【摘要】：研究背景及目的:子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis, EMs)是一種常見的婦科疾病,育齡期婦女發(fā)病率高達10-15%。因病因復雜、診斷滯后、復發(fā)率高等特點,多年來始終是學者們研究的熱點。有證據(jù)表明,內(nèi)異癥患者的在位內(nèi)膜(eutopic endometrium, EU)及異位內(nèi)膜(ectopic endometrium, EC)之間存在不同程度的基因?qū)W改變,可能是差異性發(fā)病的原因之一。微小RNA (microRNA, miRNA)是一類長度約18-22核苷酸的非編碼小分子RNA,主要在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的表達。轉(zhuǎn)錄因子(Transcription factor, TF)是一類具有特殊功能的蛋白質(zhì),是轉(zhuǎn)錄水平重要的調(diào)控因子。二者關(guān)系緊密,可以相互作用,也可以協(xié)同調(diào)控靶基因的表達,使得基因表達調(diào)控網(wǎng)絡更為精細準確。近來研究報道m(xù)iRNA和TF可能參與內(nèi)異癥發(fā)病的多個環(huán)節(jié)。但傳統(tǒng)的方法采用軟件預測miRNA和TF的下游靶基因,結(jié)果假陽性率高,數(shù)據(jù)重復性差,給下游功能學實驗帶來了干擾和誤導。且目前國內(nèi)外尚無對EMs差異性miRNA和TF聯(lián)合調(diào)控分析的報道。因此,本研究采用高通量測序的方法篩選EMs患者EC/EU的miRNA和mRNA配對差異表達譜,再通過生物信息學方法建立EMs特異性的miRNA-TF-gene調(diào)控網(wǎng)絡,以進一步明確EMs的發(fā)病機制,并為臨床治療提供線索。研究方法:選取8例EMs患者的EC和EU組織進行small RNA測序和轉(zhuǎn)錄本測序,獲得內(nèi)異癥EC/EU miRNA和mRNA差異表達譜。通過生物信息學方法預測miRNA和TF的下游靶基因。再通過Pearson相關(guān)系數(shù)將異常表達的基因與miRNA、TF進行配對,建立miRNA-TF-gene的調(diào)控網(wǎng)絡。使用GO和KEGG對網(wǎng)絡中的差異表達基因進行功能學注釋。最后,采用qRT-PCR的方法在20例EMs患者的配對標本中對測序結(jié)果進行驗證。結(jié)果:①通過測序共鑒別出107個差異表達的miRNA和6662個差異表達的基因。②建立了內(nèi)異癥miRNA-TF-gene的相互作用關(guān)系和調(diào)控網(wǎng)絡,包括22個miRNA、12個TF和430個mRNA,并定位了 44個GO功能條目和27條Pathways。其中,miRNA-449和34b/c基因簇成員、miR-200家族成員、miR-106a-363基因簇成員、FOX家族成員、GATA家族成員、E2F家族成員、SOX9、CEBPA和HNF4A等miRNA和TF可能是內(nèi)異癥致病的關(guān)鍵調(diào)控因子和潛在臨床治療靶點,值得下游功能學研究進一步驗證。③qRT-PCR中的變化趨勢與高通量測序結(jié)果一致,初步驗證了測序結(jié)果的可靠性。結(jié)論:EMs患者EC/EU中存在大量差異性表達的miRNA、TF和mRNA,它們相互作用,構(gòu)成了特異性的miRNA-TF-基因調(diào)控網(wǎng)絡,導致多種生物學功能和信號通路異常,在疾病的發(fā)生和進展中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R711.71
【圖文】：

前言逡逑子宮內(nèi)膜異位癥（Ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ，ＥＭｓ）是一種常見婦科疾病，育齡期婦女逡逑發(fā)病率高達１０％－１５％，主要累及卵巢、盆腔腹膜、子宮直腸陷窩等處［１］（圖１）。逡逑常見臨床表現(xiàn)為慢性盆腔疼痛，４０－６０％的女性伴有不孕，且診斷滯后于發(fā)病長達逡逑七年時間，嚴重影響了婦女的健康和生活質(zhì)量［２］。目前尚無針對內(nèi)異癥病因的逡逑有效治療：保守性手術(shù)五年復發(fā)率高達５０％邋［３］，藥物治療同樣面臨副作用嚴重逡逑及停藥復發(fā)等問題［４］。逡逑Ｃｏｍｍｏｎ邋ｓｉｔｅｓ邋ｆｏｒ邋ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ邋ｇｒｏｗｔｈｓ邋ｉｎ邋ｒｅｄ逡逑ｏｎ逡逑Ｈ邋ｏｆ邋］逡逑邐邋Ｎｏｒｍａｌ邋ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ邋ｌｉｎｉｎｇ邐——逡逑圖１．子宮內(nèi)膜異位癥示意圖逡逑遺憾的是，盡管國內(nèi)外無數(shù)學者們始終致力于其病因?qū)W研究，但至今仍無定逡逑論。１９２７年，Ｓａｍｐｓｏｎ首次提出了“經(jīng)血逆流學說”邋［５］，被人們視為經(jīng)典理論。逡逑但該理論無法解釋８０％－９０％的婦女存在經(jīng)血逆流的現(xiàn)象，僅有１0％－１５％的患者逡逑罹患內(nèi)異癥的現(xiàn)實［６］。之后，學者們相繼提出了體腔上皮化生學說、誘導學說、逡逑胚胎殘留學說、干細胞學說、古子宮學說等

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【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Chenggang Wang;Ren Ren;Haolin Hu;Changjun Tan;Miao Han;Xiaolin Wang;Yun Zheng;;MiR-182 is up-regulated and targeting Cebpa in hepatocellular carcinoma[J];Chinese Journal of Cancer Research;2014年01期

本文編號：2790928