目的:分析宮頸癌、宮頸高級別上皮內(nèi)瘤變及正常宮頸組織的微生態(tài)多樣性,探討宮頸組織菌群與宮頸病變發(fā)生之間的相關(guān)性,為臨床防治宮頸癌提供新的思路及研究方向。觀察中藥內(nèi)服外用防治宮頸上皮內(nèi)瘤變的臨床療效,并結(jié)合前期研究結(jié)果,探討中醫(yī)藥與宮頸微生態(tài)、HPV感染及宮頸病變發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。充分發(fā)揮中醫(yī)藥特色以干預(yù)宮頸上皮內(nèi)瘤變的發(fā)生發(fā)展,從而達(dá)到防治宮頸癌的目的,并指導(dǎo)臨床新藥開發(fā)與研究。方法:分析宮頸癌、宮頸高級別上皮內(nèi)瘤變及正常宮頸組織各5例(其中宮頸癌及高級別上皮內(nèi)瘤變患者均合并高危型HPV感染)進(jìn)行宮頸微生態(tài)多樣性分析。了解宮頸菌群與宮頸病變發(fā)生之間的相關(guān)性。并選取2018年05月至2019年01月就診于江蘇省中醫(yī)院婦科,伴高危型HPV感染的宮頸上皮內(nèi)瘤變且中醫(yī)證型為濕熱蘊(yùn)結(jié)證的患者60例,按病變程度分為低級別上皮內(nèi)瘤變患者30例,高級別上皮內(nèi)瘤變患者(均為子宮頸錐形切除術(shù)后)30例,且兩組再隨機(jī)分為中藥組(中藥內(nèi)服外用組)及對照組(保婦康栓組)各15例。1個(gè)月為1療程,共治療3個(gè)療程,對比治療前及治療后3個(gè)月后的HPV轉(zhuǎn)陰率、中醫(yī)證候積分、臨床癥狀積分等指標(biāo)。結(jié)合前期研究結(jié)果,觀察中醫(yī)藥與宮頸-陰道微生態(tài)、HPV感染及宮頸病變發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。結(jié)果:1.宮頸組織微生態(tài)基礎(chǔ)分析:宮頸組織物種總量隨樣本量的增加而增加,核心物種量隨著樣本量的增加而減少。隨著宮頸病變程度的增加,宮頸組織微生物的豐富性及多樣性逐漸升高。2.宮頸組織菌群從門水平上看,宮頸組織菌群中主要由四個(gè)門構(gòu)成,即:Firmicutes、Acitinobacteria、Fusobacteria、Proteobacteria,與陰道微環(huán)境群落構(gòu)成相吻合。從屬水平上分析,宮頸組織菌屬種類繁多,菌屬種類的豐富度與宮頸病變程度呈正相關(guān),病變宮頸組織中以Sneathia、Prevotella、Atopobium、Gardnerella、Providencia、Lysinibacillus、Morganella等條件致病菌的豐度較高,正常宮頸組織以Lactobacillus菌屬豐度相對較高,其中Lactobacillus亦為陰道優(yōu)勢菌屬。3.中藥內(nèi)服外用對宮頸-陰道微環(huán)境有一定的調(diào)節(jié)作用,可通過促進(jìn)其微環(huán)境穩(wěn)態(tài)的恢復(fù),從而增加機(jī)體對HPV的清除率及降低機(jī)體對HPV的易感性,干預(yù)宮頸疾病的發(fā)生及發(fā)展。4.HPV轉(zhuǎn)陰率:LSIL組中藥治療組1 1人轉(zhuǎn)陰(轉(zhuǎn)陰率73.33%),對照組9人轉(zhuǎn)陰(轉(zhuǎn)陰率60.00%),無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但中藥治療組轉(zhuǎn)陰率高于對照組。HSIL組中藥治療組轉(zhuǎn)陰12例(轉(zhuǎn)陰率80.00%),對照組轉(zhuǎn)陰10例(轉(zhuǎn)陰率66.67%),二者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但中藥治療組轉(zhuǎn)陰率高于較對照組。5.中醫(yī)證候積分及臨床癥狀積分比較:LSIL組及HSIL組中藥治療組及對照組治療前后中醫(yī)證候積分及臨床癥狀積分均有顯著下降。6.治療有效率:LSIL組及HSIL組中藥治療組的總有效率高于對照組,且治愈人數(shù)較對照組多。結(jié)論:中藥治療組及對照組在治療宮頸上皮內(nèi)瘤變上,均可顯著改善中醫(yī)證候及緩解臨床癥狀。雖然在HPV轉(zhuǎn)陰率及治愈率上治療組與對照組之間并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但宮頸上皮內(nèi)瘤變患者中藥組轉(zhuǎn)陰人數(shù)、HPV轉(zhuǎn)陰率,治愈人數(shù)及治療的總有效率均高于對照組,表明中醫(yī)藥防治宮頸上皮內(nèi)瘤變有研究價(jià)值,值得臨床進(jìn)一步深入研究。宮頸組織群落的多樣性隨著病變嚴(yán)重程度的增加而增加,致病菌群的豐度亦逐漸增加,并逐步取代優(yōu)勢菌群:復(fù)雜的宮頸微環(huán)境與機(jī)體HPV持續(xù)感染及宮頸病變的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。中醫(yī)藥可調(diào)節(jié)宮頸-陰道微生態(tài),增加機(jī)體對HPV的清除、降低機(jī)體對HPV的易感性,從而干預(yù)宮頸病變的發(fā)生發(fā)展。為中醫(yī)藥從微觀角度防治宮頸癌提供新的臨床思路。
【學(xué)位單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R737.33
【部分圖文】：

??圖２－３中的序列長度分布通過Ｍｉｓｅｑ測序去掉冗余的信息后提示所有樣本大部分序列??長度分布在４２１ｂｐ－４４０ｂｐ和４４１ｂｐ－４６０ｂｐ這兩個(gè)序列長度區(qū)間，提示樣品質(zhì)控合格，可繼??續(xù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。??４．２宮頸組織微生物基礎(chǔ)分析??通過對需要序列的聚類操作，將序列按照彼此的相似性（１６Ｓ的變異率在３％之內(nèi)，超??過９７％就被認(rèn)為是另一物種）分為許多小組，故在相似性在９７％之下的序列分為一個(gè)組，??分成的組成為ＯＴＵ?（Ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌ?Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ?Ｕｎｉｔｓ），在ＯＴＵ的基礎(chǔ)上進(jìn)行分析。本次實(shí)??驗(yàn)在ＯＴＵ基礎(chǔ)上進(jìn)行了對三組組織菌群的Ｐａｎ／Ｃｏｒｅ物種分析（圖２－４及圖２－５）及Ａｌｐｈａ??多樣性分析（表２－１８）及稀釋曲線分析（圖２－６）。??圖２－４?Ｐａｎ物種分析??Ｐａｎ?ａｎａｌｙｓｉｓ?＊??—ａｌｌ??ｚ??＿?１２５０?Ａ??Ｉ?，０００?－??！?ｘ??〇?７５０?－??Ｉ?／??＾?５００?ｆ??２５０?－Ｉ?！?１?！?ｒ??＜?ｂ?９??Ｎｕｍｂｅｒｓ?ｏｆ?ｓａｍｐｌｅｓ?、??代：圖２－４橫十標(biāo)代表樣本最，縱外標(biāo)代表物種總最。??圖２－５?Ｃｏｒｅ物種分析??Ｃｏｒｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?土

過９７％就被認(rèn)為是另一物種）分為許多小組，故在相似性在９７％之下的序列分為一個(gè)組，??分成的組成為ＯＴＵ?（Ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌ?Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ?Ｕｎｉｔｓ），在ＯＴＵ的基礎(chǔ)上進(jìn)行分析。本次實(shí)??驗(yàn)在ＯＴＵ基礎(chǔ)上進(jìn)行了對三組組織菌群的Ｐａｎ／Ｃｏｒｅ物種分析（圖２－４及圖２－５）及Ａｌｐｈａ??多樣性分析（表２－１８）及稀釋曲線分析（圖２－６）。??圖２－４?Ｐａｎ物種分析??Ｐａｎ?ａｎａｌｙｓｉｓ?＊??—ａｌｌ??ｚ??＿?１２５０?Ａ??Ｉ?，０００?－??！?ｘ??〇?７５０?－??Ｉ?／??＾?５００?ｆ??２５０?－Ｉ?！?１?！?ｒ??＜?ｂ?９??Ｎｕｍｂｅｒｓ?ｏｆ?ｓａｍｐｌｅｓ?、??代：圖２－４橫十標(biāo)代表樣本最，縱外標(biāo)代表物種總最。??圖２－５?Ｃｏｒｅ物種分析??Ｃｏｒｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?土??—ａｌｌ??５００?－??？?＼??Ｉ?＼??Ｌ?＼??１??°?－Ｉ?１?１?１?ｒ??■？?ｃ：?ｉｓ??Ｎｕｍｂｅｒｓ?ｏｆ?ｓａｍｐｌｅｓ?、??２３??

第二部分臨床研究線分析（Ｒａｒｅｆａｃｔｉｏｎｃｕｒｖｅ）主要用于反應(yīng)實(shí)驗(yàn)的測序量是否以得出隨著測序量的增加，Ｃ、Ｈ、Ｎ三組ＯＴＵ的數(shù)目逐漸真實(shí)的組成情況，與Ｃｏｖｅｒａｇｅ指數(shù)分析結(jié)果相一致，更加坐標(biāo)代表宮頸組織群落的測序量，縱坐標(biāo)代表可檢測到的Ｏ微生物組成分析??圖２－７菌群門水平組成??
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