【摘要】：目的:研究曲妥珠單抗(Trastuzumab)聯(lián)合奧沙利鉑(Oxaliplatin)對HER2陽性卵巢癌細(xì)胞活性的影響及p-AKT、p-ERK、Bcl-2、Bax的相關(guān)信號通路,探討二者聯(lián)合的可能性及有效性。材料與方法:實驗采用人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3細(xì)胞進行體外培養(yǎng),實驗分為4組:對照組,奧沙利鉑組,曲妥珠單抗組,聯(lián)合處理組(奧沙利鉑和曲妥珠單抗),分別進行如下實驗:1.用光學(xué)顯微鏡對藥物處理后的細(xì)胞進行形態(tài)學(xué)觀察;2.MTT法檢測藥物對細(xì)胞增殖抑制的影響,分析藥物對細(xì)胞增殖的抑制率;3.流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期;4.用免疫印跡法檢測SKOV3細(xì)胞p-AKT、p-ERK、Bcl-2及Bax蛋白的表達。結(jié)果:1.不同濃度曲妥珠單抗(0.1μμg/ml、1μμg/ml、10μg/ml、100μg/ml)分別作用24h、48h、72h、96h對SKOV3細(xì)胞無細(xì)胞毒性(P0.05);2.流式細(xì)胞術(shù)檢測SKOV3細(xì)胞周期結(jié)果顯示:(1)相比于對照組,單獨使用曲妥珠單抗對SKOV3的細(xì)胞周期分布沒有顯著影響(P0.05),單獨使用奧沙利鉑使SKOV3細(xì)胞G0/G1期的分布比例降低(P0.05),兩藥聯(lián)合使用時,SKOV3細(xì)胞G0/G1期的分布比例降低(P0.01);相比于曲妥珠單抗組,聯(lián)合處理組SKOV3細(xì)胞G0/G1期的分布比例降低(P0.01):相比于奧沙利鉑組,聯(lián)合處理組SKOV3細(xì)胞G0/G1期的分布比例降低(P0.05)。(2)相比于對照組,曲妥珠單抗組、奧沙利鉑組SKOV3細(xì)胞的S期分布比例增高(P0.05),聯(lián)合處理組SKOV3細(xì)胞的S期分布比例顯著增高(P0.05);相比于曲妥珠單抗組,聯(lián)合處理組SKOV3細(xì)胞的S期分布比例增高(P0.05);相比于奧沙利鉑組,聯(lián)合處理組SKOV3細(xì)胞的S期分布比例增高(P0.05)。(3)相比于對照組,曲妥珠單抗組、奧沙利鉑組SKOV3細(xì)胞的G2/M期分布比例增高(P0.05),聯(lián)合處理組SKOV3細(xì)胞的G2/M期分布比例顯著增高(P0.05);相比于曲妥珠單抗組,聯(lián)合處理組SKOV3細(xì)胞的G2/M期分布比例增高(P0.05);相比于奧沙利鉑組,聯(lián)合處理組SKOV3細(xì)胞的S期分布比例增高(P0.05)。3.免疫印跡法檢測結(jié)果顯示:(1)p-AKT表達:相比于對照組,曲妥珠單抗組表達減弱(P0.05),奧沙利鉑組表達減弱(P0.05),聯(lián)合處理組表達明顯減弱(P0.01);相比于曲妥珠單抗組,聯(lián)合處理組表達減弱(P0.01);相比于奧沙利鉑組,聯(lián)合處理組表達減弱(P0.05)。(2)p-ERK表達:相比于對照組,曲妥珠單抗組表達減弱(P0.05),奧沙利鉑組表達減弱(P0.01),聯(lián)合處理組表達明顯減弱(P0.01);相比于曲妥珠單抗組,聯(lián)合處理組表達減弱(P0.01);相比于奧沙利鉑組,聯(lián)合處理組表達減弱(P0.05)。(3)Bcl-2表達:相比于對照組,曲妥珠單抗組表達減弱(P0.05),奧沙利鉑組表達減弱(P0.05),聯(lián)合處理組表達減弱(P0.05);相比于曲妥珠單抗組,聯(lián)合處理組表達減弱(P0.05):相比于奧沙利鉑組,聯(lián)合處理組表達減弱(P0.05)。(4)Bax表達:相比于對照組,曲妥珠單抗組表達減弱(P0.05),奧沙利鉑組表達增強(P0.05),聯(lián)合處理組表達增強(P0.05);相比于曲妥珠單抗組,聯(lián)合處理組表達增強(P0.05);相比于奧沙利鉑組,聯(lián)合處理組表達增強(P0.05)。結(jié)論:1.曲妥珠單抗靶向結(jié)合HER2蛋白,奧沙利鉑通過抑制PI3K/AKT信號通路和Ras/Raff/MEK/ERK信號通路,影響細(xì)胞周期分布,抑制卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖。2.曲妥珠單抗聯(lián)合奧沙利鉑應(yīng)用于治療HER2陽性卵巢癌具有協(xié)同作用。
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R737.31
【圖文】：

常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)，包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代、細(xì)胞凍存等方法，培養(yǎng)過程中細(xì)逡逑胞生長狀態(tài)良好，培養(yǎng)液澄清，無渾濁。ＳＫ０Ｖ３細(xì)胞懸浮狀態(tài)下，呈亮圓形，逡逑進而呈貼壁生長，形狀為長梭形。見圖１。逡逑圖１邋ＳＫＯＶ３細(xì)胞顯微鏡下形態(tài)觀察逡逑注：Ａ．細(xì)胞傳代第Ｉｄ邋Ｂ．細(xì)胞傳代第３ｄ邋Ｃ．細(xì)胞懸浮狀態(tài)逡逑１７逡逑

（Ｐ＜０．０５）；相比于曲妥珠單抗組，聯(lián)合處理組ＳＫＯＶ３細(xì)胞的Ｇ２／Ｍ期分布比例逡逑增高（Ｐ＞０．０５）；相比于奧沙利鉑組，聯(lián)合處理組ＳＫＯＶ３細(xì)胞的Ｓ期分布比例增逡逑高（？＞０．０５）。見圖３－５。逡逑１９逡逑

【參考文獻】

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本文編號：2722905