【摘要】：研究目的:建立一種可以同時檢測13種高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)的多重實時熒光PCR方法,為進一步開發(fā)新的宮頸癌臨床篩查檢測試劑盒提供可能。研究方法:選擇高危型HPV的非L1區(qū)域(如E6、E7、E1區(qū)域)和全基因組相對保守區(qū)基因序列作為靶序列,采用Primer Express 3.0軟件設(shè)計特異性的引物和探針,建立和優(yōu)化該檢測方法。通過評價其準(zhǔn)確性、靈敏度和特異性,建立一種多重實時熒光PCR方法。研究結(jié)果:用HPV全基因組分型參考品進行檢測,該試劑盒具有較好的準(zhǔn)確性、靈敏度和特異性;檢測靈敏度約為500拷貝/ml;用不同菌株進行測試時,沒有HPV特異性擴增信號出現(xiàn);用臨床樣本檢測時,檢測結(jié)果陽性符合率為96.43%,陰性符合率為100%,總符合率為97.22%。研究結(jié)論:建立的多重實時熒光PCR方法具有較好的準(zhǔn)確性、特異性,具有較低的檢測限和較好的檢測性能,可用于臨床宮頸癌的篩查。
【圖文】：

由圖 5 可知，11 株標(biāo)準(zhǔn)品菌株靶基因及 IC 均無擴增，，陽性對照擴增正常，本研究方法中建立的反應(yīng)體系與這 11 種標(biāo)準(zhǔn)品菌株均無交叉反應(yīng)，特異性符合要4. 多重實時熒光 PCR 方法的靈敏度

c—100 拷貝體系陽性檢出率：每種參考品均稀釋三個濃度，每個濃度均檢測 24 次圖 6 三個不同濃度水平待測物的陽性檢出率驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計結(jié)果，本研究方法中的 13 中高、51、52、56、58、59、68 在 500 拷貝
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.33

【參考文獻】

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本文編號：2639407