發(fā)布時(shí)間：2020-05-20 05:08

【摘要】：目的:本實(shí)驗(yàn)探討miR-16在宮頸癌Hela細(xì)胞中表達(dá)及順鉑敏感性的關(guān)系。方法:脂質(zhì)體lipofectamine2000介導(dǎo)miR-16成熟體模擬物(mimics)及陰性對(duì)照片段(NC)分別轉(zhuǎn)染宮頸癌Hela細(xì)胞。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各組細(xì)胞中miR-16的表達(dá);四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)細(xì)胞的順鉑細(xì)胞存活率;蛋白印跡法檢測(cè)細(xì)胞中Bcl-2蛋白、Bax蛋白、caspase-3蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1.qRT-PCR結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染miR-16在Hela細(xì)胞中高表達(dá)。2.MTT結(jié)果表明miR-16表達(dá)能明顯增加Hela細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性。3.Western blot結(jié)果提示,與對(duì)照組比較,miR-16的Hela細(xì)胞中Bcl-2表達(dá)水平下降,Bax、caspases-3表達(dá)水平升高。結(jié)論:MiR-16增強(qiáng)宮頸癌Hela細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性,miR-16可能靶向下調(diào)宮頸癌Hela細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá),并協(xié)同上調(diào)Bax、caspase-3蛋白的表達(dá),從而為宮頸癌的治療提供新靶點(diǎn)。
【圖文】：

第四章 結(jié) 果iR-16在宮頸癌Hela細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后表達(dá)了觀察miR-16在宮頸癌Hela細(xì)胞中表達(dá)，，本實(shí)驗(yàn)采用實(shí)時(shí)qRT-組為：空白對(duì)照組（Hela細(xì)胞組）、溶劑對(duì)照組（Lip2000+HelamiR-16 NC+Hela細(xì)胞）、miR-16過表達(dá)組（miR-16 mimics+Hel、B、C、D四組，觀察其表達(dá)差異。結(jié)果顯示：與A組相比，D明顯升高，為A組的2倍，有顯著性差異((p<0．01，n=4)，而與A表達(dá)量未見明顯差異，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0．05，n=4)。實(shí)iR-16轉(zhuǎn)染后在Hela細(xì)胞中表達(dá)明顯高于空白對(duì)照組。(如圖4.1.1所

分為空白對(duì)照組（Hela細(xì)胞組）、溶劑對(duì)照組（Lip2000+Hela載組（miR-16 NC+Hela細(xì)胞）、miR-16過表達(dá)組（miR-16 mimics+Hel經(jīng)不同濃度的順鉑處理，順鉑的濃度為：0、0．5、1、2、4umol/l，分別48h后。結(jié)果顯示：D組分別與A、B、C組比較，細(xì)胞活性值明顯降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ p<0.05，n =4），與A組相比，B、C組細(xì)胞活性無明顯異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05，n =4）。由此可知，miR-16+Hela/DDP細(xì)胞活性值明顯降低，提示轉(zhuǎn)染miR-16后的Hela細(xì)胞對(duì)順鉑敏感性明顯提高度的增高，轉(zhuǎn)染miR-16后的Hela細(xì)胞活性下降，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，轉(zhuǎn)染miHela細(xì)胞活性也下降。（如圖4.2.1、4.2.2所示）
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R737.33

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