本文選題：炎癥介質(zhì) + 自發(fā)性早產(chǎn)�。� 參考：《第二軍醫(yī)大學》2016年博士論文

【摘要】：背景:早產(chǎn)(Preterm Birth,PTB)是指在妊娠不滿37周的分娩,是導致新生兒發(fā)病和死亡的重要原因,同時也是導致嬰幼兒發(fā)生諸如腦癱、發(fā)育遲緩、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變、慢性肺部疾病以及聽覺和視覺障礙等并發(fā)癥和后遺癥的重要因素。PTB可分為自發(fā)性早產(chǎn)(Spontaneous Preterm Birth,SPTB)和治療性PTB(Therapeutic Preterm Birth,TPTB)兩種。約70%的PTB為SPTB,SPTB中有50%是胎膜早破(Premature Rupture of Membranes,PROM)導致的,又稱為早產(chǎn)胎膜早破(Preterm Rupture of Membranes,PPROM)。流行病學研究表明SPTB具有家族聚集現(xiàn)象、明顯的種族差異性以及復發(fā)性;關(guān)聯(lián)研究也顯示許多與感染、炎癥和先天免疫反應相關(guān)的基因多態(tài)性是SPTB發(fā)生的危險因素,可見遺傳因素在SPTB的發(fā)生機制中具有重要作用。SPTB的病因和發(fā)病機制仍不十分明確,研究表明,宮內(nèi)感染和炎癥性反應是導致SPTB及PPROM的重要原因。而且,不論是否有感染發(fā)生,SPTB及PPROM都與調(diào)節(jié)炎癥和免疫反應的炎癥細胞因子、趨化因子、金屬蛋白酶等炎癥介質(zhì)的變化密切相關(guān)。炎癥介質(zhì)基因單核苷酸多態(tài)性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNPs)可以影響SPTB及PPROM發(fā)生的風險,是研究其遺傳易感性很好的候選基因。目前,一些關(guān)于炎癥介質(zhì)基因的SNPs與SPTB遺傳易感性的關(guān)聯(lián)性研究普遍存在樣本數(shù)量小、未校正混雜因素、結(jié)果不一致等問題。而且,由于基因的SNPs存在顯著的種族差異性,國外人群中遺傳易感性的研究結(jié)果也不一定適用于中國人群。因此,有必要在中國人群中進行大樣本系統(tǒng)的SPTB遺傳易感性的研究工作,鑒別出與SPTB的發(fā)生密切相關(guān)的易感基因和SNP,對于揭示PTB的發(fā)病機理、進行早期預防和干預都具有重要意義。目的:研究單核細胞趨化因子-1(Monocyte chemoattractant protein,MCP-1)、調(diào)節(jié)活化正常T細胞表達和分泌的趨化因子(Regulated on activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)、腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白細胞介素-15(Interleukin-15,IL-15)、白細胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、基質(zhì)金屬蛋白酶-8(Matrix metalloproteinases,MMP-8)這些重要炎癥介質(zhì)基因的SNPs與SPTB遺傳易感性的關(guān)聯(lián)性。以獲得具有應用價值的易感基因和SNP,為高風險人群的鑒定、PTB的預防以及將來可能的個性化基因治療提供新的生物學標記。方法:采用基于候選基因的病例—對照研究,病例組包括753例SPTB新生兒,對照組包括681例足月新生兒。病例組按照是否合并PROM,可分為:有PROM組(PPROM組)和無PROM組;按照SPTB新生兒出生時胎齡的大小,可分為3個亞組:超早產(chǎn)組(胎齡≤28周)、極早產(chǎn)組(28周胎齡≤32周)和輕度早產(chǎn)組(33周胎齡≤36周);超早產(chǎn)組和極早產(chǎn)組合并組成重度早產(chǎn)組(胎齡≤32周)。運用傳統(tǒng)的PCR-RFLP(PCR-based restriction fragment length polymorphism analysis,PCR-RFLP)技術(shù)、PCR-測序技術(shù)和最新的Sequenom Mass ARRAY?SNP檢測技術(shù)分別對候選基因的多態(tài)性位點進行SNP分型。每一個SNP位點的等位基因和基因型頻率通過記數(shù)確定,用頻數(shù)(百分率)表示,采用卡方(χ2)檢驗分析病例組和對照組中每個等位基因和基因型的分布頻率。通過Logistic回歸分析矯正母親年齡和嬰兒性別后,在五種遺傳模式中對每個基因的SNP位點與SPTB發(fā)生的關(guān)聯(lián)性進行風險評估,用所得的比值比(odds ratios,ORs)及95%的置信區(qū)間(confidence intervals,CIs)表示風險強度。所有的統(tǒng)計檢驗均為雙側(cè)概率,P0.05被認為有統(tǒng)計學意義。通過酶聯(lián)免疫吸附實驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA),檢測RANTES在SPTB新生兒和足月新生兒血清中的濃度,每一份血清標本都被重復檢測兩次。結(jié)果:1.MCP-1基因G-2518A多態(tài)性位點與SPTB的患病風險無顯著的遺傳學關(guān)聯(lián);與合并或不合并PROM的SPTB的患病風險均無顯著的遺傳學關(guān)聯(lián)。然而,與攜帶至少一個-2518G等位型(GG+GA基因型)的個體相比,攜帶-2518AA基因型的個體發(fā)生超早產(chǎn)(OR 2.74;95%CI,1.10-6.72;P=0.014)和極早產(chǎn)(OR 2.07;95%CI,1.27-3.36;P=0.005)的風險顯著升高。即使將超早產(chǎn)和極早產(chǎn)新生兒合并起來,攜帶-2518 AA基因型的個體發(fā)生SPTB的風險仍然顯著升高(OR 2.23;95%CI,1.40-3.54;P0.001)。2.RANTES基因In1.1T/C多態(tài)性位點的CC基因型可顯著增加SPTB的患病風險(OR 1.44;95%CI,1.01-2.05;P=0.043)。相對于T等位型(TT+TC基因型),CC基因型與不合并PROM的SPTB的患病風險升高有臨界的相關(guān)性(OR 1.48;95%CI,1.00-2.19;P=0.05);另外,早產(chǎn)兒血清中RANTES的濃度要明顯低于足月兒;而在早產(chǎn)兒中,攜帶In1.1CC基因型的早產(chǎn)兒,其血清中RANTES的表達水平顯著降低(P0.001)。3.在所有樣本中,TNF-α基因G-308A多態(tài)性位點各等位基因分布頻率和基因型的構(gòu)成比在病例組和對照組之間無顯著性差異,TNF-αG-308A位點與SPTB的患病風險無顯著的遺傳學關(guān)聯(lián)(OR 0.85;95%CI,0.61-1.19;P=0.35);與合并或不合并PROM的SPTB的患病風險均無顯著的遺傳學關(guān)聯(lián)(OR 0.77;95%CI,0.45-1.31;P=0.32;OR 0.88;95%CI,0.62-1.27;P=0.51);與超早產(chǎn)(OR 0.39;95%CI,0.12-1.28;P=0.08)、極早產(chǎn)(OR 0.68;95%CI,0.38-1.19;P=0.16)和輕度早產(chǎn)(OR 1.02;95%CI,0.71-1.46;P=0.92)的患病風險也均無顯著的遺傳學關(guān)聯(lián)。4.在所有樣本中,IL-15基因rs10833多態(tài)性位點與SPTB的患病風險無顯著的遺傳學關(guān)聯(lián),與超早產(chǎn)、極早產(chǎn)和輕度早產(chǎn)的患病風險均無顯著的遺傳學關(guān)聯(lián)。然而,不論是否合并PROM,A等位型(GA+AA基因型)都與SPTB的患病風險顯著相關(guān)(OR 0.46;95%CI,0.23-0.92;P=0.017;OR 1.47;95%CI,1.04-2.09;P=0.031)。5.與攜帶IL-1β基因C+3953T多態(tài)性位點的CC基因型的個體相比,攜帶至少一個T等位基因型(CT+TT基因型)的個體發(fā)生SPTB(OR 1.63;95%CI,1.02-2.59;P=0.036)、合并PROM的SPTB(PPROM)(OR 2.36;95%CI,1.32-4.23;P=0.005)和輕度早產(chǎn)(OR 1.79;95%CI,1.09-2.94;P=0.022)的風險顯著升高。6.與攜帶MMP-8基因C-799T多態(tài)性位點-799 CC基因型的個體相比,攜帶至少一個-799 T等位型(CT+TT基因型)的個體發(fā)生SPTB(OR 0.79;95%CI,0.63-0.97;P=0.027)、合并PROM的SPTB(PPROM)(OR 0.67;95%CI,0.49-0.92;P=0.014)以及輕度早產(chǎn)(OR 0.78;95%CI,0.61-0.99;P=0.037)的風險顯著降低。與攜帶至少一個C等位型(CC+CT基因型)的個體相比,TT基因型與不合并PROM的SPTB的患病風險的降低有臨界的相關(guān)性(OR 0.71;95%CI,0.50-1.00;P=0.049)結(jié)論:1.MCP-1基因G-2518A多態(tài)性位點、RANTES基因In1.1 T/C多態(tài)性位點、IL-15基因rs10833多態(tài)性位點、IL-1β基因C+3953T多態(tài)性位點和MMP-8基因C-799T多態(tài)性位點,這些SNP位點可以影響SPTB的遺傳易感性。2.早產(chǎn)兒血清中的RANTES濃度要明顯低于足月兒,RANTES In1.1 T/C位點的CC基因型和早產(chǎn)兒血清中RANTES的低表達相關(guān),提示RANTES基因In1.1 T/C多態(tài)性位點可通過調(diào)控血清中RANTES的表達水平來影響個體對SPTB的易感性。3.在中國人群中,IL-1β基因C+3953T多態(tài)性位點與SPTB的患病風險的增加存在顯著的遺傳學關(guān)聯(lián)。這一SNP位點的發(fā)現(xiàn)對于預防SPTB的發(fā)生,闡明SPTB的病因和發(fā)病機制具有重要意義。
[Abstract]:鑳屾櫙:鏃╀駭(Preterm Birth,PTB)鏄寚鍦ㄥ濞犱笉婊，

本文編號：1885471