發(fā)布時(shí)間：2019-02-28 20:10

【摘要】：背景與目的:mi R-101在胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌以及前列腺癌中表達(dá)下調(diào),有類似抑癌基因樣作用,然而,其在卵巢癌中的作用尚未明確。該研究旨在探討mi R-101是否通過(guò)靶向調(diào)控甲基化轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)抑制人卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)與侵襲,從而進(jìn)一步揭示mi R-101的抑瘤機(jī)制。方法:采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)檢測(cè)22例卵巢癌組織及癌旁正常卵巢組織中mi R-101的表達(dá)改變;將mi R-101 mimics轉(zhuǎn)染于卵巢癌SKOV3細(xì)胞,以DNMT3A si RNA為陽(yáng)性對(duì)照,采用蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)檢測(cè)外源過(guò)表達(dá)mi R-101對(duì)DNMT3A蛋白表達(dá)水平的影響;采用噻唑藍(lán)(thiazolyl blue,MTT)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)外源高表達(dá)mi R-101對(duì)人卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)與侵襲能力的影響。結(jié)果:q RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,mi R-101在22例卵巢癌組織中的表達(dá)水平較癌旁正常組織明顯下調(diào);Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,外源過(guò)表達(dá)mi R-101或沉默DNMT3A能下調(diào)SKOV3細(xì)胞DNMT3A蛋白的表達(dá)水平;MTT檢測(cè)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染mi R-101 mimics或沉默DNMT3A 48、72和96 h后D值與對(duì)照組比較明顯減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示,轉(zhuǎn)染mi R-101 mimics或沉默DNMT3A 36 h后穿過(guò)基底膜的細(xì)胞數(shù)分別為(105±7)個(gè)和(107±13)個(gè),與對(duì)照組(213±11)個(gè)比較能明顯減緩SKOV3細(xì)胞的穿膜能力,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:mi R-101通過(guò)靶向調(diào)控DNMT3A抑制人卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng)與侵襲。
[Abstract]:Background & AIM: the down-regulated expression of mi rn 101 in gastric cancer, colon cancer, breast cancer and prostate cancer has a similar anti-oncogene effect. However, its role in ovarian cancer is still unclear. The aim of this study was to investigate whether mi RX101 could inhibit the growth and invasion of human ovarian cancer cells by targeting methyltransferase 3A (DNMT3A), thus further revealing the antitumor mechanism of mi RX101. Methods: real-time quantitative polymerase chain reaction (quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR) was used to detect the expression of mi rq101 in 22 cases of ovarian cancer and normal ovarian tissues adjacent to cancer. Human ovarian cancer cell line SKOV3 was transfected with mi rm 101 mimics, and DNMT3A si RNA was used as positive control. (Western blot) was used to detect the effect of exogenous overexpression of mi Rm 101 on the expression of DNMT3A protein. The growth and invasion ability of human ovarian cancer cells were detected by thiazolyl blue,MTT and Transwell invasion assay, and the effects of exogenous high expression of mi Rx101 on the growth and invasion ability of human ovarian cancer cells were detected. Results: the results of Q-RT-PCR showed that the expression level of mi-ru-101 in 22 cases of ovarian carcinoma was significantly lower than that of normal tissue adjacent to the tumor. The results of Western blot analysis showed that the expression level of DNMT3A protein in SKOV3 cells could be down-regulated by exogenous overexpression of mi-Rx101 or silencing DNMT3A. The results of MTT detection showed that the D value was significantly decreased after 72 h and 96 h after transfection with mi Rc 101 mimics or silencing DNMT3A 48 compared with the control group, the difference was statistically significant (P0.05). Transwell invasion assay showed that the number of cells passing through the basement membrane was (105 鹵7) and (107 鹵13), respectively, after transfection with mi Rc 101 mimics or silencing DNMT3A for 36 h, which was significantly lower than that of the control group (213 鹵11), and the number of cells passing through the basement membrane was significantly lower than that of the control group (213 鹵11). The difference was statistically significant (P0.05). Conclusion: mi Rc 101 inhibits the growth and invasion of human ovarian cancer cells by targeting DNMT3A.
【作者單位】： 郴州市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】：湖南省教育廳課題資助項(xiàng)目(13C929)
【分類號(hào)】：R737.31

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本文編號(hào)：2432132