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TGF-β1和MMP-9在宮腔粘連子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)上調(diào)

發(fā)布時間:2019-03-04 17:38
【摘要】:目的:探討基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在宮腔粘連(intrauterine adhesions,IUAs)子宮內(nèi)膜中的表達(dá)及其意義。方法:人群實驗:收取20例宮腔鏡診斷治療時所得重度IUAs患者子宮內(nèi)膜組織、非IUAs者子宮內(nèi)膜組織15例(對照組)。動物實驗:運用95%無水乙醇持續(xù)注射8 min構(gòu)造IUAs大鼠模型(對照組注射相應(yīng)的生理鹽水),分別獲取對照組及實驗組(術(shù)后第1、3、5、10天)子宮內(nèi)膜組織。采用組織化學(xué)染色方法(HE、Masson、IHC)觀察大鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)變化并檢測子宮內(nèi)膜相關(guān)指標(biāo)(keratin)的表達(dá)情況,分別采用逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR(q RT-PCR)和Western blot檢測IUAs患者和大鼠子宮內(nèi)膜MMP-9及TGF-β1的m RNA和蛋白水平表達(dá)。結(jié)果:(1)臨床樣本顯示IUAs患者子宮內(nèi)膜中MMP-9(F=1.027,P=0.001)及TGF-β1(F=1.156,P=0.000)的蛋白表達(dá)明顯高于對照組;(2)成功構(gòu)建大鼠IUAs動物模型,Masson染色提示子宮內(nèi)膜纖維化形成,IUAs形成過程中子宮內(nèi)膜腺上皮或腔上皮標(biāo)志物角蛋白(keratin)表達(dá)顯著降低(與對照組相比,術(shù)后5d:F=35.200,P=0.000;術(shù)后10d:F=26.098,P=0.000);(3)術(shù)后1d,3d,5d,10d組MMP-9 m RNA含量分別是對照組的1.02倍、1.80倍、2.33倍、4.58倍,TGF-β1 m RNA含量分別是對照組的2.53倍、2.82倍、3.55倍、4.33倍;與對照組(MMP-9:1.405±0.146,TGF-β1:0.251±0.079)相比,術(shù)后1d,3d,5d,10d MMP-9蛋白含量分別為1.552±0.093、1.759±0.036、1.577±0.125、3.825±0.712,其中在術(shù)后第10天顯著高于對照組(P=0.000),TGF-β1蛋白含量分別為0.709±0.105、0.756±0.090、0.920±0.671、0.717±0.243,總體呈現(xiàn)上升趨勢,顯著高于對照組(P=0.000,000,0.000,0.003)。結(jié)論:TGF-β1與MMP-9在IUAs的形成過程中明顯升高,提示IUAs的發(fā)生發(fā)展可能和MMP-9與TGF-β1表達(dá)上調(diào)有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the expression and significance of matrix metalloproteinase-9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9) and transforming growth factor-尾 1 (transforming growth factor- 尾 1 (TGF- 尾 1) in endometrium of uterine cavity adhesion (intrauterine adhesions,IUAs). Methods: the endometrial tissue of 20 patients with severe IUAs during hysteroscopic diagnosis and treatment and 15 cases of non-IUAs patients (control group) were enrolled in the crowd experiment. Animal experiment: the rat model of IUAs was constructed by continuous injection of 95% anhydrous ethanol for 8 min. The endometrial tissue of the control group and the experimental group (1,3,5,10 days after operation) were obtained respectively. The morphological changes of rat endometrium were observed by histochemical staining (HE,Masson,IHC), and the expression of (keratin) was detected. The expression of m-RNA and protein of MMP-9 and TGF- 尾 1 in endometrium of IUAs patients and rats were detected by real-time RT-PCR (q RT-PCR and Western blot, respectively. Results: (1) the protein expression of MMP-9 (F = 1.027, P < 0.001) and TGF- 尾 1 (F = 1.156, P < 0.001) in endometrium of patients with IUAs was significantly higher than that of the control group (P < 0.01). (2) the rat model of IUAs was established successfully. Masson staining showed that endometrial fibrosis was formed. The expression of keratin (keratin) in endometrial glandular epithelium or luminal epithelial marker during IUAs formation was significantly lower than that in control group (P < 0.05). On the 5th day after operation, F was 35.200, P0. 00; On the 10th day after operation, F was 26.098, P0. 000 (P < 0. 000). (3) on the 1st, 3rd, 5th day after operation, the content of MMP-9 m RNA was 1.02 times, 1.80 times, 2.33 times, 4.58 times as much as that of the control group, and the content of TGF- 尾 1 m RNA was 2.53 times, 2.82 times, 3.55 times higher than that of the control group, respectively. 4.33 times; Compared with the control group (MMP-9: 1.405 鹵0.146, TGF- 尾 1: 0.251 鹵0.079), the content of MMP-9 protein on the 1st, 3rd, 5th and 10th day after operation was 1.552 鹵0.093, 1.759 鹵0.036, 1.577 鹵0.125, 3.825 鹵0.712, respectively. The protein content of TGF- 尾 1 was 0.709 鹵0.105, 0.756 鹵0.090, 0.920 鹵0.671, 0.717 鹵0.243 on the 10th day after operation, which was significantly higher than that in the control group (P < 0.000,000,0.000,0.003). Conclusion: TGF- 尾 1 and MMP-9 increased significantly during the formation of IUAs, suggesting that the occurrence and development of IUAs may be related to the upregulation of MMP-9 and TGF- 尾 1 expression.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上資助項目(編號:81471417)
【分類號】:R711.74

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本文編號:2434480

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