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Tie2-siRNA表達(dá)載體對(duì)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞株化療敏感性的研究

發(fā)布時(shí)間:2019-07-17 16:07
【摘要】:目的:研究Tie2表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株化療敏感性的影響,探索子宮內(nèi)膜癌輔助治療新方法。方法:將表達(dá)Tie2-siRNA的堿基片段插入含有CMV啟動(dòng)子、新霉素抗性基因及綠色熒光蛋白報(bào)告基因的質(zhì)粒中,應(yīng)用脂質(zhì)體包涵體技術(shù)將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞株,以減少Tie2基因表達(dá),采用逆轉(zhuǎn)錄PCR及蛋白印跡方法鑒定。DAPI染色檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡。不同濃度卡鉑處理細(xì)胞,檢測(cè)各組細(xì)胞的化療敏感性。結(jié)果:成功轉(zhuǎn)染后,Ishikawa細(xì)胞中Tie2 mRNA及蛋白表達(dá)水平的抑制率分別為75.5%及56.4%,Tie2-siRNA組細(xì)胞凋亡增加,化療敏感性增加。Tie2-siRNA組的卡鉑IC50為(29.95±0.68)μg/ml,低于空白對(duì)照組(80.55±1.05)μg/ml。結(jié)論:降調(diào)Tie2基因的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)可促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡,增加子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。
文內(nèi)圖片:熒光顯微鏡下觀測(cè)各組綠色熒光蛋白的表達(dá)A:Ishikawa細(xì)胞組;B:N-siRNA組;C:Tie2-siRNA組
圖片說明: OD550nm處測(cè)量各孔的吸光值。計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率及細(xì)胞半數(shù)抑制率(IC50),實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,,數(shù)據(jù)用xs

本文編號(hào):2515526

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