【摘要】：目的評(píng)估子癇前期患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)數(shù)量,探討子癇前期中microRNA-210(miR-210)、叉頭樣轉(zhuǎn)錄因子p3(Foxp3)基因表達(dá)水平,進(jìn)而揭示miR-210與Foxp3在子癇前期中的調(diào)控機(jī)制。方法采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)子癇前期29例、正常孕婦27例及健康非妊娠婦女20例血清細(xì)胞因子(IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β1)的表達(dá)水平。采用流式細(xì)胞術(shù)分析外周血CD4~+CD25~+CD127low/-細(xì)胞。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)方法檢測(cè)子癇前期患者和正常孕婦胎盤(pán)組織中Foxp3和維甲酸相關(guān)孤兒受體C(RORc)、miR-210的表達(dá)水平。蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)胎盤(pán)中Foxp3蛋白的表達(dá)。結(jié)果⑴子癇前期患者血清IL-6、IL-17和TGF-β1濃度較正常孕婦明顯升高,Treg細(xì)胞因子IL-10水平低于正常孕婦(P 0. 05)。⑵子癇前期患者外周血CD4~+CD25~+CD127-/CD4~+T細(xì)胞百分率明顯低于正常妊娠組及健康非妊娠婦女(P 0. 001)。⑶子癇前期患者胎盤(pán)組織中表現(xiàn)為Foxp3 mRNA水平明顯低于正常孕婦,子癇前期患者的RORc mRNA水平明顯高于正常孕婦,miRNA-210在子癇前期患者組的表達(dá)增強(qiáng)(P 0. 01)。⑷子癇前期患者胎盤(pán)組織Foxp3蛋白表達(dá)降低(P 0. 05)。結(jié)論子癇前期患者存在Treg細(xì)胞數(shù)量減少和Treg/Th17失衡,這些變化破壞母體對(duì)胎兒的免疫耐受。在子癇前期患者胎盤(pán)組織中Foxp3表達(dá)水平明顯降低,且Foxp3的表達(dá)與miR-210的表達(dá)水平有關(guān)。
【圖文】：

圖1健康非妊娠婦女、正常妊娠婦女和子癇前期患者血漿中的細(xì)胞因子濃度比較A:IL-6;B:IL-17;C:TGF-β1;D:IL-10;與正常妊娠組比較，aP＜0.05，bP＜0.01常孕婦無(wú)胎兒生長(zhǎng)受限，41.4%的子癇前期孕婦有胎兒生長(zhǎng)受限，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，12例孕婦(41.4%)合并重度子癇前期，11例(37.9%)發(fā)生早產(chǎn)兒(＜37周)。見(jiàn)表1。2．2子癇前期患者血漿中細(xì)胞因子的表達(dá)變化子癇前期患者血漿中細(xì)胞因子IL-6、IL-17和TGF-β1水平高于正常孕婦(P=0.0021、P=0.015、P=0.019)，Treg細(xì)胞因子IL-10水平明顯低于正常孕婦(P=0.0012)。見(jiàn)圖1。2．3外周血CD4+CD25+CD127－/CD4+的水平子癇前期患者外周血CD4+CD25+CD127－/CD4+T細(xì)胞百分率明顯低于正常妊娠組［(6.34±0.28)%vs(9.10±0.28)%，，P＜0.001］和健康非妊娠組圖2子癇前期患者、正常妊娠和健康非妊娠婦女外周血CD4+CD25+CD127－細(xì)胞和CD4+CD25+T細(xì)胞的百分比A:代表流式細(xì)胞儀分析CD4+CD25+CD127－/CD4+T細(xì)胞人群的結(jié)果;B:CD4+CD25+T細(xì)胞在CD4+T細(xì)胞中所占的相對(duì)比率，與子癇前期組比較，aP＜0.01［(6.34±0.28)%vs(8.74±0.37)%，P＜0.001］。健康非妊娠組和正常妊娠組CD4+CD25+CD127－/CD4+T細(xì)胞比例相似(P＞0.05)。正常妊娠組CD4+CD25+T細(xì)胞相對(duì)水平明顯高于健康非妊娠婦女［(46.27±1.11)%vs(42.71±0.72)%，P＜0.001］。然而，與正常孕婦、健康非妊娠婦女相比，子癇前期患者CD4+CD25+T/CD4+細(xì)胞比例明顯減少(P＜0

鍇捌冢?11例(37.9%)發(fā)生早產(chǎn)兒(＜37周)。見(jiàn)表1。2．2子癇前期患者血漿中細(xì)胞因子的表達(dá)變化子癇前期患者血漿中細(xì)胞因子IL-6、IL-17和TGF-β1水平高于正常孕婦(P=0.0021、P=0.015、P=0.019)，Treg細(xì)胞因子IL-10水平明顯低于正常孕婦(P=0.0012)。見(jiàn)圖1。2．3外周血CD4+CD25+CD127－/CD4+的水平子癇前期患者外周血CD4+CD25+CD127－/CD4+T細(xì)胞百分率明顯低于正常妊娠組［(6.34±0.28)%vs(9.10±0.28)%，P＜0.001］和健康非妊娠組圖2子癇前期患者、正常妊娠和健康非妊娠婦女外周血CD4+CD25+CD127－細(xì)胞和CD4+CD25+T細(xì)胞的百分比A:代表流式細(xì)胞儀分析CD4+CD25+CD127－/CD4+T細(xì)胞人群的結(jié)果;B:CD4+CD25+T細(xì)胞在CD4+T細(xì)胞中所占的相對(duì)比率，與子癇前期組比較，aP＜0.01［(6.34±0.28)%vs(8.74±0.37)%，P＜0.001］。健康非妊娠組和正常妊娠組CD4+CD25+CD127－/CD4+T細(xì)胞比例相似(P＞0.05)。正常妊娠組CD4+CD25+T細(xì)胞相對(duì)水平明顯高于健康非妊娠婦女［(46.27±1.11)%vs(42.71±0.72)%，P＜0.001］。然而，與正常孕婦、健康非妊娠婦女相比，子癇前期患者CD4+CD25+T/CD4+細(xì)胞比例明顯減少(P＜0.001)。見(jiàn)圖2。2．4子癇前期患者和正常孕婦胎盤(pán)組織中Treg/Th17細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子mＲNA的表達(dá)水平子癇前期患者的Foxp3mＲNA水平明顯低于正常孕婦(0.713±0.088vs1.105±0.136，P=0.019)。子癇前期患者的ＲOＲcmＲNA水平明顯高于正常孕婦(0.599±0.069vs0.380±0.046，P=0.0127)。與正常

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