THBS2對宮頸鱗癌SiHa細胞生物特性的影響
發(fā)布時間:2020-04-25 01:52
【摘要】:目的:探討血小板蛋白2(thrombospondin2,THBS2)在人宮頸鱗癌SiHa細胞中的表達水平及其細胞生物學功能。方法:構建NC及THBS2的慢病毒載體即NC-LV及THBS2-LV,分別感染SiHa細胞,Western blot及熒光定量PCR對比感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa細胞中THBS2的表達水平;采用CCK-8法、Transwell實驗和劃痕實驗對比感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa細胞增殖、遷移、侵襲能力的區(qū)別;流式細胞儀檢測感染NC-LV及THBS2-LV前后SiHa細胞的細胞周期及細胞凋亡情況。結果:感染THBS2-LV的SiHa細胞的THBS2表達增高;感染THBS2-LV后宮頸鱗癌SiHa細胞的增殖、侵襲、遷移能力均下降;感染THBS2-LV后宮頸鱗癌SiHa細胞凋亡增高。結論:THBS2抑制宮頸鱗癌SiHa細胞的增殖、侵襲與遷移,THBS2可能是宮頸鱗癌的一個抑癌基因,可作為該疾病的潛在治療靶點。
【圖文】:
細胞呈長梭形。如圖2-1:圖 2-1 顯微鏡下 SiHa 細胞的形態(tài)Figure 2-1 The morphology of SiHa cells under a microscope.(2)熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細胞的形態(tài),如圖 2-2:圖 2-2 熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細胞的形態(tài)Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening.2.2 Western Blot 檢測 SiHa 細胞中 THBS2 蛋白表達提取 NC 組、NC-LV 組、THBS2-LV 組每組細胞的總蛋白,THBS2 用鼠抗人抗體、內(nèi)參 GAPDH 用鼠抗人抗體作為一抗的抗體進行 Western Blot實驗。結果如圖所示。在 SiHa 細胞中過表達 THBS2 組(即 THBS2-LV 組)中,其灰度值明顯高于 NC 組以及 NC-LV 組,通過 SPSS 17.0 統(tǒng)計得出p<0.001,由此證明:SiHa 細胞過表達 THBS2 成功。200×200×
40圖 2-2 熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細胞的形態(tài)Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening..2 Western Blot 檢測 SiHa 細胞中 THBS2 蛋白表達提取 NC 組、NC-LV 組、THBS2-LV 組每組細胞的總蛋白,THBS抗人抗體、內(nèi)參 GAPDH 用鼠抗人抗體作為一抗的抗體進行 Western 驗。結果如圖所示。在 SiHa 細胞中過表達 THBS2 組(即 THBS2-LV,其灰度值明顯高于 NC 組以及 NC-LV 組,通過 SPSS 17.0 統(tǒng)計得0.001,由此證明:SiHa 細胞過表達 THBS2 成功。
【學位授予單位】:廣西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R737.33
【圖文】:
細胞呈長梭形。如圖2-1:圖 2-1 顯微鏡下 SiHa 細胞的形態(tài)Figure 2-1 The morphology of SiHa cells under a microscope.(2)熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細胞的形態(tài),如圖 2-2:圖 2-2 熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細胞的形態(tài)Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening.2.2 Western Blot 檢測 SiHa 細胞中 THBS2 蛋白表達提取 NC 組、NC-LV 組、THBS2-LV 組每組細胞的總蛋白,THBS2 用鼠抗人抗體、內(nèi)參 GAPDH 用鼠抗人抗體作為一抗的抗體進行 Western Blot實驗。結果如圖所示。在 SiHa 細胞中過表達 THBS2 組(即 THBS2-LV 組)中,其灰度值明顯高于 NC 組以及 NC-LV 組,通過 SPSS 17.0 統(tǒng)計得出p<0.001,由此證明:SiHa 細胞過表達 THBS2 成功。200×200×
40圖 2-2 熒光顯微鏡下經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的 SiHa 細胞的形態(tài)Figure 2-2 The morphology of the SiHa cells after puromycin screening..2 Western Blot 檢測 SiHa 細胞中 THBS2 蛋白表達提取 NC 組、NC-LV 組、THBS2-LV 組每組細胞的總蛋白,THBS抗人抗體、內(nèi)參 GAPDH 用鼠抗人抗體作為一抗的抗體進行 Western 驗。結果如圖所示。在 SiHa 細胞中過表達 THBS2 組(即 THBS2-LV,其灰度值明顯高于 NC 組以及 NC-LV 組,通過 SPSS 17.0 統(tǒng)計得0.001,由此證明:SiHa 細胞過表達 THBS2 成功。
【學位授予單位】:廣西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R737.33
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