發(fā)布時間：2018-05-17 18:47

  本文選題：BPA + 子宮內(nèi)膜細(xì)胞　； 參考：《浙江大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:建立人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外培養(yǎng)模型,探討B(tài)PA對人子宮內(nèi)膜細(xì)胞SGK1表達(dá)的影響,為進(jìn)一步研究BPA是否通過SGK1干擾子宮內(nèi)膜容受性而導(dǎo)致不孕提供依據(jù)。材料與方法:構(gòu)建人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外混合培養(yǎng)方法;實驗設(shè)對照組及BPA組。對照組使用常規(guī)DEME/F12培養(yǎng)液;BPA組分為3組,分別為DEME/F12培養(yǎng)液中加終濃度為0.01ug/mlBPA、0.1ug/mlBPA、lug/mlBPA。BPA 干預(yù)時間為 24 小時。檢查細(xì)胞形態(tài),同時進(jìn)行角蛋白和波形蛋白免疫熒光染色,為實驗的進(jìn)行提供體外混合人子宮內(nèi)膜細(xì)胞。利用免疫熒光方法測定4組SGK1蛋白表達(dá)情況。通過熒光定量PCR技術(shù),檢測4組子宮內(nèi)膜細(xì)胞上基因SGK1的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:離體培養(yǎng)的人子宮內(nèi)膜細(xì)胞,接種24 h后細(xì)胞大多能貼壁。上皮細(xì)胞角蛋白呈陽性表達(dá),波形蛋白呈陰性表達(dá);間質(zhì)細(xì)胞波形蛋白呈陽性表達(dá),角蛋白表達(dá)陰性。人子宮內(nèi)膜細(xì)胞存在SGK1表達(dá)。免疫熒光結(jié)果提示,隨著BPA暴露濃度的增加,SGK1蛋白熒光強(qiáng)度逐漸下降。RT-PCR結(jié)果提示,BPA下調(diào)子宮內(nèi)膜細(xì)胞SGK1 mRNA的表達(dá)。結(jié)論:BPA影響子宮內(nèi)膜細(xì)胞SGK1蛋白及mRNA的表達(dá),提示BPA暴露可能影響子宮內(nèi)膜容受性。
[Abstract]:Aim: to establish a human endometrial cell culture model in vitro to investigate the effect of BPA on the expression of SGK1 in human endometrial cells, and to provide a basis for further study on whether BPA interferes with endometrial receptivity by SGK1. Materials and methods: the method of mixed culture of human endometrial cells in vitro was constructed, and the control group and BPA group were set up. The control group was divided into three groups using the conventional DEME/F12 medium. The final concentration of DEME/F12 was 0.01ug- / ml BPA-0.1ug- / ml BPA-lug / ml BPA.BPA for 24 hours. Cell morphology was examined and keratin and vimentin immunofluorescence staining were performed to provide a mixture of human endometrial cells in vitro. The expression of SGK1 protein in 4 groups was detected by immunofluorescence method. The level of mRNA expression of SGK1 gene on endometrial cells was detected by fluorescence quantitative PCR technique. Results: most of the cultured human endometrial cells could adhere to the wall 24 h after inoculation. Positive expression of keratin and negative expression of vimentin in epithelial cells, positive expression of vimentin and negative expression of keratin in interstitial cells. There is SGK1 expression in human endometrial cells. The results of immunofluorescence showed that the fluorescence intensity of SGK1 protein decreased gradually with the increase of BPA exposure concentration. RT-PCR results suggested that BPA down-regulated the expression of SGK1 mRNA in endometrial cells. ConclusionThe expression of SGK1 protein and mRNA in endometrial cells was affected by WBPA, suggesting that BPA exposure might affect endometrial receptivity.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R711.6

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本文編號：1902452