本文選題：核糖核苷酸還原酶亞單位M1 + 核糖核酸還原酶亞單位M2　； 參考：《寧波大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的核糖核苷酸還原酶(Ribonucleotide reductase，RR)是細胞內(nèi)DNA復制和損傷修復中的限速酶，在細胞增殖以及腫瘤增殖和浸潤轉移中起著重要作用。宮頸癌在女性高發(fā)惡性腫瘤中位于第二位，化療是宮頸癌治療的一種重要手段。RR是一些抗腫瘤藥物的作用靶點，吉西他濱（Gemcitabine，GEM）是目前最有效且應用最廣泛的RR抑制劑。本研究通過檢測宮頸癌組織和細胞中RR酶活性及亞基表達水平，探討RR在宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的可能作用；進一步研究吉西他濱與卡鉑(Carboplatin, CBDCA)聯(lián)合用藥對宮頸癌細胞的作用效果。 方法采用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)、Western Blotting和CDP還原法分別檢測宮頸癌組織及癌旁正常組織中RR亞基表達及酶活性，CCK-8法檢測宮頸癌細胞系SiHa、CaSki對GEM、CBDCA單藥及合藥的敏感性，EdU法檢測GEM對宮頸癌細胞DNA合成的影響，Western Blotting和免疫熒光兩種方法檢測藥物對宮頸癌細胞的DNA損傷作用，流式細胞儀檢測GEM、CBDCA單藥及合藥時細胞凋亡情況，并基于Chou-Talalay法計算合用指數(shù)（CI）以分析GEM與CBDCA合用對宮頸癌細胞是否具有協(xié)同作用。 結果宮頸癌組織中的RRM1和RRM2mRNA水平較癌旁正常組織中的表達水平明顯升高(P0.0001)，類似地，RR酶活和亞基蛋白表達水平在宮頸癌組織中的水平也上調(diào)。GEM能抑制宮頸癌細胞DNA合成，CBDCA能誘導DNA損傷，，GEM與CBDCA聯(lián)合作用對宮頸癌細胞具有協(xié)同毒性作用(log10[CI]0)，GEM與CBDCA合用能促進誘導宮頸癌細胞DNA損傷產(chǎn)生和促進細胞凋亡率增加。 結論核糖核苷酸還原酶在宮頸癌中的表達上調(diào)，細胞實驗表明RR抑制劑GEM與宮頸癌一線化療藥物CBDCA合用對宮頸癌細胞產(chǎn)生協(xié)同毒性作用，協(xié)同作用是通過抑制DNA合成和促進細胞凋亡產(chǎn)生的。本研究可能為GEM聯(lián)合CBDCA在宮頸癌的臨床治療應用提供實驗依據(jù)。
[Abstract]:Objective ribonucleotide reductase ( RR ) is a limiting enzyme in DNA replication and repair of cervical cancer , plays an important role in cell proliferation and tumor proliferation and invasion .
To further study the effect of gemcitabine and carboplatin ( CBDCA ) on cervical cancer cells .

Methods The expression of RR subunits in cervical cancer tissues and adjacent normal tissues was detected by real - time fluorescence quantitative PCR ( qRT - PCR ) , Western Blotting and CDP reduction . The effects of GEM and CBDCA alone on DNA synthesis of cervical cancer cells were detected by the method of Western Blotting and CDP . The effect of GEM on DNA synthesis of cervical cancer cells was detected by the method of Western Blotting and Immunofluorescence .

Results The levels of RRM1 and RRM2mRNA in cervical cancer tissues were significantly higher than those in normal tissues ( P0.05 ) .

Conclusion The expression of ribonucleotide reductase in cervical cancer is up - regulated . The results suggest that the combination of the RR inhibitor GEM and the first - line chemotherapy drug CBDCA has a synergistic effect on cervical cancer cells . The synergistic effect is the inhibition of DNA synthesis and the promotion of apoptosis . This study may provide experimental basis for the application of GEM and CBDCA in the clinical treatment of cervical cancer .
【學位授予單位】：寧波大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R737.33

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 章文華;;子宮頸癌防治展望[J];癌癥進展;2010年02期

2 Termrungruanglert W;Tresukosol D;Vasuratna A;程洪艷;;IB2期宮頸鱗狀細胞癌施行根治性子宮切除術后聯(lián)合應用雙氟胞苷和順鉑的新輔助化療方案的療效[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘(婦產(chǎn)科學分冊);2005年10期

3 劉愛華;王黎明;;宮頸癌組織中RRM1的表達及意義[J];中國實用醫(yī)藥;2011年09期

本文編號：2023104