人臍帶間充質(zhì)干細胞移植治療小鼠復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)效果及其機制探討
本文選題:人臍帶間充質(zhì)干細胞 + 自然流產(chǎn)。 參考:《山東醫(yī)藥》2017年03期
【摘要】:目的觀察人臍帶華通氏膠間充質(zhì)干細胞(WJ-MSCs)移植治療復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)小鼠的效果,并探討其機制。方法雌性CBA/J小鼠與雄性BALB/c小鼠按1∶1比例合籠交配,制作正常妊娠小鼠模型(對照組,5只)。雌性CBA/J小鼠與雄性DBA/2小鼠按1∶1比例合籠交配,制作復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)小鼠模型20只,分為模型組、實驗1組、實驗2組、實驗3組,每組各5只。模型組于孕1天經(jīng)尾靜脈注射DMEM/F12培養(yǎng)基0.2 mL;各實驗組于孕第1天經(jīng)尾靜脈注射WJ-MSCs 0.2 mL(6×107個/mL),其中實驗1組僅注射1次,實驗2組隔天注射1次、連續(xù)2次,實驗3組隔天注射1次、連續(xù)3次。分別于孕第14天處死各組小鼠,計算胚胎吸收率;取小鼠蛻膜及胎盤組織,采用Western blotting法檢測IL-10、IL-17、IFN-γ蛋白,qRT-PCR法檢測IL-10、IL-17、IFN-γmRNA。結(jié)果模型組及實驗1組胚胎吸收率高于對照組,實驗3組胚胎吸收率均低于模型組和實驗1組(P均0.05)。實驗1、2組IL-17蛋白相對表達量高于對照組,實驗3組低于對照組(P均0.05)。實驗1組蛻膜及胎盤組織中IFN-γmRNA相對表達量高于對照組,實驗2、3組低于對照組(P均0.05)。實驗1、2、3組蛻膜及胎盤組織中IL-10 mRNA和蛋白相對表達量高于模型組,IL-17、IFN-γmRNA和蛋白相對表達量低于模型組(P均0.05)。實驗1、2、3組蛻膜及胎盤組織中的IL-10 mRNA和蛋白相對表達量遞增,IL-17 mRNA和蛋白、IFN-γ蛋白相對表達量遞減,除實驗2、3組IFN-γmRNA表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義外,各組其余指標相比,P均0.05。結(jié)論 WJ-MSCs移植后復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)模型小鼠的胚胎吸收率降低,其機制可能與上調(diào)母-胎界面IL-10表達、下調(diào)IL-17及IFN-γ表達有關(guān)。
[Abstract]:Objective to observe the effect of WJ-MSCs transplantation on recurrent spontaneous abortion in mice with human umbilical cord Huatong's gum mesenchymal stem cells (WJ-MSCs) and to explore its mechanism. Methods female CBA/J mice and male BALB/c mice were mated in a cage at 1:1 to make normal pregnant mice model (control group, 5 mice). A total of 20 female CBA/J mice and male DBA/2 mice were mated in a cage at 1:1. The mice were divided into three groups: model group, experimental group 1, experimental group 2 and experimental group 3, each with 5 mice in each group. On the first day of gestation, the model group was injected with DMEM/F12 medium (0.2 mL) via caudal vein, and each experimental group was injected with WJ-MSCs 0.2 mL(6 脳 107 mLL on the first day of pregnancy. The experimental group 1 was injected only once, and the second group was injected once every other day for 2 consecutive times. Group 3 was injected once every other day for 3 consecutive times. On the 14th day of gestation, the mice were killed to calculate the embryo absorption rate, and the decidua and placenta of the mice were collected, and IL-10 IL-17 IFN- 緯 protein was detected by Western blotting method, and IL-10 IL-17 IFN- 緯 mRNA was detected by qRT-PCR. Results the embryo absorptivity of model group and experimental group 1 was higher than that of control group, and the embryo absorption rate of experimental group 3 was lower than that of model group and experiment 1 group (P < 0.05). In experiment 1, the relative expression of IL-17 protein in group 2 was higher than that in control group, and that in group 3 was lower than that in control group (P < 0.05). The relative expression of IFN- 緯 mRNA in decidua and placenta of experimental group 1 was higher than that of control group, and the level of IFN- 緯 mRNA in group 2 was lower than that in control group (P 0.05). In experiment 1, the relative expression of IL-10 mRNA and protein in decidua and placenta was higher than that in model group. The relative expression of IFN- 緯 mRNA and protein in decidua and placenta was lower than that in model group (P < 0.05). In experiment 1, the relative expression of IL-10 mRNA and protein in decidua and placenta was increased and the relative expression of IL-17 mRNA and protein IFN- 緯 was decreased. Except for experiment 2, there was no significant difference in the expression of IFN- 緯 mRNA in the three groups, and the other indexes in each group were 0.05 compared with each other (P < 0.05). Conclusion the embryo absorption rate of recurrent spontaneous abortion model mice after WJ-MSCs transplantation is decreased, which may be related to the up-regulation of IL-10 expression and down-regulation of IL-17 and IFN- 緯 expression at the maternal and fetal interface.
【作者單位】: 南通大學(xué)附屬醫(yī)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年基金資助項目(81401272)
【分類號】:R714.21
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,本文編號:1807963
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