con,FSH+si-Con,Con+si-Nanog和FSH+si-Nanog,同時使用FSH刺激并設(shè)立對照。使用劃痕實驗(wound healing assay)檢測干擾Nanog后,檢測FSH對卵巢癌細胞SKOV3遷移能力的影響。使用Transwell侵襲實驗(Transwell invasion assay)檢測干擾Nanog后,檢測FSH對卵巢癌細胞SKOV3侵襲能力的影響。結(jié)果:(1)FSH刺激明顯增加SKOV3細胞遷移能力(P0.05),使用si-Nanog干擾Nanog表達,明顯減弱了FSH誘導(dǎo)的細胞遷移(P0.05)。Con+si-Nanog(0.815±0.028)組細胞遷移距離相對于Con+si-Con(0.670±0.021)組細胞遷移距離具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.02)。FSH+si-Nanog(0.710±0.020)組細胞遷移距離相對于FSH+si-Con(0.355±0.025)組細胞遷移距離具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004)。(2)FSH處理顯著增加卵巢癌SKOV3細胞的侵襲能力(P0.05),干擾Nanog表達,明顯阻斷了FSH誘導(dǎo)的卵巢癌增加的侵襲能力(P0.05)。Con+si-Nanog(2.5±0.7)組細胞侵襲能力相對于Con+si-Con(9±1.5)組細胞侵襲能力具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.028)。FSH+si-Nanog(10±1.6)組細胞侵襲能力相對于FSH+si-Con(25±1.3)組細胞侵襲能力具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.008)。結(jié)論:在上皮性卵巢癌細胞SKOV3中,Nanog介導(dǎo)FSH誘導(dǎo)的上皮性卵巢癌細胞的遷移和侵襲。第三部分Nanog在卵巢組織中表達與卵巢癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系目的:檢測Nanog在正常卵巢組織和卵巢癌組織中的表達,并分析其在卵巢癌組織中的表達與相關(guān)臨床病理資料的關(guān)系。方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法檢測5例正常卵巢組織和60例卵巢癌組織中Nanog的表達情況,比較兩種組織中Nanog表達的差異,并通過統(tǒng)計學(xué)方法分析其在卵巢癌組織中的表達與相關(guān)臨床病理資料的關(guān)系。結(jié)果:免疫組化結(jié)果表明:Nanog在正常卵巢組織不表達或低表達,在卵巢癌組織中高表達,其表達具有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.008)。而且,在卵巢癌組織中,Nanog表達與卵巢癌轉(zhuǎn)移相關(guān)(P=0.001)。結(jié)論:在上皮性卵巢癌組織中,Nanog表達明顯上調(diào),且其表達與腫瘤的轉(zhuǎn)移正相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：卵巢癌 FSH Nanog 遷移 侵襲
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 摘要7-11
• ABSTRACT11-15
• 中英文名詞對照15-16
• 前言16-22
• 第一部分 Nanog在不同類型卵巢細胞株中的表達及調(diào)控22-37
• 1.1 實驗材料和方法22-32
• 1.2 結(jié)果32-35
• 1.3 討論35-37
• 第二部分 Nanog介導(dǎo)FSH誘導(dǎo)卵巢癌細胞的遷移和侵襲37-45
• 2.1 實驗材料和方法37-40
• 2.2 結(jié)果40-43
• 2.3 討論43-45
• 第三部分 Nanog在卵巢組織中的表達與卵巢癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系45-54
• 3.1 實驗材料和方法45-51
• 3.2 結(jié)果51-53
• 3.3 討論53-54
• 結(jié)論54-55
• 參考文獻55-59
• 綜述59-65
• 參考文獻62-65
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文65-66
• 致謝66

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