發(fā)布時間：2018-06-15 15:42

  本文選題：宮頸病變 + 葉酸受體介導(dǎo)上皮特殊染色液　； 參考：《中國人民解放軍醫(yī)學院》2016年博士論文

【摘要】：目的：評價葉酸受體介導(dǎo)上皮特殊染色液、腫瘤細胞周期和表達相關(guān)蛋白和HPV E6/E7 mRNA分型檢測在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價值,明確葉酸受體、腫瘤細胞周期和表達相關(guān)蛋白在宮頸病變組織和宮頸脫落細胞中的表達。方法：1、對231例門診欲行宮頸癌篩查者,前瞻性行液基細胞學檢查(TCT)、人乳頭瘤病毒檢測(HPV)和葉酸受體介導(dǎo)上皮特殊染色液(FRD)檢查,并以病理診斷為金標準,計算并對比TCT.HPV和FRD的敏感度、特異度等診斷價值指標。2、通過熒光定量PCR方法,對153例宮頸脫落細胞行HPV DNA分型、HPV E6/E7 mRNA分型,并分析HPV DNA與E6/E7 mRNA檢測的一致性。以47例病理診斷為金標準,計算并對比不同型別HPV DNA陽性者、不同型別HPV E6/E7 mRNA陽性者患高級別宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌的相對危險度(OR)。3、通過免疫組織化學方法,檢測231例病理組織中葉酸受體、腫瘤細胞周期和表達相關(guān)蛋白的表達,并采用熒光定量PCR,檢測宮頸脫落細胞中葉酸受體、腫瘤細胞周期和表達相關(guān)蛋白mRNA的表達；同時,向?qū)m頸癌細胞株C33A中轉(zhuǎn)染攜帶HPV E6、E7基因的質(zhì)粒,通過Western Blot檢測葉酸受體的表達變化。結(jié)果：1、高級別宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌發(fā)生的平均年齡為40.15±8.03歲。FRD診斷敏感度77.53%,特異度55.63%,與TCT相比無顯著統(tǒng)計學差異。FRD診斷符合率64.07%,高于HPV和TCT,有顯著統(tǒng)計學差異。FRD使用的小棉簽對宮頸病變的診斷效率較低。與ASCUS時診斷TCT異常相比,≥ASCUS時診斷TCT異常的診斷效率更高。HPV檢測對CIN2以上病變的陰性預(yù)測值為100%。HPV定量(HC2)與HPV分型診斷的敏感度和特異度無顯著統(tǒng)計學差異。2、HPV16的感染率最高,其次是HPV52、HPV58。HPV E6/E7 mRNA檢測的陽性率與HPV DNA拷貝數(shù)相關(guān)。高危型HPV混合感染和混合低危型HPV感染均不影響HPV E6/E7 mRNA分型檢測。HPV 16、18 DNA陽性者發(fā)生CIN2以上病變的風險顯著高于其他類型感染。HPV E6/E7 mRNA陽性者發(fā)生CIN2以上病變的風險顯著高于單純HPV DNA陽性者。HPV 16、18型E6/E7 mRNA陽性者,發(fā)生CIN2以上病變風險,顯著高于HPV DNA陽性者和其他型HPV E6/E7 mRNA陽性者。3、葉酸受體、CREPT在組織病理學診斷的宮頸炎和低級別上皮內(nèi)瘤變中均低表達,在高級別上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌中高表達,且有顯著統(tǒng)計學差異。葉酸受體、CREPT mRNA在不同程度宮頸病變者的脫落細胞中無顯著統(tǒng)計學差異。瞬時轉(zhuǎn)染HPV E6、E7前后,C33A細胞中葉酸受體表達未見變化。結(jié)論：1、FRD診斷敏感度和特異度與TCT相比無顯著統(tǒng)計學差異,且診斷符合率高于HPV和TCT。HC2與HPV分型診斷的敏感度和特異度無顯著統(tǒng)計學差異,HPV檢測對CIN2以上病變的陰性預(yù)測值極高。2、HPV E6/E7 mRNA陽性者發(fā)生CIN2以上病變的風險顯著高于單純HPV DNA陽性者。HPV 16、18型E6/E7 mRNA陽性者,發(fā)生CIN2以上病變風險,顯著高于單純HPV DNA陽性者和其他型HPV E6/E7 mRNA陽性者。3、葉酸受體、CREPT在組織病理學診斷的宮頸炎和低級別宮頸上皮內(nèi)瘤變中低表達,在高級別宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌中高表達。葉酸受體、CREPT mRNA在不同程度宮頸病變者的脫落細胞中無顯著統(tǒng)計學差異。瞬時轉(zhuǎn)染HPV E6、E7前后,C33A細胞中葉酸受體表達未見變化。轉(zhuǎn)染E7、共轉(zhuǎn)染E6/E7后,CREPT的表達略有升高。
[Abstract]:Objective: To evaluate the application value of folic acid receptor mediated epithelial specific staining, tumor cell cycle and expression related protein and HPV E6/E7 mRNA typing in cervical cancer screening, and to clarify the expression of folic acid receptor, tumor cell cycle and expression related protein in cervical lesions and cervix exfoliative cells. Methods: 1, 231 outpatients For cervical cancer screening, prospective liquid based cytological examination (TCT), human papillomavirus detection (HPV) and folic acid receptor mediated epithelial special staining (FRD) examination, and pathological diagnosis as gold standard, were used to calculate and compare the sensitivity and specificity of TCT.HPV and FRD,.2, and 153 cases of cervical removal by fluorescence quantitative PCR. HPV DNA typing, HPV E6/E7 mRNA typing, and the consistency between HPV DNA and E6/E7 mRNA detection were performed. 47 cases of pathological diagnosis were the gold standard, and different types of HPV DNA positive were calculated and compared. The relative risk degree of high grade cervical intraepithelial neoplasia and uterine cervix cancer was affected by different types of HPV. The expression of folic acid receptor, tumor cell cycle and expression related protein in 231 cases of pathological tissue were detected, and fluorescence quantitative PCR was used to detect the expression of folic acid receptor, tumor cell cycle and expression related protein mRNA in cervical exfoliative cells; meanwhile, the plasmid carrying HPV E6, E7 gene was transfected into the cell C33A of cervix cancer, and the plasmid of E7 gene was passed through We Stern Blot detected the changes in the expression of folate receptor. Results: 1, the average age of high grade cervical intraepithelial neoplasia and cervical cancer was 40.15 + 8.03 years old.FRD diagnostic sensitivity 77.53%, specificity 55.63%, compared with TCT, there was no significant difference in.FRD diagnostic coincidence rate 64.07%, higher than HPV and TCT, there was significant statistical difference of.FRD used small cotton. The diagnostic efficiency of the cervical lesions was lower. Compared with the diagnosis of TCT abnormality when ASCUS, the diagnostic efficiency of the diagnosis of TCT abnormalities was higher than that of ASCUS. The negative predictive value of.HPV detection to the above CIN2 lesions was no significant difference between 100%.HPV quantitative (HC2) and HPV type diagnosis,.2, HPV16 infection rate was the highest, followed by HPV52. The positive rate of V58.HPV E6/E7 mRNA detection is related to the number of HPV DNA copies. High risk HPV mixed infection and mixed low risk HPV infection do not affect HPV E6/E7 mRNA type detection. The risk of.HPV 16,18 is significantly higher than that of other types of infection. .HPV 16,18 E6/E7 mRNA positive individuals with positive HPV DNA positive risk were significantly higher than those of HPV DNA positive and other HPV E6/E7 mRNA. The folate receptor was low in the pathological diagnosis of cervicitis and low grade intraepithelial neoplasia, and high level in high grade intraepithelial neoplasia and cervical cancer. There was no significant statistical difference between the folic acid receptor and CREPT mRNA in the exfoliated cells of different degree cervical lesions. Transient transfection of HPV E6, E7, and C33A cells did not change. Conclusion: 1, the sensitivity and specificity of FRD diagnosis are not significantly different from TCT, and the diagnostic coincidence rate is high. There was no significant difference in the sensitivity and specificity between the HPV and the TCT.HC2 and HPV types. The negative predictive value of the HPV detection was very high in the negative predictive value of the lesions above CIN2, and the risk of the CIN2 above the HPV E6/E7 mRNA positive was significantly higher than that of the simple HPV DNA. HPV DNA positive and other type HPV E6/E7 mRNA positive persons.3, folic acid receptor, CREPT in histopathological diagnosis of cervicitis and low grade cervical intraepithelial neoplasia, high expression in high level cervical intraepithelial neoplasia and cervical cancer. Folic acid receptor, CREPT mRNA in different degrees of cervical lesions of the exfoliated cells of no significant The expression of folate receptor in C33A cells did not change before and after transient transfection of HPV E6 and E7. After transfection of E7, the expression of CREPT increased slightly after transfection of E6/E7.
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.33

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本文編號：2022561