本文選題：卵巢癌 + miR-21��； 參考：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：背景:卵巢癌是世界范圍內(nèi)常見的婦科惡性腫瘤之一,該病的病情發(fā)展迅速,每年約有140000例患者因卵巢癌導(dǎo)致死亡。由于患者在患病之初沒有任何明顯癥狀,同時(shí)還缺少有效的檢測(cè)手段,因此約75%的患者在就診時(shí)已屬晚期。而在近年來的大量的研究之中,有關(guān)的研究人員已在其中得知miRNA參與許多的惡性腫瘤產(chǎn)生與其發(fā)展進(jìn)程,具有類似癌基因或者抑癌基因的功能。有報(bào)道表明,一些miRNA對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移等存在異常調(diào)節(jié),其中亦包括卵巢癌。TLRs是一類高度保守的模式識(shí)別受體,介導(dǎo)著機(jī)體的損傷修復(fù),當(dāng)TLRs的信號(hào)被過度活化或活化不足的時(shí)候,就會(huì)導(dǎo)致機(jī)體功能出現(xiàn)異常表現(xiàn),嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成一些腫瘤的產(chǎn)生。炎癥通常是腫瘤產(chǎn)生與其發(fā)展的關(guān)鍵因素之一,這也是腫瘤免疫微環(huán)境的主要特征,而惡性腫瘤本身即是機(jī)體異常損傷的過程。TLR4是Toll樣受體家族中的一個(gè)成員,為一類固有免疫分子,其在多種惡性腫瘤細(xì)胞中存在高表達(dá),與腫瘤細(xì)胞的凋亡過程具有十分密切的關(guān)系。目的:本研究擬觀察miR-21在卵巢癌組織中的表達(dá)及意義,分析miR-21表達(dá)變化對(duì)卵巢癌細(xì)胞凋亡和增殖的影響,并探究TLR4信號(hào)活化對(duì)卵巢癌細(xì)胞中的miR-21表達(dá)的調(diào)控作用,以及其對(duì)卵巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,旨在為了解炎癥相關(guān)腫瘤的發(fā)生機(jī)制并為卵巢癌的臨床診斷及靶向治療提供可靠依據(jù)。方法:(1)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)卵巢癌患者癌組織及其相應(yīng)正常卵巢組織中miR-21和TLR4 m RNA的表達(dá)情況;采用western blot法檢測(cè)卵巢癌組織及其相應(yīng)正常卵巢組織中TLR4蛋白的表達(dá)情況;并分析卵巢癌患者癌組織中miR-21和TLR4 m RNA的表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)的相關(guān)性。(2)將miR-21 mimic轉(zhuǎn)染卵巢癌SKOV-3細(xì)胞以增強(qiáng)細(xì)胞中miR-21的表達(dá);檢測(cè)轉(zhuǎn)染后SKOV-3細(xì)胞中miR-21的表達(dá)情況;MTT法分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染后24、48、72和96小時(shí)卵巢癌細(xì)胞SKOV-3的增殖情況;Annexin V-fitc/pi雙染色及流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染后0、24、48、72、96小時(shí)時(shí)卵巢癌細(xì)胞SKOV-3的凋亡情況;Transwe II小室法對(duì)轉(zhuǎn)染后的SKOV-3細(xì)胞侵襲能力的情況進(jìn)行測(cè)定。(3)以TLR4配體LPS刺激卵巢癌SKOV-3細(xì)胞6、12、18、24小時(shí),采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)SKOV-3細(xì)胞中miR-21的表達(dá)變化情況;Western blot法檢測(cè)TLR4信號(hào)活化后SKOV-3細(xì)胞中NF-κBp65的表達(dá)和磷酸化情況;應(yīng)用NF-κB抑制劑PDTC處理經(jīng)LPS刺激后的SKOV-3細(xì)胞30分鐘,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)SKOV-3細(xì)胞中miR-21的變化情況;轉(zhuǎn)染miR-21抑制劑和陰性對(duì)照后,Annexin-V/PI雙標(biāo)法檢測(cè)SKOV-3細(xì)胞凋亡情況;MTT法檢測(cè)SKOV-3細(xì)胞增殖情況;Transwe II小室法檢測(cè)SKOV-3細(xì)胞的侵襲能力。結(jié)果:(1)miR-21在卵巢癌組織中的表達(dá)顯著高于其在相應(yīng)正常卵巢組織中的表達(dá)(P0.01);TLR4 m RNA及其蛋白在卵巢癌組織中的表達(dá)顯著高于其在相應(yīng)正常卵巢組織中的表達(dá)(P0.01);miR-21和TLR4 m RNA的表達(dá)與卵巢癌組織學(xué)分級(jí)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。(2)轉(zhuǎn)染miR-21 mimic后SKOV-3細(xì)胞中的miR-21含量顯著升高(P0.05);miR-21能夠促進(jìn)SKOV-3細(xì)胞的增殖,抑制其凋亡,同時(shí)還能提高其侵襲能力。(3)LPS刺激致TLR4信號(hào)活化能夠時(shí)間依賴性地上調(diào)miR-21的表達(dá)(P0.05);TLR4信號(hào)能夠時(shí)間依賴性地上調(diào)NF-κB的活化,NF-κB抑制劑PDTC能明顯抑制TLR4信號(hào)誘導(dǎo)的SKOV-3細(xì)胞的miR-21上調(diào)(P0.05);與陰性對(duì)照組相比,miR-21抑制劑組SKOV-3細(xì)胞的凋亡率明顯增高(P0.05);SKOV-3細(xì)胞的增殖能力明顯降低(P=0.0350.05);miR-21表達(dá)受抑制后使SKOV-3細(xì)胞的侵襲能力較對(duì)照組顯著降低(P0.05)。結(jié)論:(1)miR-21和TLR4 m RNA在卵巢癌組織中呈高表達(dá),且與患者的卵巢癌組織學(xué)分級(jí)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān);(2)miR-21能促進(jìn)卵巢癌SKOV-3細(xì)胞的增殖和侵襲,并抑制其凋亡;(3)TLR4信號(hào)通路的活化能夠上調(diào)卵巢癌SKOV-3細(xì)胞中miR-21的表達(dá),其機(jī)制與NF-κB的活化有關(guān);抑制miR-21的表達(dá)促進(jìn)了SKOV-3細(xì)胞的凋亡、降低了其增殖能力與侵襲能力。
[Abstract]:BACKGROUND : Ovarian cancer is one of the most common gynecological malignant tumors in the world . The disease is developing rapidly . There are about 140000 patients with ovarian cancer due to ovarian cancer . The expression of miR - 21 in SKOV - 3 cells was significantly higher than that in control group ( P0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.31

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張明;石遠(yuǎn)凱;韓曉紅;;淋巴瘤診斷及預(yù)后分子標(biāo)志物研究進(jìn)展[J];中華血液學(xué)雜志;2015年04期

2 張少波;顧大勇;謝偉東;張雅鷗;林裕龍;;靶向流感病毒H7N9基因片段的人編碼microRNA的生物信息學(xué)分析[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志;2015年01期

3 吳艷萍;張妍;朱久新;樸賢美;李欣;杜越;宋洋;袁威;羅神堅(jiān);呂延杰;;大明膠囊對(duì)STZ誘導(dǎo)的1型糖尿病大鼠胰腺microRNA表達(dá)譜的影響及其靶點(diǎn)分析[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2015年01期

4 李星慧;張政;張毓洪;王建業(yè);魏東;張耀光;楊澤;;EEFSEC基因、染色體17q24和染色體11q13.2基因變異與前列腺癌的關(guān)聯(lián)研究[J];中國(guó)老年保健醫(yī)學(xué);2015年01期

5 張?jiān)孪?李秋麗;王承縉;祁s，

本文編號(hào)：2107147