【摘要】：目的:研究Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1(Keap1)-核轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子(Nrf2)信號通路對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移及耐藥的影響。方法:選擇代表I型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的KLE細(xì)胞株和代表II型子宮內(nèi)膜癌的ARK2細(xì)胞株,采用real-time PCR和Western blot法測定兩細(xì)胞株Keap1和Nrf2基因m RNA、蛋白表達(dá),MTT法檢測兩細(xì)胞株對順鉑耐藥性。對Keap1表達(dá)更低、耐藥性更強(qiáng)的ARK2細(xì)胞株的Keap1基因過表達(dá)。Real-time PCR、Western blot、平板克隆實驗、MTT法、Transwell遷徙、侵襲實驗等方法研究ARK2細(xì)胞中Keap1過表達(dá)對Nrf2及下游靶基因表達(dá)、細(xì)胞生長、侵襲、耐藥的影響。結(jié)果:在ARK2和KLE細(xì)胞中Nrf2基因m RNA表達(dá)無明顯差異,ARK2細(xì)胞中Keap1基因表達(dá)無論是m RNA還是蛋白水平在的表達(dá)均要低于KLE細(xì)胞株,而Nrf2蛋白水平的表達(dá)在ARK2細(xì)胞株中則要明顯高于KLE細(xì)胞株。Keap1表達(dá)較低的ARK2細(xì)胞較Keap1高表達(dá)的KLE細(xì)胞耐藥性更高。ARK2細(xì)胞株中Keap1過表達(dá)能夠明顯下調(diào)Nrf2蛋白及下游基因ABCC2、γ-GCS表達(dá);MTT實驗和平板克隆實驗表明Keap1過表達(dá)能夠降低ARK2細(xì)胞增殖能力;Keap1過表達(dá)能夠降低ARK2細(xì)胞遷徙和侵襲能力;Keap1過表達(dá)能夠顯著提高ARK2細(xì)胞對順鉑的敏感性。結(jié)論:Keap-Nrf2信號通路在子宮內(nèi)膜漿液性癌細(xì)胞株ARK2中活化程度顯著高于子宮內(nèi)膜樣癌細(xì)胞株KLE,Keap1對Nrf2蛋白表達(dá)調(diào)控是基于轉(zhuǎn)錄后的,且低表達(dá)的Keap1及高表達(dá)的Nrf2蛋白和腫瘤細(xì)胞的高耐藥性有關(guān)。在子宮內(nèi)膜漿液性癌細(xì)胞株ARK2中上調(diào)Keap1基因表達(dá)能夠有效的下調(diào)Nrf2蛋白及其下游基因的表達(dá),并降低腫瘤細(xì)胞的生長、遷徙、侵襲能力,且能提高腫瘤細(xì)胞對順鉑的敏感性。
【圖文】：

現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展www.biomed.cnjournals.comProgressinModernBiomedicineVol.19NO.1JAN.2019圖6MTT法比較ARK2和ARK2-K細(xì)胞在不同濃度順鉑作用48小時后的細(xì)胞存活率比較Fig.6ARK2andARK2-Kcellsweretreatedwiththeindicateddosesofcisplatinlfor48h.CellviabilitywasdeterminedbyMTTassay.注：*表示P<0.05.Note:*meansP<0.05.圖5Transwell法比較ARK2和ARK2-K細(xì)胞遷徙和侵襲能力注：ARK2細(xì)胞（A）和ARK2-K細(xì)胞（B）遷徙能力比較；ARK2細(xì)胞（C）和ARK2-K細(xì)胞（D）侵襲能力比較。Fig.5ThemigrationandinvasionofARK2andARK2-KcellswerecomparedbyTranswellmethodNote:ThemigrationabilityofARK2cells(A)andARK2-Kcells;(B)werecompared;andtheinvasionabilitiesofARK2cells;(C)andARK2-Kcells;(D)werecompared.但Nrf2mRNA表達(dá)在ARK2和KLE細(xì)胞中無明顯差別，而Keap1表達(dá)無論是mRNA還是蛋白表達(dá)在ARK2細(xì)胞中的表達(dá)均要低于KLE細(xì)胞株，說明在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中，Keap1對Nrf2的調(diào)控是基于轉(zhuǎn)錄后的。之前的研究表明Nrf2和腫瘤的增殖、遷徙、侵襲密切相關(guān)。腫瘤細(xì)胞的上皮間質(zhì)化和增殖及侵襲密切相關(guān)，出現(xiàn)上皮間質(zhì)化的腫瘤細(xì)胞中N-cadherin的過表達(dá)能夠增加Nrf2的活性[24]。在食管癌細(xì)胞中抑制Nrf2的表達(dá)后MMP2等侵襲相關(guān)基因的表達(dá)明顯降低，并且能夠上調(diào)E-cadherin的表達(dá)，使得腫瘤細(xì)胞的生長、侵襲能力明顯降低[25]。在本研究中我們在在子宮內(nèi)膜漿液性癌來源的細(xì)胞株ARK2中上調(diào)Keap1表達(dá)，能夠顯著的降低ARK2細(xì)胞中Nrf2蛋白及其下游耐藥相關(guān)基因ABCC2、γ-GCS的

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9 辛廖冰;范盈盈;;絕經(jīng)后子宮內(nèi)膜增厚的臨床與病理分析[A];2012年浙江省婦產(chǎn)科學(xué)及圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會暨《婦產(chǎn)科常見疾病規(guī)范化治療新進(jìn)展》及《圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)熱點追蹤》學(xué)習(xí)班論文集[C];2012年

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3 云華;隨月經(jīng)而來的肺部疾病[N];中國中醫(yī)藥報;2000年

4 韋立功 　 覃江萍;微波子宮內(nèi)膜消除術(shù)治療月經(jīng)過多[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

5 吳國隆;蹊蹺的子宮內(nèi)膜異位癥[N];科技日報;2002年

6 上海市浦東新區(qū)公利醫(yī)院 中醫(yī)科 吳昆倉 主任醫(yī)師;子宮內(nèi)膜增厚的形成與控制[N];上海中醫(yī)藥報;2008年

7 趙藍(lán)韻;“長腿”的子宮內(nèi)膜[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

8 記者顏秋雨 通訊員肖亞洲 秦衛(wèi);“超薄”子宮內(nèi)膜上受孕成功[N];健康報;2010年

9 遼寧省婦嬰醫(yī)院 楊際春;具有轉(zhuǎn)移和種植能力 子宮內(nèi)膜組織會游走[N];衛(wèi)生與生活報;2006年

10 徐飛;子宮內(nèi)膜不安分 “游走”全身惹禍端[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2008年

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2 陳益魯;Wnt信號通路在超長方案促排卵PCOS患者卵子成熟中的調(diào)控研究[D];山東大學(xué);2018年

3 周芳;前列腺素及其受體在月經(jīng)發(fā)生中對子宮內(nèi)膜崩解脫落作用機(jī)制的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2018年

4 齊莎莎;褪黑素通過Notch1/Numb/Snail信號通路調(diào)控子宮內(nèi)膜相關(guān)疾病上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的研究[D];山東大學(xué);2018年

5 趙向寨;SPL-A增敏TRAIL誘導(dǎo)的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡及機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2018年

6 姜瑞偉;HOXA10的SUMO化修飾抑制胚胎種植的機(jī)制研究[D];南京大學(xué);2018年

7 汪龍霞;子宮內(nèi)膜異位囊腫介入性治療的實驗及臨床研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2004年

8 孫愛軍;絕經(jīng)后補(bǔ)充雌孕激素對子宮內(nèi)膜增生與抑制的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1997年

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本文編號：2635715