發(fā)布時間：2018-11-18 07:34

【摘要】：目的探索白假絲酵母菌總RNA簡單、快捷、高效的提取方法。方法選取昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科門診2011年7月—2013年3月有臨床癥狀且陰道分泌物鏡檢陽性的外陰陰道假絲酵母菌病(VVC)患者的白假絲酵母菌40株,選用不同時間與溫度組合下的4種溶壁酶(Lyticase)破壁方案(A方案:37℃、12 h,B方案:25℃、12 h,C方案:37℃、24 h,D方案:25℃、24 h)進行RNA提取,將所得RNA進行熒光定量PCR(q PCR)反應(yīng)驗證RNA的濃度及純度,并進行管家基因18S rRNA的檢測。結(jié)果 D方案提取獲得的RNA濃度高于A、B、C方案(P0.05);B方案提取獲得的RNA濃度高于A、C方案(P0.05);而A、C兩方案提取獲得的RNA濃度比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。B、D方案獲得的RNA純度高于A、C方案(P0.05);但A、C方案獲得的RNA純度比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);B方案提取獲得的RNA純度高于D方案(P0.05)。A、B、C、D方案提取的RNA擴增產(chǎn)物Ct轉(zhuǎn)化值比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);其中B、D方案q PCR擴增產(chǎn)物Ct轉(zhuǎn)化值高于A、C方案(P0.05);但B、D方案及A、C方案之間的q PCR擴增產(chǎn)物Ct轉(zhuǎn)化值比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。管家基因18S rRNA的引物擴增出的產(chǎn)物片段大小為150 bp。結(jié)論以Lyticase破壁提取白假絲酵母菌具有簡單易行及RNA產(chǎn)量高、純度好的優(yōu)點,值得臨床推廣應(yīng)用。
[Abstract]:Objective to explore a simple, fast and efficient method for extracting total RNA from Candida albicans. Methods from July 2011 to March 2013, 40 strains of Candida albicans from (VVC) patients with vulvovaginal candidiasis were selected from gynecology and obstetrics outpatient of the first affiliated Hospital of Kunming Medical University. Four kinds of wall breaking schemes (A: 37 鈩，

本文編號：2339332