人卵巢顆粒細(xì)胞原代培養(yǎng)方法的比較
發(fā)布時間:2018-05-03 05:01
本文選題:卵巢顆粒細(xì)胞 + 細(xì)胞分離方法 ; 參考:《廣東醫(yī)學(xué)》2017年S1期
【摘要】:目的對比5種不同方法分離人卵巢顆粒細(xì)胞的效果,并選擇出高效、穩(wěn)定的分離純化、體外培養(yǎng)的有效方法。方法收集不孕癥患者行體外受精-胚胎移植(IVF-ET)穿卵時的卵泡液,采用裂解法、裂解+胰酶法、密度梯度離心法(包括Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型膠原酶、Precoll+透明質(zhì)酸酶)分離顆粒細(xì)胞后進行活細(xì)胞計數(shù),卵泡生成素免疫組化染色鑒定,MTT法檢測細(xì)胞增殖能力,檢測顆粒細(xì)胞體外分泌雌激素含量。結(jié)果在使用不同方法分離顆粒細(xì)胞時,Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型膠原酶、Precoll+透明質(zhì)酸酶3種方法得到細(xì)胞數(shù)量多于裂解法及裂解+胰酶法(P0.05)。各種分離方法的細(xì)胞生長趨勢并無明顯差異。裂解法、裂解+胰酶法雌激素含量高于Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型膠原酶、Precoll+透明質(zhì)酸酶(P0.05)。結(jié)論 5種方法均成功分離得到顆粒細(xì)胞,但每種方法各有優(yōu)缺點,根據(jù)實驗?zāi)康牟煌柽x擇不同的方法。
[Abstract]:Objective to compare the effects of five different methods on the isolation of human ovarian granulosa cells and to select an efficient and stable method for isolation and purification of human ovarian granulosa cells in vitro. Methods the follicular fluid of infertile patients undergoing IVF-ET-IVF-ET in vitro fertilization was collected, and the cleavage method and trypsin method were used. Granulosa cells were isolated by density gradient centrifugation (including Precoll trypsin 鈪,
本文編號:1837062
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