【摘要】：目的 :探討鏈霉親和素(streptavidin,SA)修飾的量子點(diǎn)(quantum dots,QDs)聯(lián)合生物素標(biāo)記的葉酸(folic acid,FA)在卵巢癌SKOV3細(xì)胞體外成像中的應(yīng)用價(jià)值。方法 :采用活潑酯法合成SA-QDs復(fù)合物,并用同樣的方法以聚酰胺-胺(polyamidoamine,PAMAM)樹(shù)狀分子為載體合成生物素化FA-PAMAM。采用生物素化FA-PAMAM聯(lián)合SA-QDs熒光探針標(biāo)記葉酸受體(folate receptor,FR)高表達(dá)的SKOV3細(xì)胞,同時(shí)以采用游離FA預(yù)處理的SKOV3細(xì)胞和FR低表達(dá)的肺腺癌A549細(xì)胞為對(duì)照,驗(yàn)證該熒光探針靶向SKOV3細(xì)胞的特異性。隨后,以未用PAMAM為載體[生物素化FA-聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)聯(lián)合SA-QDs熒光探針]或無(wú)生物素-鏈霉親和素放大系統(tǒng)的熒光探針(FA-PAMAM-QDs)為對(duì)照,驗(yàn)證該探針的熒光信號(hào)雙重放大效應(yīng)。結(jié)果 :FR高表達(dá)的SKOV3細(xì)胞可被生物素化FA-PAMAM聯(lián)合SA-QDs的熒光探針特異性識(shí)別,平均熒光強(qiáng)度高達(dá)114.92±2.87,顯著高于FA預(yù)處理后再用該探針進(jìn)行檢測(cè)的SKOV3細(xì)胞(57.86±7.59)和FR低表達(dá)的肺腺癌A549細(xì)胞(14.94±0.83)(P值均0.000 1)。在雙重放大效應(yīng)的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中,生物素化FA-PAMAM聯(lián)合SA-QDs熒光探針標(biāo)記的SKOV3細(xì)胞的平均熒光強(qiáng)度為120.89±3.80,其熒光強(qiáng)度明顯高于生物素化FA-PEG聯(lián)合SA-QDs熒光探針標(biāo)記的SKOV3細(xì)胞的77.50±2.43和FA-PAMAMQDs熒光探針標(biāo)記的SKOV3細(xì)胞的47.81±1.35(P值均0.000 1)。結(jié)論 :構(gòu)建獲得了一種特異性靶向卵巢癌SKOV3細(xì)胞的生物素化FAPAMAM聯(lián)合SA-QDs熒光探針,該探針在卵巢癌早期診斷方面具有潛在應(yīng)用價(jià)值。
[Abstract]:Aim: to investigate the value of streptavidin (streptavidin,SA) modified quantum dots (quantum dots,QDs) combined with biotin labeled folic acid (folic acid,FA) in the imaging of ovarian cancer SKOV3 cells in vitro. Methods: SA-QDs complex was synthesized by active ester method, and biotinylated FA-PAMAM. was synthesized by the same method using polyamide-amine (polyamidoamine,PAMAM) dendrimer as carrier. Biotin FA-PAMAM and SA-QDs fluorescence probe were used to label SKOV3 cells with high expression of folate receptor (folate receptor,FR), while SKOV3 cells pretreated with free FA and A549 cells with low expression of FR were used as control. The specificity of the fluorescent probe targeting SKOV3 cells was verified. Then, the double amplification effect of PAMAM was verified by using PAMAM as carrier [biotinylated FA- polyethylene glycol (polyethylene glycol,PEG) combined with SA-QDs fluorescent probe] or biotin-streptavidin amplification system (FA-PAMAM-QDs) as control. Results SKOV3 cells with high expression of 10% FR could be specifically recognized by the fluorescent probe of biotinylated FA-PAMAM combined with SA-QDs. The average fluorescence intensity was 114.92 鹵2.87, which was significantly higher than that of SKOV3 cells (57.86 鹵7.59) and A549 cells (14.94 鹵0.83) (P, 0.000 1). In the double amplification experiment, The average fluorescence intensity of SKOV3 cells labeled with biotinylated FA-PAMAM and SA-QDs probe was 120.89 鹵3.80, which was significantly higher than that of SKOV3 cells labeled with biotinylated FA-PEG and SA-QDs probe (77.50 鹵2.43) and FA-PAMAMQDs labeled SKOV3 cells (47.81 鹵1.35, P = 0.000 1). Conclusion: a biotinylated FAPAMAM combined with SA-QDs fluorescence probe targeting ovarian cancer SKOV3 cells was constructed. The probe has potential application value in early diagnosis of ovarian cancer.
【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81201691) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金資助項(xiàng)目(編號(hào):20123601120005) 江西省科技計(jì)劃資助項(xiàng)目(編號(hào):2015BBG70077)~~
【分類號(hào)】：R737.31

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2201723