【摘要】：目的:1.檢測過表達質粒組、空白質粒組、未處理組宮頸癌細胞株SiHa的RACK1、RhoA的表達量,并探討兩者之間的相關性;2.檢測不同濃度梯度的RhoA激酶抑制劑處理過表達質粒組、空白質粒組、未處理組宮頸癌細胞株SiHa后RhoA的表達量,并測定其侵襲能力。方法:1.培養(yǎng)SiHa細胞,通過脂質介導,一組轉染過表達質粒,一組轉染空白質粒,另外一組無任何處理,Real-time qPCR和Western blot兩種方法檢測三組Si Ha中的RACK1、RhoA的表達量;2.檢測不同濃度梯度的RhoA激酶抑制劑處理三組后RhoA的表達量,用transwell小室檢測三組侵襲能力是否有變化;3.采用SPSS 16.0軟件分析,所有數據均采用均數±標準差(`x±s)形式表示,P0.05為存在統計學意義。結果:1.PCR檢測過表達質粒組中RACK1和RhoA的表達量分別為1.25±0.59、1.36±0.04,Western blot檢測過表達質粒組中RACK1和RhoA的表達量分別為0.94±0.08、0.52±0.07,均高于其它兩組,空白質粒組與未處理組的RACK1、RhoA的表達量之間無顯著性差異。Pearson積差相關系數分析,RACK1、RhoA兩者正相關,且相關系數r:0.929、0.601。2.不同濃度梯度的Y-27632抑制三組中RhoA激酶,隨著抑制劑濃度的增加,RhoA的表達量及侵襲能力降低。結論:1.在宮頸癌SiHa細胞中成功轉染過表達質粒,同時獲得穩(wěn)定過表達RACK1的宮頸癌SiHa細胞;2.過表達RACK1通過RhoA激酶對宮頸癌細胞株SiHa侵襲能力有影響。
【圖文】：

*與過表達質粒組相比，P＜0.05圖-1 三組中 RACK1、RhoAmRNA 的相對表達量（2）三組中 RACK1、RhoA 蛋白的表達量Western Blot 檢測三組中 RACK1 和 RhoA 蛋白相對含量。采用單因素方差分析（SNK）法對 3 組整體的差異進行統計分析，結果顯示：3 組 RACK1 和 RhoA 蛋白的相對含量的差異具有統計學意義（P＜0.05）。組內差異采用單因素方差分析（LSD 法）進行統計分析，結果顯示：過表達質粒組 RACK1 和 RhoA 蛋白的相對含量高于其他 2 組，差異具有統計學意義（P＜0.05）；但空白質粒組與未處理組的 RACK1 和 RhoA 蛋白的相對含量之間無顯著性差異。（表 8、圖-2）表-10 三組中 RACK1、RhoA 蛋白的相對含量組別 RACK1 蛋白 RhoA 蛋白過表達質粒組0.94±0.08 0.82±0.07空白質粒組0.74±0.07*0.42±0.07*未處理組0.72±0.09*0.39±0.05*F 值62.848 32.460P 值0.000 0.000*與過表達質粒組相比，P＜0.05

*與過表達質粒組相比，P＜0.05圖-2 三組中 RACK1、RhoA 蛋白的相對含量（3）三組中 RACK1、RhoA 的兩者之間的相關性分析RT-PCR 測出 RACK1、RhoA 的 mRNA 的相對表達量，，經過 Pearson 直線相關系數分析，兩者的表達具有正相關性，相關系數 r 為 0.929，P＜0.05（圖-3A）。Western blot 測出 RACK1、RhoA 蛋白的相對含量，經過 Pearson 直線相關系數分析，兩者的表達具有正相關性，相關系數 r 為 0.601，P＜0.05（圖-3B）。圖-3 RACK1、RhoA 兩者之間相關性分析
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R737.33

【參考文獻】

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1 顧穎;韓素萍;張曄;;RhoA、RAC1在宮頸癌組織中的表達及其臨床意義[J];蘇州大學學報(醫(yī)學版);2008年01期

本文編號：2652905