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不同因素對(duì)早期胚胎線粒體DNA拷貝數(shù)影響的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-05 09:00

  本文關(guān)鍵詞:不同因素對(duì)早期胚胎線粒體DNA拷貝數(shù)影響的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景:線粒體是哺乳動(dòng)物中非常重要的細(xì)胞器,可產(chǎn)生ATP,在卵母細(xì)胞成熟及早期胚胎發(fā)育中供應(yīng)能量,線粒體的數(shù)目和功能對(duì)于早期胚胎的發(fā)育至關(guān)重要。線粒體DNA拷貝數(shù)變化可反映線粒體的功能狀態(tài)。目前,關(guān)于線粒體DNA拷貝數(shù)在不同動(dòng)物的卵母細(xì)胞成熟、精子質(zhì)量等相關(guān)研究已見(jiàn)報(bào)道,但有關(guān)線粒體DNA拷貝數(shù)在人胚胎發(fā)育中的研究較少,這可能與人胚胎樣本珍貴等原因有關(guān)。高通量測(cè)序作為新型基因測(cè)序技術(shù),已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基因檢測(cè)和遺傳物質(zhì)相關(guān)性疾病等領(lǐng)域的研究。隨著生殖技術(shù)的發(fā)展,第三代試管技術(shù)在植入前遺傳學(xué)檢查方面發(fā)揮了巨大的作用,其中包括PGD和PGS,PGD可檢測(cè)配子、胚胎的遺傳物質(zhì),PGS主要篩查胚胎染色體的非整倍性異常。高通量測(cè)序技術(shù)聯(lián)合第三代試管技術(shù),使得研究者在不損害胚胎資源的前提下,對(duì)胚胎進(jìn)行活檢基因檢測(cè)成為可能。目的:通過(guò)研究不同胚胎形態(tài)學(xué)參數(shù)與臨床因素下早期胚胎線粒體DNA拷貝數(shù)的變化,分析其相關(guān)關(guān)系,以期通過(guò)形態(tài)學(xué)參數(shù)、臨床因素預(yù)估胚胎線粒體DNA拷貝數(shù),綜合評(píng)估早期胚胎的發(fā)育潛能,更多的了解胚胎發(fā)育過(guò)程。方法:選取2014年3月-2015年9月在我院生殖中心進(jìn)行第三代試管技術(shù)(PGD/PDS)的39對(duì)夫婦的早期胚胎279例,根據(jù)臨床需要,選擇受精后D3、D5、D6、D7時(shí)胚胎進(jìn)行卵裂球、囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞活檢,活檢后胚胎進(jìn)行玻璃化冷凍,活檢細(xì)胞則使用高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行基因檢測(cè),分析各因素對(duì)早期胚胎線粒體DNA拷貝數(shù)的影響關(guān)系。結(jié)果:1.D2時(shí)Ⅰ級(jí)胚胎與Ⅰ級(jí)以上胚胎的囊胚期線粒體DNA拷貝數(shù)分別是504.69±85.222、34335.25±16042.469(P0.05):2.D2胚胎碎片≤5%組與胎碎片5%組囊胚期線粒體DNA拷貝數(shù)分別是平均為519.94±77.708、43204.84±20135.024(P0.05):D3胚胎碎片≤5%組與5%組的囊胚期線粒體DNA拷貝數(shù)分別平均為2975.88±2347.526、35730.41±16724.325(P0.05),D2、D3胚胎碎片率與囊胚期mtDNA拷貝數(shù)分別有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;3.D2胚胎卵裂球數(shù)目≤3細(xì)胞、4細(xì)胞、≥5細(xì)胞的胚胎線粒體DNA拷貝數(shù)分別為24442.91±14952.26、749.62±212.24、48807.06±31535.96,兩兩比較發(fā)現(xiàn)三組之間具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;D3胚胎卵裂球數(shù)≤6細(xì)胞、7-8細(xì)胞、≥9細(xì)胞線粒體DNA拷貝數(shù)分別為45059.98±24203.006、3484.74±2831.457、9382.31±8699.437,兩兩比較發(fā)現(xiàn)三組之間具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;4.女性年齡、男性年齡、不孕年限、基礎(chǔ)卵泡刺激素水平、促性腺激素(Gn)用量等均與早期胚胎線粒體DNA拷貝數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:早期胚胎線粒體DNA拷貝數(shù)與不同的胚胎級(jí)別、碎片率、D2和D3時(shí)胚胎卵裂球數(shù)目相關(guān),胚胎級(jí)別高、碎片率低、D2和D3時(shí)胚胎卵裂球數(shù)目分別為4-和7-8細(xì)胞的胚胎,胚胎發(fā)育潛能可能相對(duì)較高,胚胎移植應(yīng)優(yōu)選選擇。
【關(guān)鍵詞】:DNA 線粒體 胚胎發(fā)育 形態(tài)學(xué)參數(shù) 臨床因素 PGD/PGS 高通量測(cè)序
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R714
【目錄】:
  • 中英文縮略詞表5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-12
  • 技術(shù)路線12-13
  • 實(shí)驗(yàn)材料13-14
  • 實(shí)驗(yàn)方法14-18
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-23
  • 討論23-25
  • 結(jié)論25-26
  • 全文小結(jié)26-27
  • 參考文獻(xiàn)27-30
  • 文獻(xiàn)綜述30-46
  • 參考文獻(xiàn)39-46
  • 碩士期間發(fā)表論文46-47
  • 致謝47

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