目的探討一氧化氮合酶1（NOS1）在宮頸癌干細(xì)胞（CCSCs）中的表達(dá)水平,并分析NOS1對(duì)CCSCs順鉑（Cisplatin, DDP）化療敏感性的影響及作用機(jī)制。方法 qRT-PCR檢測(cè)NOS1在宮頸癌細(xì)胞系HeLa、Siha、Caski及人正常宮頸上皮細(xì)胞系Hucec中的表達(dá)水平。選擇高表達(dá)NOS1的宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)CCSCs。Western blot檢測(cè)腫瘤干細(xì)胞（CSCs）中Nanog、SOX2、OCT4干性標(biāo)志蛋白及NOS1的表達(dá)。MTS檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞和CCSCs對(duì)DDP的IC50值。對(duì)照siRNA和NOS1 siRNA（si-NOS1）轉(zhuǎn)染CCSCs分為NC組和si-NOS1組,MTS檢測(cè)兩組CCSCs對(duì)DDP的IC50值。DDP處理NC組和si-NOS1組CCSCs后流式細(xì)胞儀實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,Western blot檢測(cè)細(xì)胞中ABCG蛋白和凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果 qRT-PCR結(jié)果顯示NOS1在宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá)高于在人正常宮頸上皮細(xì)胞系Hucec中的表達(dá)水平,在HeLa細(xì)胞中表達(dá)最高（P<0.05）。OCT4、Nanog、SOX2干細(xì)胞標(biāo)志物NOS1在CSC... 

【文章來(lái)源】：西部醫(yī)學(xué). 2020年09期

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【部分圖文】：

NOS1在CCRCs細(xì)胞中的表達(dá)水平

選擇表達(dá)NOS1最高的宮頸癌細(xì)胞系HeLa培養(yǎng)CCSCs,在顯微鏡下可觀察到腫瘤球形成,且透光性較強(qiáng)(見(jiàn)圖2A)。腫瘤球制成單個(gè)細(xì)胞后,與抗體包被的磁珠孵育篩選出CD133/CD44雙陽(yáng)性的細(xì)胞。擴(kuò)大培養(yǎng)后可觀察到其形成的腫瘤球體積更大(見(jiàn)圖2B)。Western blot檢測(cè)CD133/CD44雙陽(yáng)性中干性標(biāo)志蛋白的表達(dá),結(jié)果顯示Nanog、OCT4和SOX2在CD133/CD44雙陽(yáng)性細(xì)胞(CCSCs)中的表達(dá)高于在CD133/CD44非雙陽(yáng)性細(xì)胞(HeLa)中的表達(dá),NOS1在CCSCs中的表達(dá)高于在HeLa細(xì)胞中的表達(dá)(P<0.05),見(jiàn)圖2C。2.3 CCSCs對(duì)DDP的敏感性

用不同濃度的DDP處理CCSCs和HeLa細(xì)胞,MTS結(jié)果顯示DDP對(duì)HeLa細(xì)胞作用48h的IC50值為(8.21±0.14)μg/mL,對(duì)CCSCs為(17.46±0.75)μg/mL(t=8.39, P=0.026),與Hela細(xì)胞相比,CCSCs對(duì)DDP敏感性降低(P<0.05)。見(jiàn)圖3。2.4 NOS1siRNA轉(zhuǎn)染效率的檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
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