發(fā)布時(shí)間：2018-07-06 10:28

  本文選題：表位分析 + HPVL��； 參考：《現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展》2015年07期

【摘要】：目的:選擇人乳頭瘤病毒(HPV)16L1抗原性最強(qiáng)的一段抗原表位編碼區(qū),構(gòu)建原核表達(dá)載體并利用大腸桿菌表達(dá)抗原蛋白,為HPV疫苗的研究及宮頸癌的診斷奠定基礎(chǔ)。方法:借助DNAstar軟件分析HPV16L1的CDS區(qū),選擇抗原性最強(qiáng)的一段抗原表位編碼區(qū),提取HPV16L1編碼區(qū)的DNA。目的 DNA和p ET32a質(zhì)粒分別進(jìn)行雙酶切,連接并轉(zhuǎn)化DH5α大腸桿菌,篩選陽(yáng)性克隆后轉(zhuǎn)化BL21大腸桿菌,誘導(dǎo)產(chǎn)生HPV16L1重組蛋白,通過(guò)市售抗體對(duì)重組蛋白的抗原特異性進(jìn)行鑒定。結(jié)果:利用DNAstar軟件,選擇了抗原表位較富集的堿基序列919~1314bp區(qū)段,按常規(guī)制備重組蛋白的方法成功制備HPV16L1重組蛋白�？贵w鑒定表明,制備的重組蛋白抗原特異性良好。結(jié)論:有針對(duì)性地制備HPV16L1重組蛋白,可避免其他抗原表位的干擾。經(jīng)鑒定,HPV16L1重組蛋白抗原特異性良好,將為HPV疫苗的研究及宮頸癌的診斷奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Aim: to construct the prokaryotic expression vector of human papillomavirus (HPV) 16L1 antigen epitope coding region and to express antigen protein by E. coli, so as to lay a foundation for the study of HPV vaccine and the diagnosis of cervical cancer. Methods: the CDS region of HPV16 L1 was analyzed by DNAstar software, and the most antigenic epitope coding region was selected, and the DNAs of HPV16 L1 coding region were extracted. Objective DNA and pET32a plasmids were digested respectively, ligated and transformed into DH5 偽 Escherichia coli, then transformed into BL21 Escherichia coli after screening positive clones, and induced the production of HPV16L1 recombinant protein. The antigen specificity of the recombinant protein was identified by market antibody. Results: the recombinant protein HPV16 L1 was successfully prepared by using DNAstar software to select the 919~1314bp region of the base sequence enriched by antigen epitope and to prepare the recombinant protein according to the routine method. Antibody identification showed that the prepared recombinant protein antigen had good specificity. Conclusion: the preparation of HPV16 L1 recombinant protein can avoid the interference of other antigenic epitopes. The specificity of HPV16 L1 recombinant protein antigen is good, which will lay a foundation for the study of HPV vaccine and the diagnosis of cervical cancer.
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)V東省婦女兒童醫(yī)院婦科;廣州醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)V東省婦女兒童醫(yī)院麻醉科;
【分類號(hào)】：R737.33

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本文編號(hào)：2102479