發(fā)布時間：2018-03-02 08:06

  本文關(guān)鍵詞： A型肉毒毒素 雌激素 孕激素 胚胎發(fā)育 孕鼠　出處：《遵義醫(yī)學院》2014年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的：探討肌肉注射A型肉毒毒素（BTX-A）對SD孕鼠血清雌激素、孕激素及其受體在生殖器官中表達的影響，了解BTX-A對胚胎的發(fā)育毒性，為BTX-A在臨床用藥的安全性提供理論依據(jù)和實驗參考數(shù)據(jù)。 方法： 1．BTX-A急性毒性試驗：對SD雄性大鼠肌肉注射BTX-A檢測最小致死量（MLD）與半數(shù)致死量（LD50）。(1)選健康成年普通級雄性SD大鼠20只，隨機分為4組，右側(cè)腓腸肌肌肉注射15U/kg、30U/kg、60U/kg、90U/kgWB4個劑量的BTX-A，觀察BTX-A對大鼠的最小致死劑量（在90U/kg）。(2)選雄性SD大鼠50只，隨機分為5組，以MLD為基礎(chǔ)設(shè)計右側(cè)腓腸肌肌肉注射劑量62U/kg、77U/kg、96U/kg、120U/kg、150U/kgWB5個劑量組，觀察各組大鼠中毒、死亡情況，根據(jù)孫氏綜合法改進的查表法，計算出BTX-A對SD大鼠7天的LD50。 2．BTX-A對SD孕鼠血清雌激素、孕激素及受體表達、胚胎發(fā)育的影響：選SD孕鼠60只，隨機分為6組每組10只。陰性對照組(NS，0.5ml/只)肌肉注射；A型肉毒毒素藥物組分4個劑量（BTX-A30U/kg、60U/kg、90U/kg、120U/kgWB）肌肉注射；維甲酸藥物對照組（100mg/kgWB灌胃）。各組孕鼠均于孕第8天給藥1次，于孕18天麻醉取材。(1)孕鼠檢測指標：測孕期體重增重率、卵巢與子宮重量指數(shù)、ELISA法測孕鼠血清雌激素、孕激素水平和IHC法測卵巢、子宮的雌激素受體與孕激素受體表達的情況。(2)胚胎檢測指標：胚胎畸形、存活率、胎重、身長、尾長及四肢主要骨的骨長與骨化的檢測。 結(jié)果： 1. BTX-A對大鼠急毒試驗：(1)最小致死量檢測(MLD)：正常成年雄性大鼠分4組肌肉注射BTX-A（15U/kg、30U/kg、60U/kg、90U/kg），當劑量為90U/kg時出現(xiàn)急性中毒癥狀并出現(xiàn)死亡，由此提示BTX-A對大鼠的MLD為90U/kg。(2)半數(shù)致死量檢測(LD50)：在MLD基礎(chǔ)上再設(shè)BTX-A62U/kg、77U/kg、96U/kg、120U/kg、150U/kg等5個劑量組，最高劑量組(150U/kg)中毒癥狀最嚴重，7天死亡率達100%，根據(jù)孫氏綜合法改進的查表法計算得出BTX-A對大鼠的LD50為114.77U/kg。 2. BTX-A對SD孕鼠孕期體重增重率、血清激素水平、生殖器官重量指數(shù)及其激素受體的影響：孕第18天檢測各組孕鼠：①各組孕鼠在孕15天時，除BTX-A30U/kg劑量組外，，BTX-A其余3個劑量組孕鼠體重均低于陰性對照組，孕18天時僅有120U/kg劑量組體重低于陰性對照組，相比均有顯著性差異(P＜0.05)；②BTX-A4個劑量組的血清雌激素、孕激素值均低于陰性對照組，除30U/kg劑量組以外，其余3組與陰性對照組比較，均有顯著性差異(P＜0.05)。③卵巢和子宮90U/kg、120U/kg劑量組的重量指數(shù)均低于陰性對照組，相比均有顯著性差異(P＜0.05)。④BTX-A各劑量組孕鼠子宮內(nèi)膜與卵巢黃體的ER、PR表達均高于陰性對照組，相比均有顯著性差異(P＜0.05)。且隨著BTX-A劑量增加而表達增強。 3. BTX-A對大鼠E18胚胎發(fā)育的影響：①BTX-A劑量為120U/kg時，胚胎活胎率低于與陰性對照組，兩組相比有顯著性差異(P＜0.05)。BTX-A60U/kg、90U/kg劑量組出現(xiàn)畸形胚胎。②BTX-A120U/kg劑量組胚胎體重、尾長與身長均低于陰性對照組，比較有顯著性差異(P＜0.05)，BTX-A4個劑量組的胎盤重均低于陰性對照組，相比較均有顯著性差異(P＜0.05)。③BTX-A劑量達60U/kg、90U/kg時前肢肩胛骨、肱骨、尺骨、橈骨及后肢髖骨長度小于陰性對照組，比較有顯著性差異(P＜0.05)，而股骨、脛骨、腓骨長度在BTX-A劑量60U/kg、90U/kg時均低于陰性對照組，比較有顯著性差異(P＜0.05)。上述所有骨的骨化點長度在BTX-A的劑量30U/kg、60U/kg、90U/kg時均小于陰性對照組，相比較均有顯著性差異(P＜0.05)。 結(jié)論： 4.1大鼠肌肉注射BTX-A的最小致死劑量為90U/kg，而半數(shù)致死量為114.77U/kg。 4.2本實驗條件下，孕鼠肌肉注射BTX-A劑量小于30U/kg時無母體毒性，無胚胎發(fā)育毒性。當劑量大于60U/kg時隨劑量增加，孕鼠母體毒性與胚胎發(fā)育毒性逐漸加重，且有致畸作用。 提示：微量肌肉注射BTX-A在安全劑量范圍內(nèi)（小于30U/kg）無孕鼠母體毒性及胚胎發(fā)育毒性作用，無致畸作用。
[Abstract]:Objective: To investigate the effect of intramuscular injection of botulinum toxin type A (BTX-A) on the expression of estrogen, progesterone and its receptors in reproductive organs of SD pregnant rats, and to understand the developmental toxicity of BTX-A to embryos, and to provide theoretical basis and experimental reference data for the safety of BTX-A in clinical medication.
Method錛

本文編號：1555696