本文關(guān)鍵詞：圍孕期甲醛暴露污染對大鼠心臟胚胎發(fā)育的影響及其發(fā)病的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：心臟胚胎發(fā)育是一個(gè)非常復(fù)雜的過程,受到遺傳與非遺傳因素的共同影響。隨著人居污染逐漸加劇,其最常見的污染因素甲醛對胚胎各系統(tǒng)發(fā)育的影響已成為研究熱點(diǎn)。目前,主要研究了甲醛對生殖系統(tǒng)、造血系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等系統(tǒng)的影響,但其對心臟胚胎發(fā)育的影響尚未見明確報(bào)道。本課題立足臨床工作,首先,通過臨床流行病學(xué)回顧性研究,探討常見的圍孕期危險(xiǎn)暴露因素與先天性心臟病之間的相關(guān)關(guān)系。隨后,我們針對目前生活中非常普遍的環(huán)境污染源-甲醛,進(jìn)一步探討圍孕期甲醛暴露污染對心臟胚胎發(fā)育影響的發(fā)病機(jī)制。本課題以研究甲醛暴露性污染對心臟胚胎發(fā)育的影響為目的,在孕前13天對SD大鼠給予甲醛吸入染毒,以胎鼠及子鼠為研究對象,通過超聲、組織學(xué)、分子生物學(xué)等方法,在甲醛吸入性暴露污染條件下,對心臟胚胎發(fā)育的影響進(jìn)行系列觀察,分別從胎鼠/子鼠存活性、心臟胚胎發(fā)育異常的發(fā)生、發(fā)展的大體水平、細(xì)胞學(xué)水平、基因差異性表達(dá)等多方進(jìn)行綜合分析,探索甲醛與心臟胚胎發(fā)育之間的關(guān)系,并探討其發(fā)病機(jī)制。該課題的研究結(jié)果將對深入了解人居環(huán)境污染中的常見因素與心臟胚胎發(fā)育的關(guān)系、提高優(yōu)生優(yōu)育一級預(yù)防、降低出生缺陷有重要意義。實(shí)驗(yàn)一圍孕期危險(xiǎn)因素暴露與先天性心臟病發(fā)病的臨床流行病學(xué)觀察目的探討先天性心臟病的發(fā)病與圍孕期危險(xiǎn)因素暴露之間的相關(guān)性。方法選擇2012年3月1日至2013年10月1日在第四軍醫(yī)大學(xué)進(jìn)行超聲心動圖檢查確診為先天性心臟病的435例5歲以下幼兒及574例正常體檢的兒童家庭作為觀察對象,對其家庭一般情況及圍孕期有毒環(huán)境因素暴露情況進(jìn)行問卷調(diào)查(觀察內(nèi)容:兒童一般情況、父母年齡、職業(yè)、受教育程度、母親懷孕期間藥物接觸史、母親懷孕期間病毒感染史、孕期房屋裝修史、孕期母親染發(fā)燙發(fā)史以及父母親工作環(huán)境中是否存在污染)。對采集的數(shù)據(jù)予以數(shù)量化和分級,輸入SPSS 13.0數(shù)據(jù)庫,經(jīng)邏輯校對無誤后應(yīng)用Χ2檢驗(yàn),非條件Logistic回歸分析方法進(jìn)行資料分析。結(jié)果1.患病組幼兒體重低于健康對照組(P0.01),但兩組受檢者在年齡、身高、心率及父母年齡方面差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.父母的受教育程度在先天性心臟病患病組與健康對照組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且先天性心臟病組中父親及母親高中及以下受教育程度的比例明顯高于健康對照組(父親:86.7%vs 67.4%,母親:83.5%vs 66.4%)。3.母親懷孕早期服用藥物、病毒感染、房屋裝修、母親懷孕期間或孕前半年內(nèi)染發(fā)燙發(fā)、父母工作環(huán)境污染暴露均是造成先天性心臟病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。其中孕早期服用藥物的危害性最大(p0.0001,OR=5.06)。4.經(jīng)過多因素Logistic Regression分析,接觸藥物、病毒感染、房屋裝修、燙發(fā)染發(fā)及工作環(huán)境暴露顯示出與先天性心臟病發(fā)病有顯著的相關(guān)關(guān)系。5.隨著暴露因素的增多,先天性心臟病發(fā)病的危險(xiǎn)程度顯著增加。當(dāng)孕期同時(shí)受到3種或3種以上危險(xiǎn)因素的暴露時(shí),新生兒罹患先天性心臟病的危險(xiǎn)性幾乎是單因素暴露的16倍。6.圓錐干畸形和單純室間隔缺損是本研究中顯示的發(fā)病率最高的先天性心臟病。藥物、工作環(huán)境暴露和病毒性感染均與圓錐干畸形有很高的相關(guān)性(P0.01,OR值分別為6.74、3.73、2.82)。藥物、病毒感染、房屋裝修、燙發(fā)染發(fā)及工作環(huán)境暴露均會增加單純室間隔缺損的罹患風(fēng)險(xiǎn)(OR值分別為2.77、2.07、1.76、1.89、1.81)。結(jié)論圍孕期多種危險(xiǎn)因素暴露與先天性心臟病發(fā)病存在顯著的相關(guān)關(guān)系。實(shí)驗(yàn)二圍孕期甲醛暴露污染對大鼠心臟胚胎發(fā)育的影響及其發(fā)病的研究目的探討圍孕期甲醛吸入性暴露對SD大鼠心臟胚胎發(fā)育的影響及其發(fā)病機(jī)制。方法1.圍孕期甲醛吸入性染毒動物分組選取了12只SD大白鼠作為實(shí)驗(yàn)動物,隨機(jī)分為兩組:第一組為空白對照組(不做任何處理);第二組為交配前13d甲醛吸入組(E-13);甲醛吸入濃度為3mg/m3,每天一次,每次90分鐘。2.圍孕期甲醛吸入性染毒母鼠一般狀況評估對兩組動物在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中進(jìn)行一般情況的評估,包括體重、進(jìn)食、飲水、精神狀態(tài)。同時(shí),在孕14天通過超聲檢查確定胎盤數(shù),實(shí)驗(yàn)結(jié)束取樣時(shí)計(jì)算存活胎數(shù)。3.觀察甲醛暴露污染對子鼠心室間隔、瓣膜、血流以及室壁運(yùn)動功能的影響將出生后子鼠從籠中取出稱重,按0.18m L/l0g重量給予三溴乙醇注射麻醉,將其置于檢查臺上,操作臺上溫度設(shè)定為40℃左右,用醫(yī)用膠布將其固定于操作臺上,用RMV707B高頻超聲探頭以及Vevo770操作系統(tǒng)觀察間隔、瓣膜、血流及心臟功能情況。4.心肌標(biāo)本制備依照SD大鼠的平均妊娠周期約20天,在妊娠后14天隨機(jī)選取3只雌鼠,獲得胎鼠心臟樣本;余3只雌鼠待胎鼠出生后,獲得子鼠心臟樣本,所有樣本均在無菌無酶條件下,切取心肌組織,滅菌生理鹽水沖洗后,離體1min內(nèi)迅速置于凍存管內(nèi),3min內(nèi)轉(zhuǎn)至液氮罐中保存。5.心肌組織電鏡標(biāo)本制備將心肌組織放在干冰上切成直徑約5mm,高度約3-5mm之間的標(biāo)本,迅速放入2%戊二醛溶液中2小時(shí),用磷酸緩沖液清洗6次,用0.1%鋨酸清洗3次,再用雙蒸水清洗3次,放入梯度酒精脫水2次,用真空噴鍍儀干燥,再用導(dǎo)電膠將標(biāo)本固定在金屬樣品臺上,最后放入真空噴鍍儀內(nèi)鍍膜備用。6.心肌組織基因功能檢測標(biāo)本制備將心肌組織放入盛有液氮的研缽中研磨成粉狀,加入50mg組織至1ml Trizol試劑繼續(xù)研磨,待液氮揮發(fā)后裝入EP管中,室溫下靜置5min,離心半徑15cm,放入離心機(jī)內(nèi)以12000r/min離心10-15min,留取上層液體,將Trizol加入異丙醇(用0.5ml/1ml比例),室溫下靜置10-15 min,再重復(fù)上述操作。然后將上清液棄掉,1ml體積分?jǐn)?shù)75%乙醇漂洗,4℃,離心半徑15cm,8 000r/min離心×5min。室溫晾干,50ul DEPC水溶解,置于-20℃?zhèn)溆�。結(jié)果1.與正常對照組相比,實(shí)驗(yàn)組母鼠在接受甲醛暴露接觸后基本生命體征(體重、進(jìn)食、排泄及運(yùn)動情況)均未出現(xiàn)顯著變化;2.交配前13d甲醛吸入組(E-13)與正常對照組相比,母鼠受孕周期明顯延長(360±8h vs 14±3h,p0.001);子鼠活產(chǎn)胎數(shù)減少(9±2 vs 24±2,p0.001);3.子鼠出生后20天高頻小動物超聲心動圖檢查顯示,各組活體子鼠中并未發(fā)現(xiàn)明顯的心臟胚胎發(fā)育異常和功能異常。4.與其他各組相比,交配前13d甲醛吸入組子鼠的心肌組織均出現(xiàn)了不同程度的細(xì)胞水腫、細(xì)胞間距增寬等變化。5.基因芯片結(jié)果顯示,交配前13天甲醛吸入組胎鼠混合樣本與正常對照組樣本相比,有25種與心臟發(fā)育相關(guān)且明顯上調(diào)的基因:IRX4,DLC1,PAM,BMP10,ERBB4,MYL3,MYBPC3,FHL2,GJA1,GJA5,EDNRA,HAND2,GATA6,GATA4,CALCRL,NKX2-5,MB,BMP4,MYH7,MYH6,MECOM,MYH11,HOPX,NPPB,ADAMTS1,且其上調(diào)倍數(shù)均大于3倍。6.顯著上調(diào)的與心臟發(fā)育及功能相關(guān)的基因分別參與了5種重要的信號通路的傳導(dǎo)。結(jié)論1.圍孕期甲醛吸入性暴露可致母鼠受孕周期延長。2.圍孕期甲醛吸入性暴露可顯著降低子鼠的活產(chǎn)率,但正�；町a(chǎn)的子鼠其心臟大體結(jié)構(gòu)與功能并未發(fā)現(xiàn)顯著性異常。3.圍孕期甲醛吸入性暴露可致子鼠心肌組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。4.圍孕期甲醛吸入性暴露對大鼠心臟胚胎發(fā)育相關(guān)基因的差異性表達(dá)可產(chǎn)生影響。
【關(guān)鍵詞】：心臟發(fā)育 發(fā)生機(jī)制 甲醛 差異表達(dá) 基因芯片
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R445.1;R714.5
【目錄】：

• 縮略語表4-5
• 中文摘要5-10
• 英文摘要10-16
• 前言16-18
• 文獻(xiàn)回顧18-23
• 材料23-25
• 實(shí)驗(yàn)一 圍孕期危險(xiǎn)因素暴露與先天性心臟病發(fā)病的臨床流行病學(xué)觀察25-32
• 1 方法25
• 2 結(jié)果25-28
• 3 討論28-32
• 實(shí)驗(yàn)二 圍孕期甲醛暴露污染對大鼠心臟胚胎發(fā)育的影響及其發(fā)病的研究32-45
• 1 方法32-34
• 2 結(jié)果34-40
• 3 討論40-45
• 小結(jié)45-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 個(gè)人簡歷和研究成果53-54
• 致謝54

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 薛慶於;陳寶定;吳一丁;朱軍;于智勇;沈維干;;甲醛對雌性小鼠生殖功能及臟器的影響[J];生物學(xué)雜志;2006年06期

2 許真;室內(nèi)空氣主要污染物及其健康效應(yīng)[J];衛(wèi)生研究;2003年03期

3 陳曉東;中國室內(nèi)裝修污染及健康危害研究進(jìn)展[J];中國公共衛(wèi)生;2003年10期

  本文關(guān)鍵詞：圍孕期甲醛暴露污染對大鼠心臟胚胎發(fā)育的影響及其發(fā)病的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：258371