本文選題：卵巢癌　切入點：ELF基因　出處：《山東醫(yī)藥》2017年13期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討ELF5基因?qū)θ寺殉舶┘毎忠u轉(zhuǎn)移和大鼠移植瘤生長的抑制作用以及可能的機制。方法體外實驗:人卵巢癌細胞隨機分為重組質(zhì)粒組、空質(zhì)粒組、未經(jīng)轉(zhuǎn)染組,重組質(zhì)粒組、空質(zhì)粒組分別轉(zhuǎn)染構(gòu)建好的pcDNA3.1-ELF5+EGFP真核表達載體、空載質(zhì)粒pcDNA3.1-EGFP,未經(jīng)轉(zhuǎn)染組未經(jīng)任何轉(zhuǎn)染。Q-PCR法檢測各組ELF5 mRNA的相對表達量,Western blotting法檢測基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2及MMP-9蛋白的相對表達量;Traswell試驗評價ELF5對卵巢癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響。體內(nèi)試驗:建立人卵巢癌NOD/SCID鼠左前肢腋下移植瘤模型,應(yīng)用隨機數(shù)字表法將大鼠分為3組,即重組質(zhì)粒大鼠組(轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-ELF5+EGFP的人卵巢癌細胞)、空質(zhì)粒大鼠組(轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒的人卵巢癌細胞)、未經(jīng)轉(zhuǎn)染大鼠組(未經(jīng)轉(zhuǎn)染的人卵巢癌細胞),將處于對數(shù)生長期的3組細胞2×104/m L接種于NOD/SCID小鼠左前肢腋下。對比3組小鼠的移植瘤質(zhì)量和體積,計算各組小鼠腫瘤抑制率(首先對轉(zhuǎn)移瘤行HE染色進行病理組織學(xué)檢查以確定其致瘤性)。Western blotting法檢測3組NOD/SCID小鼠移植瘤組織中MMP-2及MMP-9蛋白的相對表達量。結(jié)果人卵巢癌細胞轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-ELF5+EGFP真核表達載體后,可穩(wěn)定表達,且于72 h后轉(zhuǎn)染率較高;與空質(zhì)粒組和未經(jīng)轉(zhuǎn)染組比較,重組質(zhì)粒組MMP-2及MMP-9蛋白相對表達量降低(P均0.05)。Transell試驗中,重組質(zhì)粒組穿膜細胞數(shù)少于空質(zhì)粒組及未經(jīng)轉(zhuǎn)染組(P均0.05)。重組質(zhì)粒大鼠組抑瘤率達64.4%。重組質(zhì)粒大鼠組與其余兩組比較,其瘤組織中MMP-2及MMP-9蛋白相對表達量降低(P0.05),而空質(zhì)粒大鼠組和未經(jīng)轉(zhuǎn)染大鼠組比較,P均0.05。結(jié)論 ELF5基因可能通過抑制MMP-2及MMP-9的表達而降低卵巢癌細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect of ELF5 gene on invasion and metastasis of human ovarian cancer cells and the growth of transplanted tumor in rats. Methods Human ovarian cancer cells were randomly divided into three groups: recombinant plasmid group, empty plasmid group and untransfected group. The recombinant plasmid group and the empty plasmid group were transfected with the constructed eukaryotic expression vector of pcDNA3.1-ELF5 EGFP, respectively. The relative expression of ELF5 mRNA in the untransfected group was detected without any transfection. The relative expression of matrix metalloproteinase MMP-2 and MMP-9 protein in each group was detected by Western blotting. The invasion and metastasis of ELF5 to ovarian cancer cells were evaluated by Traswell test. Effect. In vivo test: establish the model of left forelimb axillary transplantation tumor in NOD/SCID mice of human ovarian cancer, The rats were divided into three groups by random digital table. The recombinant plasmid group (human ovarian cancer cells transfected with pcDNA3.1-ELF5 EGFP, empty plasmid rats) and untransfected rats (untransfected human ovarian cancer cells) will be in logarithmic growth phase. The 3 groups were inoculated with 2 脳 10 4 / mL cells under the left forelimb axilla of NOD/SCID mice. The tumor mass and volume of the transplanted tumor were compared in the three groups. The tumor inhibition rate of each group was calculated. First, the tumor metastasis was stained by HE staining to determine the relative expression of MMP-2 and MMP-9 protein in the transplanted tumor tissues of NOD/SCID mice. Results the expression of MMP-2 and MMP-9 protein in the transplanted tumor tissues of three groups of NOD/SCID mice was determined by the method of HE staining to determine the relative expression of MMP-2 and MMP-9 protein in the transplanted tumor tissues of the three groups. After transfection of pcDNA3.1-ELF5 EGFP eukaryotic expression vector into Nest cancer cells, The relative expression of MMP-2 and MMP-9 protein in the recombinant plasmid group was lower than that in the blank plasmid group and the untransfected group, and the relative expression of MMP-2 and MMP-9 protein in the recombinant plasmid group was lower than that in the blank plasmid group and the untransfected group. The number of perforated cells in the recombinant plasmid group was less than that in the blank plasmid group and the untransfected group (P < 0.05). The tumor inhibition rate in the recombinant plasmid group was 64.4.The recombinant plasmid group was compared with the other two groups. The relative expression of MMP-2 and MMP-9 protein in tumor tissue decreased P0.05, while that in blank plasmid group was 0.05 compared with that in untransfected group. Conclusion ELF5 gene may reduce the invasion and metastasis ability of ovarian cancer cells by inhibiting the expression of MMP-2 and MMP-9.
【作者單位】： 徐州醫(yī)科大學(xué)研究生院;徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院;
【分類號】：R737.31

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本文編號：1619209