【摘要】：目的:探討妊娠期缺鐵導(dǎo)致低出生體重的機(jī)制。下丘腦-垂體及其IGF-1軸是控制機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育的重要途徑,本研究旨在探討孕母鐵缺乏與子代下丘腦-垂體及其IGF-1軸之間的聯(lián)系。方法:1.建立鐵缺乏孕鼠模型:4周齡雌性Wistar大鼠36只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,分別飼低鐵飼料和含鐵飼料喂養(yǎng)4周,檢測(cè)雌鼠血紅蛋白(Hb)濃度,血細(xì)胞比容(HCT)、紅細(xì)胞平均容積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)及紅細(xì)胞分布寬度(RDW)等血液學(xué)相關(guān)參數(shù)。將雌鼠與正常雄鼠合籠,孕末期檢測(cè)血液學(xué)相關(guān)參數(shù)并進(jìn)行骨髓鐵染色。2.觀察仔鼠存活率及體重,用ELISA方法檢測(cè)仔鼠血清中GH含量。3.對(duì)下丘腦、垂體和腎上腺等組織進(jìn)行體外培養(yǎng),用細(xì)胞免疫化學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行鑒定。4.實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)新生仔鼠下丘腦生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)、生長(zhǎng)抑素(SST)、促紅細(xì)胞生成素(EPO)、促紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)及缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1);檢測(cè)垂體生長(zhǎng)激素(GH)、EPO、EPOR m RNA及腎上腺中EPOR m RNA的表達(dá);并檢測(cè)肝臟胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)、EPO、EPOR及HIF-1 m RNA表達(dá)量。5.Western-blot方法檢測(cè)新生仔鼠肝臟中EPOR蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1.缺鐵性貧血孕鼠模型制備成功:相比對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組低鐵干預(yù)4周后及孕鼠孕末期Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC等水平降低(P0.01),RDW值升高(P0.01),實(shí)驗(yàn)組大鼠骨髓細(xì)胞內(nèi)鐵及外鐵明顯減少;2.實(shí)驗(yàn)組孕鼠在妊娠末期有難產(chǎn)現(xiàn)象,實(shí)驗(yàn)組新生仔鼠體重明顯低于對(duì)照組(P0.01),每窩產(chǎn)仔率及仔鼠存活率也明顯低于對(duì)照組(P0.01);3.實(shí)驗(yàn)組垂體GH m RNA及肝臟IGF-1 m RNA的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P0.05);4.與對(duì)照組相比,鐵缺乏組新生仔鼠下丘腦中GHRH m RNA表達(dá)有下調(diào)趨勢(shì)(P0.05),SST m RNA表達(dá)有上調(diào)趨勢(shì)(P0.05);5.鐵缺乏組新生仔鼠肝臟中EPO m RNA表達(dá)上調(diào)(P0.01);垂體中EPO m RNA表達(dá)下調(diào)(P0.01);下丘腦中EPO m RNA表達(dá)無(wú)顯著性差異(P0.05);6.鐵缺乏組新生仔鼠下丘腦、垂體、肝臟中HIF-1 m RNA、EPOR m RNA與對(duì)照組相比表達(dá)無(wú)顯著性差異(P0.05);與對(duì)照組相比,鐵缺乏組新生仔鼠肝臟中EPOR蛋白的表達(dá)也無(wú)顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:1.大鼠妊娠期鐵缺乏,致使子代GH和IGF-1 m RNA表達(dá)下調(diào),是導(dǎo)致子代低出生體重的重要因素。2.孕鼠鐵缺乏子代肝臟分泌EPO增多以緩解貧血,但下丘腦、垂體、腎上腺及肝臟中的EPOR表達(dá)并未升高,可能與貧血造成慢性低氧有關(guān)。
【圖文】：

表明低鐵干預(yù)成功，見(jiàn)表3-3。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組體重進(jìn)行分析，在適應(yīng)性飼喂一周后及飼喂低鐵飼料與正常鐵飼料后一周，兩組體重增長(zhǎng)無(wú)明顯差異（P>0.05），在造模兩周后， 兩組的體重增長(zhǎng)有顯著性差異（P>0.05），見(jiàn)表3-4及圖3-1。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組雌鼠體重增長(zhǎng)緩慢，糞便顏色偏灰白，毛色偏暗黃。表 3-2 低鐵干預(yù) 1 周后兩組血液學(xué)參數(shù)比較（n=18， x±s）Table 3-2. Compared rats hematology of two groups after 1 week intervention（n=18， x±s）組別 Hb（g/L） HCT（L/L） MCV（fL） MCH（pg） MCHC（g/L） RDW（%）對(duì)照組 142.39±4.60 0.47±0.02 66.43±2.01 21.17±0.68 329.00±15.35 15.23±1.67實(shí)驗(yàn)組 124.58±7.521)0.38±0.021)59.98±1.811)19.74±0.951)318.89±8.091)18.93±2.791)t 值或Mann-Whitney U1.00 10.50 10.26 5.26 98.00 -4.82P 值 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 0.026 <0.001注：1)與對(duì)照組比較 P <0.05

酸性亞鐵氰化鉀染色后，，可見(jiàn)巨噬細(xì)胞胞質(zhì)中含有大量藍(lán)色沉淀鐵顆粒。相比于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組大鼠骨髓細(xì)胞內(nèi)鐵及外鐵明顯減少，細(xì)胞外鐵評(píng)分為-，表明缺鐵性貧血孕鼠模型制備成功，見(jiàn)圖3-2。圖 3-2 孕末期大鼠骨髓鐵染色Figure 3-2. Compared the iron of bone marrow of full term pregnancy rats in two group注：A.對(duì)照組骨髓鐵染色涂片，B.實(shí)驗(yàn)組骨髓鐵染色涂片，↑為巨噬細(xì)胞（100×），n=33 新生仔鼠一般資料比較與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組新生仔鼠體型偏小，皮膚顏色偏粉白，見(jiàn)圖3-3。實(shí)驗(yàn)組新生仔鼠體重明顯低于對(duì)照組（P<0.01），每窩產(chǎn)仔率及仔鼠存活率也明顯低于對(duì)照組（P<0.01），見(jiàn)表3-6。圖 3-3 兩組新生仔鼠一般資料對(duì)比圖Figure 3-3. Compared the general of newborn rats表 3-6 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組新生仔鼠一般資料比較Table 3-6. Compared the gengeral of newborn rats between experiment group and control group注：1)與對(duì)照組比較 P<0.01組別 體重（g） 每窩個(gè)數(shù) 活?
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R714.254

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2576557