發(fā)布時間：2020-11-16 10:52

　　 目的研究子癇前期患者胎盤組織中miRNA-1290與ARL4C的表達及其相關性。方法1.收集2017年11月至2018年7月于唐山市工人醫(yī)院剖宮產(chǎn)分娩患者胎盤組織63例(正常組29例,子癇前期組14例,子癇前期重度組20例),應用實時定量聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測三組胎盤組織中miR-1290的表達,免疫印跡實驗(Western blot)方法檢測ARL4C蛋白的表達差異。2.培養(yǎng)JEG-3細胞,通過細胞轉(zhuǎn)染技術將JEG-3細胞轉(zhuǎn)染為空白組、轉(zhuǎn)染試劑組、miR-NC組及miR-1290mimics實驗組,RT-PCR技術檢測各組ARL4CmRNA表達水平,Western blot方法檢測各組ARL4C蛋白的表達,CCK-8技術檢測細胞的增殖能力,劃痕實驗檢測細胞的侵襲遷移能力。3.采用SPSS 17.0軟件,計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,兩樣本比較采用t檢驗,多個樣本比較采用單因素方差分析或秩和檢驗。P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。結果1正常組、子癇前期組、子癇前期重度組胎盤組織中miR-1290的相對表達量分別為1.015±0.030、1.256±0.425、1.797±0.049,呈上升趨勢,差異有統(tǒng)計學意義(F=2307.861,P0.05);三組胎盤組織中ARL4C蛋白相對表達量分別為0.769±0.375、0.528±0.462、0.290±0.312,呈降低趨勢,差異有統(tǒng)計學意義(F=959.758,P0.05)。2 JEG-3細胞轉(zhuǎn)染成功后,miR-1290mimicis轉(zhuǎn)染組ARL4CmRNA表達水平均低于空白組、轉(zhuǎn)染試劑組和miR-NC組(F=123.008,P0.05),ARL4C蛋白表達水平也低于其他三組(F=37.303,P0.05),而此三組間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)3 CCK-8實驗結果顯示空白組、轉(zhuǎn)染試劑組、miR-NC組及miR-1290mimics組48小時OD值分別為0.51±0.02、0.53±0.00、0.53±0.00及0.41±0.01,miR-1290mimics組與其他三組相比差異有統(tǒng)計學意義(F=94.743,P0.05),劃痕實驗四組劃痕面積改變率(48h)相對值分別為61.03±1.53、57.13±5.12、54.10±4.31及31.00±6.63,實驗組與其他三組對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(F=24.041,P0.05)。結論1 ARL4C是miR-1290的靶基因。2在子癇前期發(fā)生發(fā)展中,高表達的miR-1290通過負性調(diào)控ARL4C的表達,來參與疾病的進程,二者均起著重要的作用。3 miR-1290通過影響滋養(yǎng)細胞的增殖及侵襲能力,從而導致子癇前期的發(fā)生。4 miR-1290可能成為預防或治療子癇前期疾病的一個靶點。圖12幅;表16個;參159篇.
【學位單位】：華北理工大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R714.244
【部分圖文】：

注 A 為 miR-1290 擴增曲線圖，B 為 miR-1290 溶解曲線圖，C 為 U6 擴增曲線圖，D 為 U6 溶解曲線圖圖 1 miR-1290 及 U6 擴增及溶解曲線圖Fig. 1 miR-1290 and U6 amplification and dissolution curves表 9 三組實驗患者胎盤組織中 miR-1290mRNA 的表達情況（ x ±s）Table 9.Expression of miR-1290 mRNA in placental tissues of the three groups（ x ±s）組別 例數(shù) miR-1290mRNA 相對表達量A 組 29 1.015±0.030B 組 14 1.256±0.425*C 組 20 1.797±0.049#F 2307.861P 0.000注：P：One-way ANOVA test；*與 A 組、C 組相比，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；#與 A 組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

Table 10 Comparison of the detection results of ARL4C proten in the three groups（ x ±s）組別 例數(shù)（n） ARL4C 蛋白相對表達量A 組 29 0.769±0.375B 組 14 0.528±0.462*C 組 20 0.290±0.312#F 959.758P 0.000注： P：One-way ANOVA test 檢驗，*與 A 組、C 組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；#與 A 組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。1.4.4 ARL4C 是 miR-1290 靶基因的預測在妊娠期高血壓患者胎盤組織中，miR-1290 隨著疾病的加重，表達量升高，而 ARL4C 隨之降低，猜測 ARL4C 與 miR-1290 之間有一定關聯(lián)。通過 Target scan軟件發(fā)現(xiàn) miR-1290 與 ARL4C mRNA 3’UTR 存在結合位點（圖 4），從而推斷miR-1290 可能通過調(diào)控 ARL4C 的表達影響子癇前期疾病的發(fā)生發(fā)展。

第 1 章 實驗研究.610±0.004、0.064±0.004 及 1.063±0.063，與其他三組相比，mics 組 miR-1290mRNA 表達量明顯升高，差異有統(tǒng)計學意（F=74，而其他三組比較，差異無統(tǒng)計學意義（F=1.533，P＞0.05）（明 miR-1290mimics 已轉(zhuǎn)入 JEG-3 細胞內(nèi)，提示實驗的可行性，可。
【參考文獻】

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1 湯麗莎;高超;高莉;崔毓桂;沙家豪;劉嘉茵;;miRNA-4497在復發(fā)性流產(chǎn)絨毛組織中的表達及其對滋養(yǎng)細胞凋亡的影響[J];中華醫(yī)學雜志;2015年46期

2 李敏;張向?qū)?魏媛;楊春;董濤濤;李軍;;microRNA-106a促進上皮性卵巢癌細胞系遷移和侵襲的研究[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展;2015年11期

本文編號：2886087