【摘要】：目的：本實(shí)驗(yàn)旨在研究人宮頸癌組織中IER5基因的表達(dá)與輻射劑量的效應(yīng)關(guān)系，以及氯化兩面針堿對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞中IER5基因表達(dá)的影響，初步探討氯化兩面針堿的輻射增敏作用。 材料與方法：本實(shí)驗(yàn)收集整理44例宮頸癌組織，均取自2011年11月至2012年12月期間在遼寧省腫瘤醫(yī)院的宮頸癌患者的組織標(biāo)本。其中包括治療前組、10Gy輻射組、20Gy輻射組、30Gy輻射組、40Gy輻射組、50Gy輻射組和放療量"g50Gy輻射組。采用werstern blot檢測(cè)IER5蛋白表達(dá)量情況。同時(shí)體外培養(yǎng)人宮頸癌Hela細(xì)胞為研究對(duì)象，用不同濃度的氯化兩面針堿處理Hela細(xì)胞24小時(shí)和48小時(shí)，，及氯化兩面針堿聯(lián)合輻射處理Hela細(xì)胞，用MTT法檢測(cè)Hela細(xì)胞生長(zhǎng)抑制情況；用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Hela細(xì)胞凋亡情況，用werstern blot檢測(cè)Hela細(xì)胞IER5蛋白表達(dá)量情況。 結(jié)果： 1輻射對(duì)宮頸癌組織IER5表達(dá)：治療前組灰度值為0.87±0.15，10Gy輻射組灰度值為0.81±0.13，20Gy輻射組灰度值為1.37±0.19，30Gy輻射組灰度值為1.53±0.47，40Gy輻射組灰度值為1.12±0.24，50Gy輻射組組灰度值為0.95±0.83，50Gy輻射組灰度值為1.05±0.26。10Gy輻射組與治療前組相比P=0.6360.05,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；20Gy輻射組、30Gy輻射組及40Gy輻射組分別與治療前組相比P0.05，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；50Gy輻射組及50Gy輻射組分別與治療前組相比P0.05，其差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。30Gy輻射組與其他組相比P0.05，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2氯化兩面針堿對(duì)Hela細(xì)胞的影響 2.1.MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性結(jié)果顯示：氯化兩面針堿能夠抑制Hela細(xì)胞生長(zhǎng),并呈一定的“時(shí)間-劑量”依賴性（P0.05），氯化兩面針堿聯(lián)合輻射后其“時(shí)間-劑量”依賴性依然存在（P0.05）具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。氯化兩面針堿聯(lián)合輻射組與單純用藥組相比，對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率前者高于后者，差異（P0.05）具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。氯化兩面針堿在4μg/ml組在48小時(shí)后抑制率達(dá)47.7%接近半數(shù)抑制率，使用ORIGIN50軟件分析MTT數(shù)據(jù)及分析畫圖測(cè)出48小時(shí)氯化兩面針堿IC50為3.97418μg/ml。 2.2流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡結(jié)果：氯化兩面針堿能夠使Hela細(xì)胞凋亡,并呈一定的“時(shí)間-劑量”依賴性（P0.05），聯(lián)合輻射后其“時(shí)間-劑量”依賴性依然存在（P0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。氯化兩面針堿聯(lián)合輻射組與單純用藥組相比，在同一時(shí)間、同一濃度相比細(xì)胞凋亡率前者高于后者（P0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.3. Western blot印跡雜交檢測(cè)蛋白IER5的表達(dá)變化結(jié)果：4Gy輻射劑量下輻射組與對(duì)照組，輻射組IER5表達(dá)量是對(duì)照組的1.29倍，這表明輻射能夠誘導(dǎo)Hela細(xì)胞IER5表達(dá)量上調(diào)。藥物組與對(duì)照組相比，IER5表達(dá)量是對(duì)照組的1.47倍，這表明氯化兩面針堿可能誘導(dǎo)IER5表達(dá)上調(diào)。輻射聯(lián)合藥物組與輻射組相比，IER5表達(dá)量是輻射組的1.21倍，IER5表達(dá)量是對(duì)照組的1.47倍。 結(jié)論： 1宮頸癌組織中IER5基因在輻射劑量20～40Gy之間時(shí)，IER5蛋白表達(dá)上調(diào)，在一定的輻射劑量下，IER5基因隨著輻射劑量增加表達(dá)量大致呈先升高在下降的趨勢(shì)，并且30Gy輻射組IER5基因上調(diào)最明顯。 2氯化兩面針堿能夠抑制宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，并呈一定的“時(shí)間-劑量”依賴性（P0.05）；氯化兩面針堿聯(lián)合輻射后能夠抑制宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，呈一定的“時(shí)間-劑量”依賴性（P0.05）。其機(jī)制可能與上調(diào)輻射敏感基因IER5有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R737.33

【參考文獻(xiàn)】

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1 童旭輝;董淑英;陶亮;;黃芩素對(duì)人子宮頸癌HeLa細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年06期

2 許忠新;單鐵英;蘇安英;楊書(shū)良;;枸杞多糖對(duì)人外周血巨噬細(xì)胞活性的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2010年16期

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4 王菁鵬;林青;;姜黃素誘導(dǎo)宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡及其作用機(jī)制的研究[J];華夏醫(yī)學(xué);2006年04期

5 吳婉瑩;高志剛;李云谷;丁怡;;白英和歐白英的化學(xué)成分與藥理活性[J];國(guó)外醫(yī)藥(植物藥分冊(cè));2001年06期

6 田衛(wèi)紅;田芳;張振宇;;辣椒素聯(lián)合DDP對(duì)宮頸癌HeLa229細(xì)胞增殖及侵襲力的影響[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2009年03期

7 劉穎;高超;蔡曉敏;郝興芝;;白花蛇舌草對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞端粒酶活性及hTERT基因表達(dá)的影響[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2010年02期

8 黃治勛;李志和;;兩面針抗腫瘤有效成分的研究[J];化學(xué)學(xué)報(bào);1980年06期

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10 周學(xué)武;陳建榮;劉桂艷;毛惠玲;;白藜蘆醇對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡、增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年20期

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本文編號(hào)：2416932