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bcl-2小分子干擾RNA對(duì)人子宮內(nèi)膜癌RL-952細(xì)胞阿霉素敏感性的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-08-24 09:36
【摘要】:目的研究靶向bcl-2小分子干擾RNA(siRNA)干擾序列對(duì)人子宮內(nèi)膜癌RL-952細(xì)胞阿霉素(DOX)敏感性的影響及相關(guān)作用機(jī)制。方法 2014年5—8月,將siRNA干擾序列轉(zhuǎn)染人子宮內(nèi)膜癌RL-952細(xì)胞,設(shè)3個(gè)實(shí)驗(yàn)組:空白對(duì)照組、bcl-2 siRNA干擾組(轉(zhuǎn)染bcl-2 siRNA干擾序列)及陰性對(duì)照組(轉(zhuǎn)染siRNA空載序列),檢測(cè)bcl-2 siRNA干擾組的轉(zhuǎn)染效率和3組bcl-2表達(dá)水平。將細(xì)胞隨機(jī)分成5組,分別為空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組(轉(zhuǎn)染siRNA空載序列)、干擾組(轉(zhuǎn)染bcl-2 siRNA干擾序列)、DOX組(加入5μg/ml DOX)、聯(lián)合組(轉(zhuǎn)染siRNA干擾序列并加入5μg/ml DOX),檢測(cè)細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡率、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9活性及細(xì)胞色素C水平。結(jié)果 siRNA干擾序列轉(zhuǎn)染人子宮內(nèi)膜癌RL-952細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率為(94.6±12.5)%。3組bcl-2表達(dá)水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=8.75,P0.05)。bcl-2 siRNA干擾組bcl-2表達(dá)水平低于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組(q=3.99、2.87,P0.01)。5組細(xì)胞活力比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=42.52,P0.05)。干擾組、DOX組、聯(lián)合組細(xì)胞活力低于空白對(duì)照組(q=7.66、8.64、6.89,P0.05);聯(lián)合組細(xì)胞活力低于DOX組(q=6.76,P0.01)。5組細(xì)胞凋亡率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=112.34,P0.05)。干擾組、DOX組、聯(lián)合組細(xì)胞凋亡率高于空白對(duì)照組(q=5.78、4.99、6.21,P0.05);聯(lián)合組細(xì)胞凋亡率高于DOX組(q=4.89,P0.01)。5組Caspase-3、Caspase-9活性及細(xì)胞色素C水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干擾組、DOX組、聯(lián)合組Caspase-3、Caspase-9活性及細(xì)胞色素C水平高于空白對(duì)照組(P0.05);DOX組、聯(lián)合組Caspase-3活性高于陰性對(duì)照組,干擾組、DOX組、聯(lián)合組Caspase-9活性高于陰性對(duì)照組(P0.05);聯(lián)合組Caspase-3活性高于干擾組,DOX組、聯(lián)合組Caspase-9活性高于干擾組(P0.05);聯(lián)合組Caspase-3、Caspase-9活性及細(xì)胞色素C水平高于DOX組(P0.05)。結(jié)論靶向bcl-2 siRNA干擾序列可以增強(qiáng)人子宮內(nèi)膜癌RL-952細(xì)胞的DOX敏感性,bcl-2可作為人子宮內(nèi)膜癌基因治療的候選靶點(diǎn)。
【圖文】:

序列,表達(dá)水平,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,細(xì)胞活力


驗(yàn),組間兩兩比較采用Wilcoxon檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1轉(zhuǎn)染效率bcl-2siRNA干擾序列轉(zhuǎn)染人子宮內(nèi)膜癌RL-952細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率為(94.6±12.5)%。2.2bcl-2表達(dá)水平比較空白對(duì)照組bcl-2表達(dá)水平為(1.109±0.002),bcl-2siRNA干擾組為(0.447±0.001),陰性對(duì)照組為(1.126±0.004)。各組bcl-2表達(dá)水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=8.75,P<0.05)。bcl-2siRNA干擾組bcl-2表達(dá)水平低于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=3.99、2.87,P<0.01,見圖1)。注:siRNA=小分子干擾RNA圖1bcl-2表達(dá)水平Figure1Expressionlevelofbcl-22.3細(xì)胞活力比較空白對(duì)照組細(xì)胞活力為(100.0±0.2)%,陰性對(duì)照組為(99.5±1.8)%,干擾組為(83.0±3.6)%,DOX組為(79.0±0.7)%,聯(lián)合組為(63.0±1.6)%。5組細(xì)胞活力比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=42.52,P<0.05)。干擾組、DOX組、聯(lián)合組細(xì)胞活力低于空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=7.66、8.64、6.89,P<0.05);聯(lián)合組細(xì)胞活力低于DOX組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=6.76,P<0.01)。2.4細(xì)胞凋亡率比較空白對(duì)照組細(xì)胞凋亡率為(2.3±0.2)%,陰性對(duì)照組為(3.4±0.4)%,干擾組為(18.4±1.2)%,DOX組為(22.3±4.2)%,聯(lián)合組為(39.2±3.7)%。5組細(xì)胞凋亡率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=112.34,P<0.05)。干擾組、DOX組、聯(lián)合組細(xì)胞凋亡率高于空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=5.78、4.99、6.21,P<0.05);聯(lián)合組細(xì)胞凋亡率高于DOX組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=4.89,P<0.01)。2.5Caspase-3、Caspase-9活性及細(xì)胞色素C水平比較各組Caspase-3、Caspase-9活性及細(xì)胞色素C水平比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。干擾組、DOX組、聯(lián)合組Caspase-3、Caspase-9活性及細(xì)胞色素C水平高?

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