【摘要】：目的:1.檢測(cè)過表達(dá)質(zhì)粒組、空白質(zhì)粒組、未處理組宮頸癌細(xì)胞株SiHa的RACK1、RhoA的表達(dá)量,并探討兩者之間的相關(guān)性;2.檢測(cè)不同濃度梯度的RhoA激酶抑制劑處理過表達(dá)質(zhì)粒組、空白質(zhì)粒組、未處理組宮頸癌細(xì)胞株SiHa后RhoA的表達(dá)量,并測(cè)定其侵襲能力。方法:1.培養(yǎng)SiHa細(xì)胞,通過脂質(zhì)介導(dǎo),一組轉(zhuǎn)染過表達(dá)質(zhì)粒,一組轉(zhuǎn)染空白質(zhì)粒,另外一組無任何處理,Real-time qPCR和Western blot兩種方法檢測(cè)三組Si Ha中的RACK1、RhoA的表達(dá)量;2.檢測(cè)不同濃度梯度的RhoA激酶抑制劑處理三組后RhoA的表達(dá)量,用transwell小室檢測(cè)三組侵襲能力是否有變化;3.采用SPSS 16.0軟件分析,所有數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(`x±s)形式表示,P0.05為存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.PCR檢測(cè)過表達(dá)質(zhì)粒組中RACK1和RhoA的表達(dá)量分別為1.25±0.59、1.36±0.04,Western blot檢測(cè)過表達(dá)質(zhì)粒組中RACK1和RhoA的表達(dá)量分別為0.94±0.08、0.52±0.07,均高于其它兩組,空白質(zhì)粒組與未處理組的RACK1、RhoA的表達(dá)量之間無顯著性差異。Pearson積差相關(guān)系數(shù)分析,RACK1、RhoA兩者正相關(guān),且相關(guān)系數(shù)r:0.929、0.601。2.不同濃度梯度的Y-27632抑制三組中RhoA激酶,隨著抑制劑濃度的增加,RhoA的表達(dá)量及侵襲能力降低。結(jié)論:1.在宮頸癌SiHa細(xì)胞中成功轉(zhuǎn)染過表達(dá)質(zhì)粒,同時(shí)獲得穩(wěn)定過表達(dá)RACK1的宮頸癌SiHa細(xì)胞;2.過表達(dá)RACK1通過RhoA激酶對(duì)宮頸癌細(xì)胞株SiHa侵襲能力有影響。
【圖文】：

*與過表達(dá)質(zhì)粒組相比，P＜0.05圖-1 三組中 RACK1、RhoAmRNA 的相對(duì)表達(dá)量（2）三組中 RACK1、RhoA 蛋白的表達(dá)量Western Blot 檢測(cè)三組中 RACK1 和 RhoA 蛋白相對(duì)含量。采用單因素方差分析（SNK）法對(duì) 3 組整體的差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示：3 組 RACK1 和 RhoA 蛋白的相對(duì)含量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。組內(nèi)差異采用單因素方差分析（LSD 法）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示：過表達(dá)質(zhì)粒組 RACK1 和 RhoA 蛋白的相對(duì)含量高于其他 2 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；但空白質(zhì)粒組與未處理組的 RACK1 和 RhoA 蛋白的相對(duì)含量之間無顯著性差異。（表 8、圖-2）表-10 三組中 RACK1、RhoA 蛋白的相對(duì)含量組別 RACK1 蛋白 RhoA 蛋白過表達(dá)質(zhì)粒組0.94±0.08 0.82±0.07空白質(zhì)粒組0.74±0.07*0.42±0.07*未處理組0.72±0.09*0.39±0.05*F 值62.848 32.460P 值0.000 0.000*與過表達(dá)質(zhì)粒組相比，P＜0.05

*與過表達(dá)質(zhì)粒組相比，P＜0.05圖-2 三組中 RACK1、RhoA 蛋白的相對(duì)含量（3）三組中 RACK1、RhoA 的兩者之間的相關(guān)性分析RT-PCR 測(cè)出 RACK1、RhoA 的 mRNA 的相對(duì)表達(dá)量，，經(jīng)過 Pearson 直線相關(guān)系數(shù)分析，兩者的表達(dá)具有正相關(guān)性，相關(guān)系數(shù) r 為 0.929，P＜0.05（圖-3A）。Western blot 測(cè)出 RACK1、RhoA 蛋白的相對(duì)含量，經(jīng)過 Pearson 直線相關(guān)系數(shù)分析，兩者的表達(dá)具有正相關(guān)性，相關(guān)系數(shù) r 為 0.601，P＜0.05（圖-3B）。圖-3 RACK1、RhoA 兩者之間相關(guān)性分析
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R737.33

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 顧穎;韓素萍;張曄;;RhoA、RAC1在宮頸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年01期

本文編號(hào)：2652905