本文關(guān)鍵詞：三種方法應(yīng)用于人卵巢組織玻璃化冷凍的效果分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:卵巢組織冷凍作為女性生育力保存的一種方法,具有廣闊的應(yīng)用及發(fā)展前景。目前卵巢組織冷凍仍是一項(xiàng)試驗(yàn)性技術(shù),標(biāo)準(zhǔn)化的冷凍方案尚未確定。本研究初步比較三種不同的冷凍方法對(duì)人卵巢皮質(zhì)組織玻璃化冷凍效果的影響,旨在探討人卵巢皮質(zhì)組織玻璃化冷凍的可行方案。材料與方法:收集2014.3~2014.9因卵巢良性囊腫于天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院實(shí)施手術(shù)的40例患者的卵巢皮質(zhì)塊作為實(shí)驗(yàn)材料。術(shù)中切除的卵巢組織放入裝有磷酸鹽緩沖液的離心管中,置于冰上半小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。將卵巢皮質(zhì)切割成大小為5×1×1mm3的組織塊,每位患者的卵巢組織塊隨機(jī)平均分為四組:一組作為新鮮對(duì)照組,剩余三組作為實(shí)驗(yàn)組行玻璃化冷凍。本實(shí)驗(yàn)中聯(lián)合使用低濃度的乙二醇和二甲基亞砜作為玻璃化冷凍保護(hù)劑,實(shí)驗(yàn)組分別行微滴法玻璃化冷凍、凍存管法玻璃化冷凍、尼龍篩網(wǎng)法玻璃化冷凍,放入液氮保存一周后解凍復(fù)蘇。觀察并計(jì)數(shù)新鮮組和實(shí)驗(yàn)組卵巢組織內(nèi)各級(jí)卵泡數(shù)、計(jì)算始基卵泡的正常形態(tài)率,通過(guò)TUNEL法檢測(cè)卵巢組織細(xì)胞凋亡情況,通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況,比較并分析四組數(shù)據(jù)。結(jié)果:1.卵巢組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)結(jié)果:微滴法組、尼龍篩網(wǎng)法組與新鮮組相比,總卵泡數(shù)及始基卵泡所占比例無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),凍存管法組的總卵泡數(shù)及始基卵泡所占比例明顯少于新鮮組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。新鮮組始基卵泡正常形態(tài)率明顯高于三個(gè)實(shí)驗(yàn)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(c2=6.956,P=0.008;c2=27.038,P=0.000;c2=10.963,P=0.001),微滴法組、尼龍篩網(wǎng)法組始基卵泡正常形態(tài)率高于凍存管法組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(c2=8.444,P=0.004;c2=5.309,P=0.021),微滴法組與尼龍篩網(wǎng)法組始基卵泡正常形態(tài)率之間的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(c2=0.507,P=0.476)。光鏡下觀察可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組部分卵巢組織出現(xiàn)間質(zhì)水腫、間質(zhì)細(xì)胞連接疏松、顆粒細(xì)胞層與卵泡膜之間空隙增大。2.TUNEL檢測(cè)結(jié)果:四組卵巢組織中各級(jí)卵泡中卵母細(xì)胞及顆粒細(xì)胞中均未見(jiàn)凋亡細(xì)胞,而卵巢間質(zhì)細(xì)胞核內(nèi)可見(jiàn)凋亡細(xì)胞。3.免疫組化Ki67表達(dá)結(jié)果:微滴法組、尼龍篩網(wǎng)法組Ki67陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目與新鮮組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),凍存管法組Ki67陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目明顯低于新鮮組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05),微滴法組和尼龍篩網(wǎng)法組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:1.本課題為天津市衛(wèi)生局資助項(xiàng)目,首次全面系統(tǒng)地采用不同冷凍試劑配伍不同冷凍載體對(duì)人卵巢組織玻璃化冷凍的效果進(jìn)行觀察評(píng)價(jià)。本部分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容固定冷凍試劑不變,分析并討論三種冷凍載體應(yīng)用于人卵巢組織玻璃化冷凍的效果。2.從卵巢組織形態(tài)學(xué)、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞增殖三個(gè)方面判斷:微滴法及尼龍篩網(wǎng)法的玻璃化冷凍效果優(yōu)于凍存管法。3.新型冷凍載體尼龍篩網(wǎng)為人卵巢組織玻璃化冷凍提供了新的選擇。4.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明卵巢組織玻璃化冷凍是保存女性生育力的可行方法。本實(shí)驗(yàn)為臨床正式應(yīng)用卵巢組織冷凍提供了技術(shù)方面的準(zhǔn)備,同時(shí)為建立卵巢組織冷凍庫(kù)奠定基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：卵巢組織 玻璃化冷凍 冷凍載體 形態(tài)學(xué) 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R714.8
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語(yǔ)10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 對(duì)象和方法13-21
• 1.研究對(duì)象13
• 2.研究方法13-21
• 2.1 主要試劑13-14
• 2.2 主要設(shè)備及耗材14
• 2.3 主要溶液的配制14-15
• 2.4 卵巢組織的處理15
• 2.5 玻璃化冷凍15-16
• 2.6 解凍復(fù)蘇16
• 2.7 檢測(cè)項(xiàng)目16-18
• 2.8 結(jié)果判定18-20
• 2.9 統(tǒng)計(jì)分析20-21
• 結(jié)果21-26
• 1.卵巢組織形態(tài)學(xué)比較21-23
• 2.卵巢組織細(xì)胞凋亡情況比較23-24
• 3.卵巢組織Ki67表達(dá)比較24-26
• 討論26-34
• 1.影響卵巢組織玻璃化冷凍效果的因素26-29
• 2.卵巢組織冷凍方案的評(píng)價(jià)指標(biāo)29-31
• 3.卵巢組織冷凍復(fù)蘇后移植的應(yīng)用現(xiàn)狀31-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-42
• 發(fā)表論文和參加科研情況42-43
• 綜述43-54
• 綜述參考文獻(xiàn)49-54
• 致謝54

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 徐瑾;玉蘭花粉超低溫保存機(jī)制研究[D];北京林業(yè)大學(xué);2014年

2 李s，

本文編號(hào)：264098