【摘要】：目的:本研究在組織水平上分別檢測在高級別漿液性卵巢癌及正常卵巢組織中LIM激酶2(LIMK2)的表達(dá),在CAOV3及OVCAR-3卵巢癌細(xì)胞系中,應(yīng)用siRNA下調(diào)LIMK2基因表達(dá)后,觀察細(xì)胞生物學(xué)行為的變化,進(jìn)而探討LIMK2在高級別漿液性卵巢癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。方法:利用免疫組織化學(xué)法、蛋白免疫印跡(Western Blot)方法檢測在41例高級別漿液性卵巢癌及30例正常卵巢組織中LIMK2的蛋白表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCT)方法檢測LIMK2 mRNA的表達(dá),并分析其表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。在細(xì)胞水平分別構(gòu)建觀察組LIMK2-siRNA,陰性對照組N-siRNA及空白對照組。應(yīng)用RT-PCR、Western Blot方法檢測轉(zhuǎn)染效率,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞遷移能力的變化,MTT方法檢測細(xì)胞增殖能力改變,Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞侵襲能力改變,流式細(xì)胞學(xué)檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果:(1)LIMK2在高級別漿液性卵巢癌表達(dá)較正常卵巢組織表達(dá)明顯增高。(2)LIMK2表達(dá)與FIGO分期、血清CA125水平相關(guān)(P0.05),與年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小及腹水量無明顯差異(P0.05)。(3)在細(xì)胞水平研究發(fā)現(xiàn),與陰性對照組N-siRNA及空白對照組相比,觀察組LIMK2-siRNA組細(xì)胞遷移、侵襲能力明顯降低(P0.05),細(xì)胞增殖及凋亡能力與對照組及空白對照組無明顯差異(P0.05)。結(jié)論:LIMK2可以促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的遷移及侵襲能力,可能成為卵巢癌治療的新靶點(diǎn)。
【圖文】：

3 結(jié)果3.1 免疫組化檢測 LIMK2 蛋白在不同卵巢組織中的表達(dá)LIMK2 蛋白表達(dá)產(chǎn)物主要定位于細(xì)胞漿，在高級別漿液性卵巢癌組織中 LIMK2陽性表達(dá)率（75.6%）明顯高于正常卵巢組織（13.3%），兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＜0.05），，見表 1、圖 1。表 1：LIMK2 在高級別漿液性卵巢癌及正常卵巢組織中的表達(dá)roup n - + ++ +++ Positive Rate(%) Pmal 30 26 3 1 0 4 13.3%<0.cer 41 9 4 10 18 31 75.6%

2：高級別漿液性卵巢癌(HGSOC)和正常卵巢(N)組織中的 LIMK2 mRNA rn blot 檢測 LIMK2 蛋白在不同卵巢組織中的表達(dá) blot 結(jié)果顯示，高級別漿液性卵巢癌中 LIMK2 蛋白表達(dá)較正明顯增高（P<0.05），見圖 3。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.31

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2637628