本文選題：稽留流產(chǎn)　切入點：BPA　出處：《吉林大學》2014年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：【研究背景】 雙酚A(bisphenol A，BPA)屬雙酚類化合物，具有雌激素樣作用，是一種環(huán)境雌激素。BPA作為塑料工業(yè)生產(chǎn)聚碳酸酯、環(huán)氧樹脂、酚醛樹脂等物質(zhì)的前體物質(zhì)，是一種廣泛應用的化工原料，隨著含BPA產(chǎn)品的廣泛應用，BPA已造成了嚴重的環(huán)境污染。BPA可通過多種途徑影響人體內(nèi)分泌及代謝，導致代謝紊亂。大量研究表明，BPA不僅對心腦血管疾病、II型糖尿病及肥胖等疾病有影響，而且還對中樞神經(jīng)系統(tǒng)，內(nèi)分泌、生殖和免疫系統(tǒng)的發(fā)育有危害�；贐PA對人類健康的廣泛危害，闡明BPA對人類健康的影響及其分子機制，進而開發(fā)出各種防制措施是當前的研究熱點。 以往研究表明，BPA不僅可引起雄性哺乳動物性腺發(fā)育不良、精子數(shù)量減少等，并對子代生育能力產(chǎn)生影響，而且還可引起雌性哺乳動物陰道、子宮、卵巢等生殖器官形態(tài)和功能的改變，與復雜性子宮內(nèi)膜過度增生及流產(chǎn)等疾病的發(fā)生密切相關(guān)。稽留流產(chǎn)，又稱過期流產(chǎn)，指孕20周前宮內(nèi)胚胎或胎兒死亡后未及時排出者。目前，其病因尚不明確，已有實驗研究表明，稽留流產(chǎn)與染色體數(shù)量異常有關(guān)，血清BPA濃度與復發(fā)性流產(chǎn)有關(guān)，但BPA與稽留流產(chǎn)的關(guān)系及其機制尚未明確，因此，本研究目的如下: 【目的】 1、通過探討稽留流產(chǎn)患者血清中BPA水平與稽留流產(chǎn)的關(guān)系，同時檢測稽留流產(chǎn)患者胚胎染色體改變，從而揭示環(huán)境雌激素BPA影響流產(chǎn)是否與染色體數(shù)目異常相關(guān)，為稽留流產(chǎn)的病因?qū)W研究提供新的思路。 2、通過體外獲取經(jīng)BPA染毒處理的小鼠卵母細胞，對染色體核型進行分析，檢測相關(guān)基因表達變化，并構(gòu)建BPA染毒小鼠妊娠模型，體內(nèi)驗證BPA處理階段對妊娠小鼠胚胎數(shù)量和質(zhì)量及相關(guān)激素分泌和基因表達的影響，初步探究BPA導致流產(chǎn)的分子機制。 【對象和方法】 本課題共分三部分內(nèi)容，第一部分為臨床研究。選擇2010年7月-2013年2月吉林大學第一醫(yī)院產(chǎn)科門診及住院的稽留流產(chǎn)的孕婦109例，并選取52例孕20周內(nèi)因計劃外妊娠要求人工流產(chǎn)或引產(chǎn)的正常妊娠孕婦作為對照，記錄年齡、體重指數(shù)、職業(yè)等人口學指標和臨床病理特點。采用高效液相色譜分析法檢測血清BPA濃度。取流產(chǎn)患者的絨毛及胎兒組織，采用熒光原位雜交法檢測染色體異常情況。第二部分為體外實驗，給予ICR雌小鼠雙酚A染毒處理后，收集卵母細胞，采用C帶染色法分析染色體核型，通過實時熒光定量PCR檢測卵母細胞減數(shù)分裂相關(guān)基因表達變化，初步探討B(tài)PA導致妊娠流產(chǎn)的分子機制。第三部分為體內(nèi)研究，構(gòu)建BPA染毒小鼠妊娠模型，分成BPA不同處理組，明確BPA對妊娠小鼠胚胎數(shù)量和質(zhì)量的影響及其相關(guān)分子機制。 【結(jié)果】 1、本研究共收集109例稽留流產(chǎn)樣本，其中11例樣本因胎兒在宮內(nèi)死亡時間過長或其他因素未能檢測到細胞，視為無效樣本。此外，收集了52例正常妊娠者作為對照組�；袅鳟a(chǎn)組與正常妊娠組患者的在年齡、體重指數(shù)、孕期、吸煙和飲酒情況、職業(yè)、受教育程度及民族等人口學指標上均衡可比，差異無統(tǒng)計學意義。血清BPA高效液相熒光色譜結(jié)果顯示稽留流產(chǎn)組患者血清BPA濃度（3.381.01μg/L）明顯高于正常妊娠者（1.450.52μg/L），兩組間差異有統(tǒng)計學意義（P=0.001）。亞組分析結(jié)果提示，稽留流產(chǎn)患者中不同妊娠周期（P=0.768）和胚胎性別（P=0.853）者血清BPA水平無明顯差異。但胚胎染色體異常者血清BPA水平明顯高于染色體正常者，差異有統(tǒng)計學意義（P0.001）。在調(diào)整了年齡、體重指數(shù)、職業(yè)、民族等方面因素后，隨著血清BPA水平的升高，胚胎染色體異常的發(fā)生風險逐漸增加(趨勢檢驗P0.05)。FISH檢測結(jié)果顯示，98例患者中共21例出現(xiàn)染色體異常，單純常染色體出現(xiàn)異常15例，單純性染色體異常4例。性染色體異常XXY聯(lián)合18號染色體三體異常1例，聯(lián)合21號染色體單體異常1例。 2、染色體C帶染色法分析結(jié)果顯示，BPA染毒14d的ICR雌鼠MII期卵母細胞染色體出現(xiàn)異常，主要表現(xiàn)為非整倍體。與對照組相比，BPA處理組小鼠MII期卵母細胞染色體異常的發(fā)生率顯著升高。熒光定量PCR結(jié)果提示，BPA處理不同時間的小鼠卵母細胞減數(shù)分裂標志基因（Stra8和Nalp5)較對照組均顯著提高，但調(diào)控染色體聚合（Smc1β）和聯(lián)會（Sycp1）的基因表達在兩組之間無顯著差異。此外，BPA處理可顯著上調(diào)卵母細胞雙鏈DNA斷裂和修復相關(guān)基因的表達(Spo11，Rpa，H2ax和Blm)，但Mlh1的表達無明顯變化。 3、妊娠前BPA灌胃（5mg/kg/d）處理14d可抑制妊娠期胚胎和子宮的發(fā)育，顯著降低了胚胎數(shù)量，而妊娠期間BPA灌胃（5mg/kg/d）處理11d并不影響胚胎和子宮的發(fā)育。妊娠前BPA灌胃（5mg/kg/d）處理14d對妊娠期胚胎發(fā)育的抑制作用，可能是通過下調(diào)子宮中ERα、PR基因表達來實現(xiàn)的。 【結(jié)論】 1、稽留流產(chǎn)患者血清BPA濃度顯著高于正常妊娠者，提示孕婦血清中BPA濃度升高與稽留流產(chǎn)密切相關(guān)�；袅鳟a(chǎn)患者中胚胎染色體數(shù)目異常者血清BPA濃度顯著高于染色體正常者，提示BPA濃度升高與稽留流產(chǎn)的胚胎染色體數(shù)目異常密切相關(guān)。 2、BPA染毒處理14d可以導致小鼠卵母細胞染色體核型發(fā)生異常改變，可能與其上調(diào)減數(shù)分裂過程中相關(guān)基因（Stra8、Nalp5、Spo11、Rpa、 H2ax和Blm)表達有關(guān)。 3、妊娠前BPA染毒處理和妊娠前及妊娠期間連續(xù)染毒處理可以減少妊娠小鼠胚胎數(shù)量和重量，而妊娠期間BPA染毒并不影響胚胎數(shù)量和重量，推測BPA對卵母細胞發(fā)育可能產(chǎn)生不良影響。妊娠前BPA處理可降低子宮重量，子宮中ER、PR基因表達量下降，，推測BPA可能通過影響ER、PR表達，從而影響雌孕激素對子宮的作用。而且，ER、PR表達下降進而影響胚胎著床亦不除外為自然流產(chǎn)的原因。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R714.21

【共引文獻】

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2 黃伯賢;覃蓮菊;崔毓桂;劉嘉茵;;雙酚A在日常生活中的接觸及其對人類生殖內(nèi)分泌的干擾[J];生殖與避孕;2013年10期

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4 宋順U

本文編號：1588488