miR-425對(duì)卵巢癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響及其機(jī)制
本文選題:卵巢腫瘤 切入點(diǎn):miR- 出處:《山東醫(yī)藥》2016年45期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討miR-425對(duì)卵巢癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響及其機(jī)制。方法 RT-PCR測(cè)定卵巢細(xì)胞系SKOV3及正常卵巢細(xì)胞系HOSE中miR-425表達(dá)水平,將SKOV3細(xì)胞分為lent-shmiR-425和lent-shvector組,分別轉(zhuǎn)染lent-shmiR-425和lent-shvector,24 h后行細(xì)胞劃痕試驗(yàn)和Transwell侵襲小室試驗(yàn)。應(yīng)用Target Scan預(yù)測(cè)miR-425與PTEN因子3'端非翻譯區(qū)結(jié)合位點(diǎn)。將SKOV3細(xì)胞分成3組:野生型質(zhì)粒組、突變型質(zhì)粒組、陰性對(duì)照組,分別共轉(zhuǎn)染miR-425及野生型熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒p GL3-PTEN 3'UTR,miR-425和突變型熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒p GL3-PTEN 3'WT,miR-425和對(duì)照熒光素酶質(zhì)粒,用熒光素酶試驗(yàn)檢測(cè)各組熒光素酶活性。結(jié)果在卵巢癌細(xì)胞系SKOV3中miR-425相對(duì)表達(dá)量為2.1,正常卵巢細(xì)胞系HOSE為1.0,兩者比較,P0.05。lent-shmiR-425組劃痕愈合率為27.56%±2.14%,lent-shvector組劃痕愈合率為89.15%±6.24%,兩組比較,P0.05。lent-shmiR-425組侵襲細(xì)胞數(shù)為(75±10)個(gè)/200倍視野,lent-shvector組侵襲細(xì)胞數(shù)為(160±20)個(gè)/200倍視野,兩組比較,P0.05。Target Scan預(yù)測(cè)miR-425與PTEN因子3'端非翻譯區(qū)的結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合;野生型質(zhì)粒組、突變型質(zhì)粒組、陰性對(duì)照組熒光素酶活性分別為23.70±0.93、99.27±5.90、104.00±4.02。野生型質(zhì)粒組低于突變型質(zhì)粒組和陰性對(duì)照組(P均0.05)。突變型質(zhì)粒組與陰性對(duì)照組比較,P0.05。結(jié)論 miR-425水平升高可促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞遷移和侵襲,其機(jī)制可能與miR-425靶向調(diào)節(jié)PTEN表達(dá)有關(guān)。光素酶活性分別為23.70±0.93、99.27±5.90、104.00±4.02。野生型質(zhì)粒組低于突變型質(zhì)粒組和陰性對(duì)照組(P均0.05)。突變型質(zhì)粒組與陰性對(duì)照組比較,P0.05。結(jié)論 miR-425水平升高可促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞遷移和侵襲,其機(jī)制可能與miR-425靶向調(diào)節(jié)PTEN表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miR-425 on migration and invasion of ovarian cancer cells and its mechanism. Methods the expression of miR-425 in ovarian cell line SKOV3 and normal ovarian cell line HOSE was determined by RT-PCR. SKOV3 cells were divided into lent-shmiR-425 and lent-shvector groups. After transfection of lent-shmiR-425 and lent-shvectorus for 24 h, cell scratch test and Transwell invasion chamber test were performed. Target Scan was used to predict the 3'untranslated site of miR-425 and PTEN factor. SKOV3 cells were divided into three groups: wild-type plasmid group, mutant plasmid group and negative control group. MiR-425 and wild-type luciferase reporter plasmids p GL3-PTEN _ 3 UTR-miR-425, mutant luciferase reporter plasmids p GL3-PTEN _ 3 ~ + WTT ~ + miR-425 and control luciferase plasmids were cotransfected, respectively. Luciferase test was used to detect luciferase activity in each group. Results the relative expression of miR-425 was 2.1 in ovarian cancer cell line SKOV3 and 1.0 in normal ovarian cell line HOSE. The rate of scratch healing of P0.05.lent-shmiR-425 group was 27.56% 鹵2.14% and the rate of scratch healing was 89.15% 鹵6.24 in the two groups. The number of invading cells in P0.05.lent-shmiR-425 group was 75 鹵10) and the number of invading cells in LHS vector group was 160 鹵20%. P0.05. Target Scan was used to predict the binding site of miR-425 to 3 'untranslated region of PTEN factor, wild type plasmid group, mutant plasmid group, wild type plasmid group, mutagenesis plasmid group, 3' -terminal untranslated region of PTEN factor. The luciferase activity in the negative control group was 23.70 鹵0.93 鹵99.27 鹵5.90 鹵104.00 鹵4.02 respectively. The level of miR-425 in the wild type plasmid group was lower than that in the mutant plasmid group and the negative control group (P < 0.05). Conclusion the increase of miR-425 level can promote the migration and invasion of ovarian cancer cells. The mechanism may be related to the targeting regulation of PTEN expression by miR-425. The photoenzyme activity is 23.70 鹵0.93 鹵99.27 鹵5.90,104.00 鹵4.02 respectively. The level of miR-425 in the wild type plasmid group is lower than that in the mutant plasmid group and the negative control group (P 0.05). Conclusion the level of miR-425 in the mutant plasmid group is higher than that in the negative control group. Elevated ovarian cancer can promote migration and invasion of ovarian cancer cells. The mechanism may be related to the targeting regulation of PTEN expression by miR-425.
【作者單位】: 武漢市武昌醫(yī)院;
【分類號(hào)】:R737.31
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,本文編號(hào):1587159
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