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miR-101對(duì)上皮性卵巢癌SKOV3細(xì)胞抗失巢凋亡的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-13 04:00

  本文選題:miR- + 上皮性卵巢癌 ; 參考:《現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展》2017年02期


【摘要】:目的:探討miRNA-101(miR-101)對(duì)上皮性卵巢癌SKOV3細(xì)胞抗失巢凋亡的作用,以及在失巢凋亡過(guò)程中可能的作用機(jī)制。方法:構(gòu)建失巢凋亡模型模擬卵巢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的生長(zhǎng)狀態(tài);用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000將miR-101 mimics及miR-NC轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞,隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、miR-空白質(zhì)粒組(miR-NC組)和miR-101質(zhì)粒組。RTPCR法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)miR-101 mRNA表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)及劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲及遷移能力;RT-PCR及Western blot法檢測(cè)c-fos基因mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:失巢凋亡模型構(gòu)建成功,模型中SKOV3細(xì)胞呈懸浮、團(tuán)簇狀生長(zhǎng);將miR-101 mimics轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞后,SKOV3細(xì)胞中miR-101表達(dá)水平增加,同時(shí)癌細(xì)胞失巢凋亡增加;透膜細(xì)胞數(shù)量及細(xì)胞遷移距離減少;c-fos mRNA和蛋白表達(dá)水平均降低。結(jié)論:miR-101過(guò)表達(dá)可增加SKOV3細(xì)胞失巢凋亡,降低細(xì)胞侵襲及遷移能力,下調(diào)c-fos基因表達(dá)可能是其作用分子機(jī)制。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of miRNA-101 miR-101) on apoptosis of epithelial ovarian cancer SKOV3 cells and its possible mechanism.Methods: a model of apoptosis without nest was constructed to mimic the growth of ovarian cancer cells, and miR-101 mimics and miR-NC were transfected into SKOV3 cells by liposome Lipofectamine 2000.MiR-101 plasmid group and miR-101 plasmid group were used to detect the expression of miR-101 mRNA in the cells by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR).The rate of apoptosis was detected by flow cytometry and the expression of c-fos gene mRNA and protein was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot assay respectively.Results: the model of apoptosis was successfully constructed, the SKOV3 cells in the model were suspended and clustered, the expression of miR-101 in SKOV3 cells increased after transfection of miR-101 mimics into SKOV3 cells, and the apoptosis of cancer cells increased.The expression of c-fos mRNA and protein decreased in the number of permeable cells and the distance of cell migration.Conclusion the overexpression of miR-101 can increase the apoptosis of SKOV3 cells and decrease the ability of cell invasion and migration. The down-regulation of c-fos gene expression may be the molecular mechanism.
【作者單位】: 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;華北理工大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院;華北理工大學(xué)臨床學(xué)院;
【基金】:河北省臨床醫(yī)學(xué)優(yōu)秀人才培養(yǎng)(No:310103020704)
【分類(lèi)號(hào)】:R737.31

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本文編號(hào):1742808

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