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恒溫?cái)U(kuò)增HPV檢測(cè)技術(shù)在宮頸癌篩查中的應(yīng)用效果評(píng)價(jià)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-10-08 17:44
   目的評(píng)價(jià)恒溫?cái)U(kuò)增人乳頭狀瘤病毒(HPV)DNA檢測(cè)技術(shù)(Isomega)檢測(cè)HPV DNA的準(zhǔn)確性;評(píng)估其用于子宮頸癌及癌前病變篩查的有效性和可行性,為尋找適合我國(guó)國(guó)情的更高效的子宮頸癌篩查方法提供依據(jù)。方法本研究于2016年6月至8月在我國(guó)內(nèi)蒙古地區(qū)招募了 2,774例30-64歲有性生活史的婦女進(jìn)行宮頸癌篩查;由受過(guò)培訓(xùn)的婦科醫(yī)生采集所有婦女的宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本,所有標(biāo)本均進(jìn)行細(xì)胞學(xué)診斷;采用第二代雜交捕獲技術(shù)(HC2)、cobas 4800和Isomega三種HPV DNA檢測(cè)技術(shù)平行檢測(cè)宮頸標(biāo)本,評(píng)價(jià)三種HPV檢測(cè)方法的一致性;使用線性探針?lè)?INNO-LiPA)對(duì)所有標(biāo)本進(jìn)行分型檢測(cè)以評(píng)價(jià)三種HPV檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度;以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn),評(píng)估HC2、cobas 4800和Isomega用于篩查子宮頸癌及癌前病變的效果。結(jié)果1.Isomega與HC2檢測(cè)HPV的總一致率為92.7%(Kappa=0.74);Isomega與cobas4800檢出HPVDNA的總一致率為94.8%(Kappa=0.82),檢出HPV16和 18型的一致率分別為99.7%(Kappa=0.95),99.8%(Kappa=0.91)2.以INNO-LiPA分型結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn),HC2與INNO-LiPA檢出HPV的一致率為92.3%(Kappa=0.72);cobas 4800與INNO-LiPA檢出HPV的一致率為93.6%(Kappa=0.78),檢測(cè)HPV16和 18型的一致率分別為99.1%和99.5;Isomega與INNO-LiPA檢出HPV的一致率為92.1%(Kappa=0.74),檢測(cè)HPV16和 18型的一致率分別為99.0%和99.4%。3.以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn),分別計(jì)算三種檢測(cè)方法檢出CIN2+和CIN3+的靈敏度、特異度。HC2的靈敏度均為100%,特異度分別為86.5%和85.7%;cobas 4800的靈敏度分別為89.8%和90.9%,特異度分別為85.1%和84.0%;Isomega的靈敏度分別為87.8%和90.9%,特異度分別為82.9%和82.3%結(jié)論Isomega能準(zhǔn)確檢測(cè)HPV16、HPV18和其他高危型別HPV,具有較高的篩查靈敏度和特異度,且具有簡(jiǎn)便、高效和低成本等特點(diǎn),可作為初篩方法用于臨床和大規(guī)模人群子宮頸癌篩查。
【學(xué)位單位】:廈門(mén)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R737.33
【部分圖文】:

檢測(cè)原理,熒光,聚合酶,通道檢測(cè)


、、酶(RNaseH)以及優(yōu)化的探針檢測(cè)技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)。針對(duì)15種HPV基因組序逡逑人P血紅蛋白基因分別設(shè)計(jì)引物,其中一個(gè)引物帶有T7邋RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄逡逑子,檢測(cè)樣本中如存在目標(biāo)DNA片段則與相應(yīng)的特異性引物結(jié)合并進(jìn)行有逡逑延伸,產(chǎn)生延伸的引物。延伸的引物與另一個(gè)特異的HPV引物結(jié)合,形成逡逑能夠作為T7RNA聚合酶的模版,在T7RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄下,產(chǎn)生大量的逡逑A分子。這些RNA分子與最初的特異性引物結(jié)合并被逆轉(zhuǎn)錄成更多的延伸的逡逑,從而循環(huán)擴(kuò)增。通過(guò)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)生了大量的RNA分子與所加入的有熒光逡逑分子信標(biāo)(molec(iLar邋beacon)探針相結(jié)合發(fā)出焚光,該焚光能被焚光定量逡逑儀的檢測(cè)裝置實(shí)時(shí)捕捉到并加以記錄。13種高危HPV?jǐn)U增產(chǎn)物共享一個(gè)分逡逑標(biāo),通過(guò)FAM熒光通道來(lái)檢測(cè);HPV16擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)CY5熒光通道檢測(cè);逡逑V18擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)ROX?zé)晒馔ǖ罊z測(cè);內(nèi)標(biāo)(人P球蛋白基因)通過(guò)VIC逡逑通道來(lái)檢測(cè)。逡逑J邋—邋邋■邐Viwrm'邋1邐&交M逡逑

人群,分型,標(biāo)本


4.2研究人群中HPV型別的分布逡逑根據(jù)MNO-LiPA分型結(jié)果,2,774例宮頸細(xì)胞學(xué)標(biāo)本中檢測(cè)到的HPV型別逡逑分布如圖7,常見(jiàn)的5種高危型別分別為HPV52型(8.2%)、HPV16型(3.9%)、逡逑HPV45邋型(3.8%)、HPV39邋型(3.8%)和邋HPV51邋型(2.5%),常見(jiàn)的低危型逡逑別為邋HPV54邋型(3.1%)、HPV

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2832555

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