【摘要】：第一部分FBP1基因與多囊卵巢綜合征的相關(guān)性研究背景:多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育齡女性中常見(jiàn)的生殖內(nèi)分泌疾病,以高雄激素血癥或多毛、卵巢多囊樣改變、稀發(fā)排卵為特征,常伴發(fā)肥胖、胰島素抵抗及其他代謝問(wèn)題[1-2],其中高雄激素血癥的臨床表現(xiàn)尤為突出,已有研究發(fā)現(xiàn)多個(gè)基因與PCOS高雄激素血癥的發(fā)生密切相關(guān)[3]。2012年,陳子江課題組通過(guò)全基因組關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)PCOS易感基因區(qū)域內(nèi)包含F(xiàn)BPI基因[4],因此,推測(cè)FBP1與PCOS的發(fā)病可能相關(guān)。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)FBP1在高雄激素條件下培養(yǎng)的小鼠卵泡及顆粒細(xì)胞中表達(dá)升高[5]。因此,FBP1在PCOS高雄激素血癥患者卵泡局部微環(huán)境中的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。目的:檢測(cè)果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)基因在多囊卵巢綜合征(PCOS)高雄激素血癥患者卵巢顆粒細(xì)胞中的表達(dá),并評(píng)價(jià)其臨床意義。方法:收集100例PCOS患者,分為PCOS高雄激素血癥組和PCOS非高雄激素血癥組,和同期58例正常對(duì)照患者作為正常對(duì)照組,收集卵泡液顆粒細(xì)胞,采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(quantificationalrealtimePCR,qRT-PCR)檢測(cè)各組卵泡液顆粒細(xì)胞中FBP1的表達(dá),并做關(guān)聯(lián)性分析,同時(shí)收集患者各項(xiàng)臨床指標(biāo),進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,對(duì)患者遠(yuǎn)期并發(fā)癥進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果:肥胖、高血壓、代謝綜合征等遠(yuǎn)期并發(fā)癥的發(fā)生率在PCOS高雄激素組中皆高于PCOS非高雄激素組和正常對(duì)照組(P0.05)。PCOS高雄激素組的的FINS(P0.05)、HOMA-IR(P0.05)、LH(P0.05)、LH/FSH(P0.05)、AMH(P0.05)、DHE-S(P0.01)、基礎(chǔ)卵泡數(shù)(P0.01)高于正常對(duì)照組和PCOS非高雄激素組。FBP1 mRNA在PCOS高雄激素組患者卵泡液顆粒細(xì)胞中的表達(dá)高于正常對(duì)照組(P=0.002)及非高雄激素組(P=0.038)。PCOS高雄激素組FBP1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量與硫酸脫氫表雄酮(DHE-S)呈正相關(guān)(r=0.470,P=0.021)。結(jié)論:PCOS高雄激素患者肥胖、高血壓、代謝綜合征等遠(yuǎn)期并發(fā)癥的發(fā)生率明顯升高,FBP1在PCOS高雄激素血癥患者卵泡液顆粒細(xì)胞中高表達(dá),其表達(dá)量與DHE-S水平呈正相關(guān)。第二部分IGF2BP2導(dǎo)致胚胎發(fā)育阻滯的機(jī)制背景:多囊卵巢綜合征(PCOS)患者有明顯的不孕癥傾向,而導(dǎo)致PCOS患者發(fā)生不孕癥的原因有很多,其中自然流產(chǎn)占了較大比例。PCOS患者中胰島素抵抗伴發(fā)發(fā)病率高達(dá)50%～70%[2]。胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA-binding蛋白2(IGF2BP2)是調(diào)節(jié)IGF2的翻譯上起著關(guān)鍵作用的生長(zhǎng)因子,控制胎兒生長(zhǎng)和器官形成包括脂肪形成和胰腺發(fā)育[6]。白人種群中,基因IGF2BP2的突變將導(dǎo)致二型糖尿病患者出現(xiàn)胰島素抵抗[7]。以往研究報(bào)道,PCOS患者自然流產(chǎn)率明顯升高,主要有以下三個(gè)原因:(1)子宮內(nèi)膜容受性下降,(2)卵母細(xì)胞質(zhì)量下降,(3)促排卵藥物影響妊娠[8],而其中卵母細(xì)胞質(zhì)量下降可能是由于PCOS患者存在減數(shù)分裂和胚胎早期發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)缺陷所致[9]。目的:了解Imp2-/-小鼠生育力及胚胎發(fā)育情況,通過(guò)對(duì)母型-合子型轉(zhuǎn)變(maternal zygote transaction,MZT)過(guò)程的深入研究,明確胚胎激活過(guò)程母源mRNA的表達(dá)情況,并探討IGF2BP2的作用機(jī)制。方法:通過(guò)培育和繁殖Imp2--小鼠,觀察其繁殖周期,每窩生仔數(shù)等相關(guān)數(shù)據(jù),統(tǒng)計(jì)其生育力;固定Imp2-/-小鼠各年齡段卵巢,并進(jìn)行切片,觀察卵巢形態(tài)及卵泡發(fā)育情況;利用人工授精(in vitro fertilization,IVF)的方法,觀察并比較Imp2/-小鼠、Imp2+/-小鼠以及野生型小鼠卵母細(xì)胞受精后胚胎的發(fā)育情況以及胚胎各時(shí)期(1cell、2cell、4cell、8cell、桑椹胚、囊胚)的發(fā)育情況;利用人工授精的方法,觀察并比較Imp2-/-小鼠和對(duì)照小鼠卵母細(xì)胞受精前后GV、MⅡ、2 cell時(shí)期小鼠母源mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果:Imp2-/-雌鼠生育力明顯降低,Imp2-/-雄鼠生育力不受影響;大部分Imp2-/-雌鼠的卵母細(xì)胞受精后胚胎發(fā)育停滯在二細(xì)胞時(shí)期;Imp2-/-雌鼠胚胎發(fā)育至二細(xì)胞時(shí)期母源mRNA的下降程度沒(méi)有對(duì)照組明顯。結(jié)論:Igf2bp2敲除小鼠胚胎發(fā)生二細(xì)胞阻滯,IGF2BP2在卵母細(xì)胞中調(diào)節(jié)基因組的轉(zhuǎn)錄活性,IGF2BP2的缺失會(huì)導(dǎo)致母源mRNA降解異常。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R711.75
【圖文】：

差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜邋０．０５）。逡逑１．３．３邐ｍＲＮＡ在各組顆粒細(xì)胞中的表達(dá)見(jiàn)圖２。逡逑／＾戶(hù)／邋ｍＲＮＡ在ＰＣＯＳ高雄激素組顆粒細(xì)胞中的表達(dá)高于正常對(duì)照組逡逑（Ｐ＝０．００２）和邋ＰＣＯＳ邋非高雄激素組（Ｐ＝０．０３８）。逡逑１．３．４邐Ｆ及ＷｍＲＮＡ的表達(dá)與臨床資料的相關(guān)性分析見(jiàn)圖３。逡逑ＰＣＯＳ高雄激素組ｍＲＮＡ的相對(duì)表達(dá)量與ＤＨＥ－Ｓ呈正相關(guān)（ｒ＝０．４７０，逡逑Ｐ＝０．０２１邋），而ＰＣＯＳ非高雄激素組Ｆ５Ｐ７邋ｍＲＮＡ的相對(duì)表達(dá)量（ｒ＝０．１４８，尸＝０．２５０）逡逑和正常對(duì)照組仰戶(hù)／邋ｍＲＮＡ的相對(duì)表達(dá)量（ｒ＝０．００９，邋Ｐ＝０．９４９）與ＤＨＥ－Ｓ均無(wú)相逡逑關(guān)性ｔ逡逑２０逡逑

圖３Ｆ５Ｐ／ｍＲＮＡ在ＰＣ0Ｓ高雄激素組（Ａ）、ＰＣ0Ｓ非高雄激素ｉｌｌ邋（Ｂ）和止常對(duì)照逡逑組（Ｃ）中的表達(dá)水平與ＤＨＥ－Ｓ的相關(guān)性分析逡逑Ｆｉｇ．３邋Ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｏｆ邋ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ邋ｂｅｔｗｅｅｎ邋ＦＢＰ１邋ｍＲＮＡ邋ａｎｄ邋ＤＨＥ－Ｓ邋ｉｎ邋ＰＣＯＳ邋ｗｉｔｈ逡逑ｈｙｐｅｒａｎｄｒｏｇｅｎｉｓｍ邋（Ａ），邋ＰＣＯＳ邋ｗｉｔｈｏｕｔ邋ｈｙｐｅｒａｎｄｒｏｇｅｎ邋ｉｓｍ邋（Ｂ）邋ａｎｄ邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋（Ｃ）逡逑邐詠泡極細(xì)抱邐逡逑［邋ｍｍｍ邋）逡逑Ｉ邋ＬＨｌ——邋ＣＹＰ１１Ａ逡逑（Ｐ４６０ＳＣＣ）逡逑ｒ邋Ａ４路輕［邐［ｍｍｍ邋］邐［邋徑－逡逑３ｐＨＳＵ＿＿邋ＣＶＰ１７逡逑，ｒ邐（Ｐ４５０Ｃ１７）逡逑（邐）邐１７￥邋氃系］逡逑ｌ逡逑ＣＹＰ１７－Ｊ邐１７＊２０邋裂夗膊一－－ＣＹＰ１７逡逑邐；邋［邐邋邐＇邋［邐逡逑［１７－砼側(cè)邋）邐［￣￣駁垞表雄Ｗ邋）逡逑’？、邐邐邐邋Ｊ邐—ＣＹＰ１７邋．—邋３＾ＨＳＤ逡逑—邋邋、Ｖ．邐＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿邐Ｊ逡逑ＣＹＰ２１—邐ＣＹＰ２１—－邐ｒ邐…一￣邋：－二．．．．．—、逡逑

逡逑Ｉ邋ｚ邋■Ｗ邋—邋？邋ＰＪ＇；＾逡逑—＾｜國(guó)逡逑圖５對(duì)照組與／／＾２＿Ａ組雌鼠生育力情況及小同時(shí)期胚胎發(fā)ｉｆ情況逡逑Ｆｉｇ．５邋Ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ邋ａｎｄ邋ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ邋ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ邋ｉｎ邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ邋ａｎｄ邋ｌｍｐ２＇邋ｇｒｏｕｐ邋ｏｆ逡逑ｆｅｍａｌｅ邋ｍｉｃｅ逡逑ＯＧＶ邋ａ邋ＭＵ０２ｓＨ逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 哈靈俠;石玉華;趙君利;陳子江;;寧夏地區(qū)多囊卵巢綜合征患者不同雄激素狀態(tài)脂代謝特點(diǎn)的比較性分析[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年09期

2 鄧姝;何貴翔;;多囊卵巢綜合征高雄激素血癥動(dòng)物模式構(gòu)建及中藥治療機(jī)制研究[J];長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2012年03期

本文編號(hào)：2775146