【摘要】：目的檢測EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞中表達(dá)的相關(guān)性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測組、MUC16免疫磁珠檢測組、2種磁珠均等混合檢測組。對來源于同一患者的等體積外周血樣本進(jìn)行循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測,HE染色后鑒定檢測值。結(jié)果 EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠對同體積、同來源樣本檢測值分別為22±11、14±6、28±12個腫瘤細(xì)胞(P0.05),說明檢測效率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論 MUC16與EPCAM在上皮性卵巢癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞中獨(dú)立表達(dá)且存在差異,因此增加MUC16這一器官標(biāo)志物可有效提高上皮性卵巢癌CTCs檢出數(shù)量。
【圖文】：

V3細(xì)胞系EPCAM、MUC16表達(dá)情況流式分析SKOV3細(xì)胞EPCAM、MUC16表達(dá)率分別為（99.61±0.19）%、（99.99±0.01）%（圖1），免疫熒光結(jié)果顯示EPCAM、MUC16抗原均勻表達(dá)于SKOV3細(xì)胞膜上（圖2）。IFimagesshowedthatEPCAM(a-c)andMUC16(d-f)antigenswereexpressinguniformlyinSKOV3cells,respectively.圖2IF檢測SKOV3細(xì)胞系EPCAM、MUC16表達(dá)（×400）Fig2IFdetectionoftheEPCAMandMUC16expressioninSKOV3cells（×400）EPCAMantigenexpressionwas99.41%andtheMUC16antigenexpressionwas99.99%inSKOV3cellsanalyzedbyFACS.圖1FACS檢測SKOV3細(xì)胞系EPCAM、MUC16表達(dá)率Fig1FACSdetectionoftheEPCAMandMUC16expressioninSKOV3cells2.2免疫磁珠EPCAM、MUC16表達(dá)情況通過用抗單克隆抗體Fc段的熒光二抗對免疫磁珠進(jìn)行流式分析，顯示EPCAM、MUC16兩種抗體與磁珠結(jié)合后表達(dá)率分別為：（94.17±1.05）%、（97.80±0.60）%（圖3），，免疫熒光分析顯示磁珠與抗體結(jié)合后分散性良好（圖4）。2.3免疫磁珠敏感性EPCAM、MUC16單獨(dú)與共同的檢測限值均為每4ml血液中有50個SKOV3細(xì)胞，但能穩(wěn)定檢出細(xì)胞的界限值為每4ml血液中有100個SKOV3細(xì)胞（表1），3組結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）（圖5）。2.4免疫磁珠特異性免疫磁珠可與SKOV3細(xì)胞碎片或外周血細(xì)胞破碎細(xì)胞膜如紅細(xì)胞膜碎片結(jié)合，但不與外周血白細(xì)胞結(jié)合（圖6）。在子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎這2種常見外周血中MUC16值升高的患者中未檢出腫瘤細(xì)胞（表2）。·519·

嗾酥時(shí)卻螅囝忻庖嘰胖?結(jié)合。1.13統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0分析，2組數(shù)據(jù)比較時(shí)采用兩樣本獨(dú)立T檢驗(yàn)，P<0.05認(rèn)為有顯著差異。數(shù)據(jù)分析使用GraphPadPrism5軟件。2結(jié)果2.1SKOV3細(xì)胞系EPCAM、MUC16表達(dá)情況流式分析SKOV3細(xì)胞EPCAM、MUC16表達(dá)率分別為（99.61±0.19）%、（99.99±0.01）%（圖1），免疫熒光結(jié)果顯示EPCAM、MUC16抗原均勻表達(dá)于SKOV3細(xì)胞膜上（圖2）。IFimagesshowedthatEPCAM(a-c)andMUC16(d-f)antigenswereexpressinguniformlyinSKOV3cells,respectively.圖2IF檢測SKOV3細(xì)胞系EPCAM、MUC16表達(dá)（×400）Fig2IFdetectionoftheEPCAMandMUC16expressioninSKOV3cells（×400）EPCAMantigenexpressionwas99.41%andtheMUC16antigenexpressionwas99.99%inSKOV3cellsanalyzedbyFACS.圖1FACS檢測SKOV3細(xì)胞系EPCAM、MUC16表達(dá)率Fig1FACSdetectionoftheEPCAMandMUC16expressioninSKOV3cells2.2免疫磁珠EPCAM、MUC16表達(dá)情況通過用抗單克隆抗體Fc段的熒光二抗對免疫磁珠進(jìn)行流式分析，顯示EPCAM、MUC16兩種抗體與磁珠結(jié)合后表達(dá)率分別為：（94.17±1.05）%、（97.80±0.60）%（圖3），免疫熒光分析顯示磁珠與抗體結(jié)合后分散性良好（圖4）。2.3免疫磁珠敏感性EPCAM、MUC16單獨(dú)與共同的檢測限值均為每4ml血液中有50個SKOV3細(xì)胞，但能穩(wěn)定檢出細(xì)胞的界限值為每4ml血液中有100個SKOV3細(xì)胞（表1），3組結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）（圖5）。2.4免疫磁珠特異性免疫磁珠可與SKOV3細(xì)胞碎片或外周血細(xì)胞破碎細(xì)胞膜如紅細(xì)胞膜碎片結(jié)合，但不與外周血白細(xì)胞結(jié)合（圖6）。在子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎這2種常見外周血中MUC16值升高的患者中未檢出腫瘤細(xì)胞（表2）。·519·
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;重慶市腫瘤研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81171365)
【分類號】：R737.31

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2525916