本文選題：宮頸癌 + miR-　； 參考：《中國病理生理雜志》2017年05期

【摘要】：目的:研究抑制miR-421表達(dá)增強宮頸癌細(xì)胞放療敏感性的分子機制。方法:運用脂質(zhì)體2000將miR-421 inhibitor轉(zhuǎn)染4株宮頸癌細(xì)胞系HeLa、SiHa、C33A和CaSki,以轉(zhuǎn)染陰性核苷酸為對照,real-time PCR檢測子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞ESC細(xì)胞和4株宮頸癌細(xì)胞中miR-421的表達(dá)水平;轉(zhuǎn)染的細(xì)胞經(jīng)不同劑量電離輻射(0、2、4、6和8 Gy)處理48 h后運用MTT法、ELISA和Annexin V-FITC/PI染色法聯(lián)合流式細(xì)胞術(shù)分別測定細(xì)胞活力、乳酸脫氫酶(LDH)漏出率和細(xì)胞凋亡率;運用Western blot檢測細(xì)胞中cleaved caspase-9、caspase-9、cleaved PARP、PARP、Bcl-2和Bax蛋白的水平。結(jié)果:miR421在ESC細(xì)胞中低表達(dá),而在4株宮頸癌細(xì)胞中高表達(dá),轉(zhuǎn)染miR-421 inhibitor后miR-421顯著低于陰性對照組(P0.05)。相同條件下,輻照后低表達(dá)miR-421的宮頸癌細(xì)胞活力和LDH漏出率顯著低于陰性對照組,72 h的細(xì)胞凋亡率明顯增加(P0.05)。Western blot結(jié)果顯示,電離輻射后與陰性對照組比較,低表達(dá)miR-421的宮頸癌細(xì)胞中cleaved caspase-9、cleaved PARP和Bcl-2的蛋白水平明顯增高,而Bax蛋白水平顯著降低(P0.05)。結(jié)論:miR-421在正常子宮內(nèi)膜上皮ESC細(xì)胞中低表達(dá),而在宮頸癌細(xì)胞系中高表達(dá);下調(diào)miR-421表達(dá)能抑制宮頸癌細(xì)胞的活力,顯著增強宮頸癌細(xì)胞的輻射敏感性,其機制至少部分通過激活caspase-9細(xì)胞凋亡通路進(jìn)而促進(jìn)抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)和抑制促凋亡蛋白Bax表達(dá)而實現(xiàn)。
[Abstract]:Objective: to study the molecular mechanism of inhibiting miR-421 expression to enhance the radiosensitivity of cervical cancer cells. Methods: Liposome 2000 was used to transfect miR-421 inhibitor into four cervical cancer cell lines (HeLa La-SiHaHaC33A and CaSki). The expression of miR-421 in endometrial epithelial cells (ESC) and four cervical carcinoma cells was detected by real-time PCR with transfection negative nucleotides as control. The transfected cells were treated with different doses of ionizing radiation for 48 h. The cell viability, the leakage rate of lactate dehydrogenase (LDH) and apoptosis were measured by MTT Elisa and Annexin V-FITC/PI staining combined with flow cytometry. The levels of Bcl-2 and Bax protein in cleaved caspase-9, caspase-9 and caspase-9 were detected by Western blot. Results the expression of miR-421 in ESC cells was significantly lower than that in negative control group (P 0.05), but was highly expressed in 4 cervical cancer cell lines after transfection of miR-421 inhibitor. Under the same conditions, the viability of cervical cancer cells with low expression of miR-421 and the leakage rate of LDH after irradiation were significantly lower than those of the negative control group for 72 h. The results of P0.05 +. Western blot showed that the cell viability and LDH leakage rate after ionizing radiation were significantly higher than those in the negative control group. The protein levels of cleaved caspase-9 cleaved PARP and Bcl-2 were significantly increased in cervical cancer cells with low expression of miR-421, while the level of Bax protein was significantly decreased (P 0.05). Conclusion the low expression of ESC in normal endometrial epithelium and the high expression in cervical carcinoma cell line, the down-regulation of miR-421 expression can inhibit the viability of cervical cancer cells and significantly enhance the radiosensitivity of cervical cancer cells. The mechanism is realized at least in part by activating the apoptosis pathway of caspase-9 cells and thus promoting the expression of anti-apoptotic protein Bcl-2 and inhibiting the expression of pro-apoptotic protein Bax.
【作者單位】： 濟南市第五人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;中國計劃生育研究所細(xì)胞生物學(xué)實驗室;
【基金】：山東省醫(yī)藥衛(wèi)生資助項目(No.2013WS0010)
【分類號】：R730.23

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1990550